白復凝的制備及初步評價.pdf

1、白復凝是以渭北野生羊角蔓中抗白癜風有效部位為功效成分制備的一種復凝膠劑。渭北野生羊角蔓為蘿藦科蘿藦屬蘿藦的一個變種，渭北民間有人用其白汁治療白癜風，《廣濟方》有同種植物治療白癜風的記載。羊角蔓資源十分豐富，多年來一直是自生自滅，為了開發(fā)利用這一自然資源尋求治療頑疾白癜風新藥，本文對其進行了有效部位的篩選、成分檢定、制備工藝、劑型制備及初步評價四方面的研究。
　　本研究首先采用化學方法對羊角蔓所含化學成分進行系統(tǒng)預測，依據檢測結果，

2、用植物化學的研究方法得出單體成分并進行結構檢定；其次綜合研究結果，按極性分為4大類，用4種極性不同的溶劑進行分類提取，提取物采用活性導向分離法，篩選出有效部位；再次采用4因子3水平響應面法對有效部位的浸出工藝進行優(yōu)化研究；最后采用試驗對比、綜合評價的方法進行制劑工藝研究，并用生物活性法進行藥效學初步評價。主要結果如下：
　　（1）羊角蔓治療白癜風有效部位篩選
　　通過系統(tǒng)預測，定性鑒別得出羊角蔓中含有皂苷、三萜類、甾體類、甾

3、醇、黃酮類、生物堿和有機酸等14類化學成分。通過驗證建立的酪氨酸酶活性測定法對石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提20％、40%、60%、80%、95%醇沉物8類不同極性組合物進行生化測定，得出在試驗范圍內，羊角蔓正丁醇提取物對酪氨酸酶激活效果最為顯著，其激活率為30.71%，陽性對照補骨脂素激活率為39.34%。
　　（2）羊角蔓有效部位的植化研究
　　正丁醇提取物，經理化檢測，富含皂苷，薄層色譜檢測含2個皂苷

4、斑點；經柱色譜分離、結晶純化等處理，得到4個化合物單體，經理化、色譜、光譜等方法檢定，得出化合物1為胡蘿卜苷，化合物2為β-谷甾醇，化合物3為刺槐苷（山奈酚-3-O-葡萄糖基-鼠李糖基-7-O-鼠李糖苷），化合物4為肌醇。
　?。?）羊角蔓有效部位的浸出研究
　　經顯微觀察得出羊角蔓藤莖組織結構主要為表皮薄壁細胞、皮層薄壁細胞、次生韌皮部薄壁細胞、次生木質部薄壁細胞及髓細胞；葉片組織結構主要為表皮薄壁細胞和葉肉細胞。組織化學

5、定位得出羊角蔓藤莖中皂苷主要分布在其皮層薄壁細胞、次生韌皮部薄壁細胞和髓細胞中；葉片中皂苷主要分布在葉肉細胞中。
　　浸出工藝研究，在單因素研究的基礎上，以總皂苷的標示量為效應指標，通過響應面中心設計試驗進行工藝優(yōu)化，得出在試驗范圍內的最佳提取工藝條件為：乙醇濃度76%，液料比10.32:1(mL/g)，回流溫度70.2℃，回流時間2.52h；5次試驗，固形物收率為4.32%，產物中總皂苷的標示量為60.39%。經驗證，該工藝的相

6、對標準偏差RSD為1.50%。
　?。?）制劑研究及藥效初步評價
　　以正丁醇提取物的理化性質為依據，以臨床適用性為判定標準，經文獻調研和6種外用劑型對比分析得出w/o/w復乳凝膠劑對本產品較為適合。
　　制劑處方和成型工藝參數(shù)經L9(34)正交試驗優(yōu)化得出，以1.0g藥物，加1.2g單硬脂酸甘油酯，0.5g白凡士林，2.7g液體石蠟，0.25g硬脂酸，0.2g司盤-80，0.1g吐溫-80，0.1g CMC-Na，0

7、.1g PVA124及少量助劑和適量蒸餾水，80℃乳化，制成的產品呈米黃色，穩(wěn)定性良好，功效成分以刺槐苷計，其標示量不低于8.0%，釋藥性為0～8h內，藥物累積釋放率達75.6%，體外釋藥方式中一級模型的相關系數(shù)較高。
　　藥效初步評價試驗結果表明，該產品對皮膚無刺激；對酪氨酸酶的激活率為30.62%，陽性對照復方補骨脂酊激活率為57.34%。
　　由此得出結論：渭北野生羊角蔓治療白癜風有效部位為苷類物質，以總皂苷為指標，標