β2受體介導(dǎo)巨噬細(xì)胞的分化對動脈粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性的影響及意義的研究.pdf

1、目的：
　　探討經(jīng)β2受體介導(dǎo)，影響脂多糖及干擾素γ（LPS+IFN-γ）或白介素4（IL-4）誘導(dǎo)THP-1源巨噬細(xì)胞向M1型或M2型的分化及意義。
　　方法：
　　以LPS+IFN-γ刺激THP-1源巨噬細(xì)胞向M1型極化，以IL-4刺激THP-1源巨噬細(xì)胞向M2型極化；其間分別以不同濃度的β2受體激動劑和對β2受體具不同選擇性多種β受體阻滯劑干預(yù)，采用經(jīng)典方法分別進(jìn)行M1、M2型細(xì)胞鑒定：用酶聯(lián)免疫法（ELISA）

2、檢測不同誘導(dǎo)狀態(tài)下THP-1源巨噬細(xì)胞的TNF-α和IL-10的分泌量。熒光定量PCR檢測與巨噬細(xì)胞相關(guān)的精氨酸酶-1（Arg-1）、一氧化氮合酶（iNOS）的mRNA的表達(dá)水平，流式細(xì)胞技術(shù)檢測細(xì)胞表面分子CD80、CD206的表達(dá)水平。同時以流式細(xì)胞技術(shù)檢測以不同濃度的β2受體激動劑與對β2受體具不同選擇性多種β受體阻滯劑干預(yù)并吞噬了OX-LDL24小時后，各組凋亡細(xì)胞數(shù)和存活細(xì)胞數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.β2受體激動劑

3、沙丁胺醇抑制TNF-α的分泌，抑制iNOS mRNA和CD80的表達(dá)，同時促進(jìn)IL-10的分泌，增加Arg-1 mRNA和CD206的表達(dá)；選擇性β1受體阻滯劑美托洛爾，非選擇性β受體阻滯劑普萘洛爾，高選擇性β2受體阻滯劑ICI118551則均可促進(jìn)TNF-α的分泌，促進(jìn)iNOS mRNA和CD80的表達(dá)，同時抑制IL-10的分泌，減少Arg-1 mRNA和CD206的表達(dá)。
　　2.β2受體激動劑沙丁胺醇隨濃度增高，凋亡率和壞死

4、率增加，細(xì)胞存活率降低。與OX-LDL組相比，沙丁胺醇低、中濃度組細(xì)胞存活率比OX-LDL組高，但差異無顯著性，高濃度組細(xì)胞存活率比OX-LDL組低，差異有顯著性。對β2受體具不同選擇性的β受體阻滯劑美托洛爾組、普萘洛爾組和ICI118551組則是隨濃度增高，細(xì)胞凋亡率和壞死率呈降低趨勢，細(xì)胞存活率呈增加趨勢，組間有顯著性差異，與OX-LDL組相比，低、中濃度組細(xì)胞存活率有顯著性差異，但高濃度組細(xì)胞存活率則無顯著性差異。
　　結(jié)論

5、：
　　1.β2受體激動劑沙丁胺醇能夠抑制LPS+IFN-γ誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞向M1型分化，促進(jìn)IL-4誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞向M2型分化。美托洛爾組、普萘洛爾組和ICI118551組能夠促進(jìn)LPS+IFN-γ誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞的向M1型分化，抑制IL-4誘導(dǎo)THP-1細(xì)胞向M2型分化。
　　2.β2受體激動劑沙丁胺醇隨著濃度增加，促進(jìn)細(xì)胞凋亡和壞死，降低細(xì)胞存活率。對β2受體具不同選擇性的β受體阻滯劑美托洛爾、普萘洛爾和ICI