長白山自然保護區(qū)土壤真菌彎頸霉屬真菌遺傳多樣性及分布規(guī)律研究.pdf

1、長白山自然保護區(qū)是亞歐大陸保存較完整的生態(tài)系統(tǒng)，是研究物種多樣性的理想之地。2013年和2014年6、7、8和9月赴長白山自然保護區(qū)北坡，依據(jù)不同森林類型和土壤類型采用“之”字形多點采樣法，在海拔800-2650m區(qū)域內采集土壤樣品324份。以稀釋平板法和形態(tài)學鑒定法，共分離得到133株彎頸霉。
　　通過對彎頸霉屬(Tolypocladium)真菌在長白山的生態(tài)分布分析，發(fā)現(xiàn)其種類與數(shù)量的分布特點:從海拔1500-1800m逐漸增

2、加，從1800-2000m逐漸減少，從2000-2600m逐漸增加，在2600m以上沒有分離到;從6月至8月份離到的彎頸霉的數(shù)量逐漸下降，9月又有所回升，但是較7月份少。
　　對133株彎頸霉進行了分子生物學鑒定及18S rDNA-ITS和延長因子(elongationfactor1-α)的核酸序列對比分析。結果表明，利用18S rDNA-ITS序列所建的系統(tǒng)發(fā)育樹與Blast結果并不一致;與18S rDNA-ITS序列分析相比，

3、依據(jù)延長因子核酸序列所建的系統(tǒng)發(fā)育樹，其鑒定結果更準確。
　　利用ISSR分子標記技術，對133株彎頸霉屬真菌進行了遺傳多樣性分析。從40個通用引物中篩選出了10個穩(wěn)定性及多態(tài)性好的引物，鑒定結果表明，ISSR表現(xiàn)出很高的遺傳多態(tài)性，多態(tài)性條帶達到79％，且擴增結果有很好的重復性;無論是海拔還是月份各居群間群體遺傳變異較小，這可能是由于彎頸霉生態(tài)適應強，即海拔和采集時間（月份）對彎頸霉的遺傳變異并沒有明顯的影響。
　　通過對

4、三種彎頸霉（雪白彎頸霉、柱孢彎頸霉、地生彎頸霉）的生長培養(yǎng)基、pH、光照、氮源和碳源等生物學特性的研究發(fā)現(xiàn)，在同一環(huán)境下，最適光照條件為光暗交替(12h)，最適合培養(yǎng)基為PDA，孢子萌發(fā)的最適碳源為葡萄糖，最適氮源為硫酸銨;三者不同的是:三種彎頸霉中，雪白彎頸霉(Tolypocladium niveum)的長勢始終最好，產孢量也總體偏高。雪白彎頸霉的最適培養(yǎng)基為PDA，最適溫度為25℃，對酸度不敏感，當pH為7時，產孢量最大。其菌落生長