松脂醇二葡萄糖苷藥代動(dòng)力學(xué)和代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、松脂醇二葡萄糖苷(Pinoresinol diglucoside，PDG)是從杜仲中提取出來(lái)的木脂素類化合物，對(duì)血壓具有升壓和降壓的雙向調(diào)節(jié)作用，主要起降壓作用。關(guān)于杜仲提取物藥理活性及作用機(jī)理已有報(bào)道，但松脂醇二葡萄糖苷的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)及主要代謝產(chǎn)物的研究目前尚少。
　　本文擬在研究其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)與排泄情況，并進(jìn)一步研究松脂醇二葡萄糖苷及其代謝物的規(guī)律。本文建立了快速、靈敏并且專屬性強(qiáng)的高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜(UPL

2、C-ESI/MS/MS)分析方法，測(cè)定大鼠血漿及尿液中松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇（Pinoresinol，PIN）、腸內(nèi)脂(Enterolactone，ENL)、腸二醇(Enterodiol，END)的含量，并且探討了PDG的藥代動(dòng)力學(xué)特征和排泄。為了進(jìn)一步揭示松脂醇二葡萄糖苷在大鼠體內(nèi)的代謝轉(zhuǎn)化情況，為探討其體內(nèi)藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)和新藥開(kāi)發(fā)打下基礎(chǔ)，本文對(duì)松脂醇二葡萄糖苷在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物進(jìn)行了深入的研究，采用高分辨率質(zhì)譜對(duì)松脂醇二葡萄糖

3、苷的代謝物進(jìn)行確證。
　　一、血漿樣品中松脂醇二葡萄糖苷、松脂醇、腸內(nèi)脂和腸二醇的 UPLC-ESI/MS/MS分析方法的建立
　　通過(guò)對(duì)色譜和質(zhì)譜條件進(jìn)行優(yōu)化，并建立了同時(shí)測(cè)定血漿樣品中上述四種藥物的超高效液相色譜-電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用法，最后對(duì)分析方法進(jìn)行了確證。結(jié)果表明：PDG、PIN、ENL和END均在1-1000 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r2>0.992)，定量限為1ng/mL，提取回收率重現(xiàn)性好，日內(nèi)和日間的

4、RSD、R.E均小于15％。實(shí)驗(yàn)確認(rèn)了該方法分析速度快，簡(jiǎn)便，專屬性強(qiáng)，靈敏度、準(zhǔn)確度高，并且穩(wěn)定性好，滿足本實(shí)驗(yàn)藥代動(dòng)力學(xué)研究中樣品分析的需要。
　　二、松脂醇二葡萄糖苷及其三種代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)研究
　　本論文采用 UPLC-ESI/MS/MS法測(cè)定了大鼠血漿中松脂醇二葡萄糖苷及其三種代謝產(chǎn)物的濃度，進(jìn)行松脂醇二葡萄糖苷灌胃給藥后在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。結(jié)果顯示: Cmax為638.43±43.52 ng

5、/mL，Tmax為0.089±0.02 h，AUC(0-∞)為2354.42±832.94 ng/mL·h，t1/2α為1.17±0.24 h，V/F為31.01±2.03 L/kg，CL/F為16.69±1.09 L/h/kg，表明松脂醇二葡萄糖苷灌胃給藥的體內(nèi)代謝過(guò)程符合二室模型。其他三種代謝產(chǎn)物只在12-48小時(shí)檢測(cè)到微量。
　　三、松脂醇二葡萄糖苷及其三種代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)的排泄研究
　　利用UPLC-ESI-MS分

6、析方法測(cè)定松脂醇二葡萄糖苷及其三種代謝產(chǎn)物在給藥大鼠尿液中含量，并考察大鼠尿液中松脂醇二葡萄糖苷的累計(jì)排泄規(guī)律;結(jié)果顯示灌胃給藥后松脂醇二葡萄糖苷在0-60h有27.45±2.51%以原形形式經(jīng)尿液排出體外，有1.08±0.29%，2.4±0.39%和4.20±0.49%的松脂醇、腸二酯和腸二醇這三種代謝物形式經(jīng)尿液排出體外。
　　四、松脂醇二葡萄糖苷在大鼠體內(nèi)代謝產(chǎn)物的研究
　　本論文采用TripleTOF高分辨率質(zhì)譜儀檢