mtt實驗操作步驟

1、MTT的操作方法的操作方法一、一、MTT是什么是什么MTT是一種粉末狀化學(xué)試劑，全稱為3(45)dimethylthiahiazo(zy1)35diphenytetrazoliumroe，漢語化學(xué)名為3(4，5二甲基噻唑2)2，5二苯基四氮唑溴鹽，商品名：噻唑藍。是一種黃顏色的染料。二、二、MTT法用來做什么法用來做什么簡單地說：是一種檢測細胞存活和生長的方法。MTT主要有兩個用途1藥物（也包括其他處理方式如放射線照射）對體外培養(yǎng)的細胞

2、毒性的測定；2細胞增殖及細胞活性測定。三、為何三、為何MTT可以用來做上述工作可以用來做上述工作檢測原理為活細胞活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Fmazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶標儀在490nm波長處測定其光吸收值，在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值（OD值），來判斷活細胞數(shù)量，OD值越

3、大，細胞活性越強（如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越?。?。四、實驗所需材料四、實驗所需材料1MTT溶液的配制溶液的配制通常MTT配成的終濃度為5mgml須用PBS或生理鹽水做溶劑。市面上一般MTT的包裝為100mg250mg或1g1.1對于100mg這樣的小包裝，廠家都是將MTT放入小管中的，個人建議不要再用天平稱量分裝，而應(yīng)該一次性將其全配制成溶液，如100mg用20mlPBS來溶解。具休做法，24（10）：455457），該溶解液不

4、需去除原培養(yǎng)基，但溶解較慢。（個人覺得其溶解的能力不如DMSO強）該溶解液因含有SDS，在低溫保存的時候易產(chǎn)生結(jié)晶，因此在用之前必須提前幾小時拿至室溫，將SDS結(jié)晶全部溶解后再使用。五、MTT法實驗步驟法實驗步驟1:胰酶消化對數(shù)期細胞，終止后離心收集，制成細胞懸液，細胞計數(shù)調(diào)整其濃度至510104ml。細胞詳細計數(shù)方法請參照易生物實驗技術(shù)中的相關(guān)文章。對于初學(xué)者而言，要使細胞達到510104ml往往不知從何處著手，我在這里向大家提供一個