反左金丸抗腫瘤和抗轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究.pdf

1、惡性腫瘤是危害人類健康最嚴(yán)重的疾病之一，在我國常見致死病因中已占居首位。目前腫瘤治療多采用化療手段，但化療有著自身的缺陷，如：毒副作用大、易產(chǎn)生多藥耐藥等，因此，越來越多的人開始把目光重新投向傳統(tǒng)的中醫(yī)藥療法。左金丸源于《丹溪心法》，由黃連和吳茱萸按6：1組成，有清肝瀉火，降逆止嘔功效，現(xiàn)代藥理研究表明左金丸對(duì)胃癌有較好的防治作用，但其應(yīng)用缺乏依據(jù)。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，黃連和吳茱萸按1：6組成反左金丸在防治腫瘤中更有優(yōu)勢。本文從整體，分子

2、和細(xì)胞三個(gè)水平評(píng)價(jià)左金丸、反左金丸及在反左金丸基礎(chǔ)上添加商陸和肉桂組成的加味復(fù)方抗腫瘤的功效，為反左金丸用于腫瘤防治提供理論支持。
　　本課題體外實(shí)驗(yàn)采用MTT法檢測不同濃度的左金丸、反左金丸及復(fù)方酒浸液對(duì)人肺癌細(xì)胞（A549）增殖的影響；劃痕實(shí)驗(yàn)觀察三種藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞遷移能力的影響；AO染色檢測三種藥物對(duì)饑餓狀態(tài)下腫瘤細(xì)胞自噬的影響。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)采用H22肝癌小鼠皮下移植模型、lewis實(shí)驗(yàn)性肺癌轉(zhuǎn)移小鼠模型和烏拉坦誘導(dǎo)的小鼠肺癌模

3、型，評(píng)價(jià)左金丸、反左金丸及加味復(fù)方藥粉和水煎液對(duì)腫瘤的預(yù)防及治療作用，通過對(duì)荷瘤小鼠的精神狀態(tài)、體溫、生存率和自主活動(dòng)的觀察，評(píng)價(jià)藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠中醫(yī)學(xué)體征的影響；通過肺組織HE染色觀察藥物對(duì)肺癌小鼠肺癌組織病理學(xué)的影響，并檢測實(shí)驗(yàn)小鼠血清中APT、AFu、GP-73、SOD、MDA和LDH等含量的變化。另外，本文也通過蛋白印跡法，觀察受試藥物對(duì)Nanog、Oct3腫瘤干細(xì)胞標(biāo)記物表達(dá)的影響。
　　體外結(jié)果顯示：左金丸、反左金丸和加

4、味復(fù)方酒浸液都呈劑量相關(guān)性抑制A549肺癌細(xì)胞增殖，其 IC50分別為47.3，39.1，32.6μg/ml；三者對(duì)細(xì)胞遷移都有抑制作用，相同劑量下反左金丸和加味復(fù)方能更有效地抑制腫瘤細(xì)胞遷移。另外，反左金丸和加味復(fù)方還能顯著抑制腫瘤細(xì)胞饑餓狀態(tài)下的自噬。
　　體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：反左金丸和加味復(fù)方均能抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移，預(yù)防腫瘤發(fā)生，維持小鼠體溫恒定，提高小鼠生存質(zhì)量，降低血清中APT、AFu、GP-73、MDA和LDH水平，提高