OPN和TIP30在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)及其上調(diào)對cal-27細(xì)胞的影響.pdf

1、研究目的:
　　觀察口腔鱗狀細(xì)胞癌中OPN和TIP30的表達(dá)情況，研究上調(diào)OPN或TIP30后對舌鱗癌細(xì)胞cal-27細(xì)胞株生物行為的影響。
　　研究方法:
　　通過蛋白印跡(western blot)法檢測口腔鱗狀細(xì)胞癌組織(n=14)，癌旁組織(n=14)和正?？谇火つ?n=8)中OPN和TIP30的蛋白表達(dá)情況。分別通過感染或轉(zhuǎn)染技術(shù)上調(diào)cal-27細(xì)胞株的OPN和TIP30。分別運用實時熒光定量PCR(RT-P

2、CR)法和蛋白印跡法檢測感染或轉(zhuǎn)染細(xì)胞株中OPN和TIP30的表達(dá)情況。通過CCK-8實驗檢測上調(diào)后cal-27細(xì)胞株的增殖能力，通過細(xì)胞劃痕實驗檢測上調(diào)后cal-27細(xì)胞株的遷移能力。采用SPSS20.0軟件分析上述結(jié)果。
　　研究結(jié)果:
　　1、OPN在口腔鱗癌，癌旁組織和口腔正常組織中的蛋白表達(dá)情況的比較
　　采用單因素方差分析和多個樣品均數(shù)的多重比較法分析。OPN蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)高于癌旁組織和正?？?/p>

3、腔黏膜組織(P＜0.001)。尚不能認(rèn)為癌旁組織和正常口腔黏膜組織中OPN蛋白表達(dá)有差異(P=0.592)。
　　2、TIP30在口腔鱗癌，癌旁組織和口腔正常組織中的蛋白表達(dá)情況的比較
　　采用單因素方差分析和多個樣品均數(shù)的多重比較法分析。TIP30蛋白在口腔鱗狀細(xì)胞癌中的表達(dá)低于癌旁組織和正?？谇火つそM織(P＜0.001)。尚不能認(rèn)為癌旁組織和正?？谇火つそM織中TIP30蛋白表達(dá)有差異(P=0.540)。
　　3、上

4、調(diào)cal-27細(xì)胞株的OPN mRNA和蛋白表達(dá)檢測
　　采用配對T檢驗分析。感染shOPN病毒的cal-27細(xì)胞比對照組(shN)中OPN的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高(P＜0.001，P=0.002)。
　　4、上調(diào)cal-27細(xì)胞株的TIP30mRNA和蛋白表達(dá)檢測
　　采用配對T檢驗分析。轉(zhuǎn)染pTIP30質(zhì)粒的cal-27細(xì)胞比對照組(pc3.0)中TIP30的mRNA和蛋白表達(dá)水平均明顯升高(P=0.00

5、1，P=0.003)。
　　5、OPN上調(diào)后cal-27細(xì)胞株的增殖能力檢測
　　采用多重重復(fù)測量資料的方差分析。cal-27-shOPN細(xì)胞的增殖能力強于cal-27-shN細(xì)胞(P＜0.001)。
　　6、TIP30上調(diào)后cal-27細(xì)胞株的增殖能力檢測
　　采用多重重復(fù)測量資料的方差分析。cal-27-pTIP30細(xì)胞的增殖能力低于cal-27-pc3.0細(xì)胞(P＜0.001)。
　　7、OPN上調(diào)后

6、cal-27細(xì)胞株的遷移能力檢測
　　采用多重重復(fù)測量資料的方差分析。24h時，cal-27-shOPN細(xì)胞的遷移能力強于cal-27-shN細(xì)胞(P=0.002)。
　　8、TIP30上調(diào)后cal-27細(xì)胞株的遷移能力檢測
　　采用多重重復(fù)測量資料的方差分析。24h時，cal-27-pTIP30細(xì)胞的遷移能力低于cal-27-pc3.0細(xì)胞(P=0.005)。
　　研究結(jié)論:
　　口腔鱗狀細(xì)胞癌中，OPN