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1、實(shí)驗(yàn)室常用染料性能介紹及常用藥品試劑和培養(yǎng)基的配制(一)2007053016:13生物標(biāo)本常用染料性能簡(jiǎn)介生物標(biāo)本常用染料性能簡(jiǎn)介(一)天然染料(一)天然染料1、蘇木精蘇木精是從南美的蘇木(熱帶豆科植物)干枝中用乙醚浸制出來(lái)的一種色素,是最常用的染料之一。蘇木精不能直接染色,必須暴露在通氣的地方,使他變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)后才能使用,這叫做“成熟”。蘇木精的“成熟”過(guò)程需時(shí)較長(zhǎng),配置后時(shí)間愈久,染色力愈強(qiáng)。被染材料必須經(jīng)金屬鹽作媒
2、劑作用后才有著色力。所以在配制蘇木精染劑時(shí)都要用媒染劑。常用的媒染劑有硫酸鋁按、鉀明礬和鐵明礬等。蘇木精是淡黃色到銹紫色的結(jié)晶體,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染細(xì)胞核的優(yōu)良材料,他能把細(xì)胞中不同的結(jié)構(gòu)分化出各種不同的顏色。分化時(shí)組織所染的顏色因處理的情況而異,用酸性溶液(如鹽酸—酒精)分化后呈紅色,水洗后仍恢復(fù)青藍(lán)色,用堿性溶液(如氨水)分化后呈藍(lán)色,水洗后呈藍(lán)黑色。2、洋紅洋紅又叫胭脂紅或卡紅。一種熱帶產(chǎn)的雌性胭脂蟲干燥后,磨成粉末
3、,提取出蟲紅,再用明礬處理,除去其中雜質(zhì),就制成洋紅。單純的洋紅不能染色,要經(jīng)酸性或堿性溶液溶解后才能染色。常用的酸性溶液有冰醋酸或苦味酸,堿性溶液有氨水、硼砂等。洋紅是細(xì)胞核的優(yōu)良染料,染色的標(biāo)本不易褪色。用作切片或組織塊染都適宜,尤其適宜于小型材料的整體染色。用洋紅配成的溶液染色后能保持幾年。洋紅溶液出現(xiàn)渾濁時(shí)要過(guò)濾后再用。(二)人工染料(二)人工染料人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,種類很多,應(yīng)用極廣。它的缺點(diǎn)是經(jīng)日光照射容易褪色
4、,苯胺藍(lán)、亮綠、甲基綠等更易褪色。在制片中注意掌握酸堿度,并避免日光直射,也能經(jīng)幾年不褪色。1、酸性品紅酸性品紅是酸性染料,呈紅色粉末狀,能容于水,略溶于酒精(0.3%)。他是良好的細(xì)胞制染色劑,在動(dòng)物制片上應(yīng)用很廣,在植物制片上用來(lái)染皮層、髓部等薄壁細(xì)胞和纖維素壁。他跟甲基綠同染,能顯示線粒體。組織切片在染色前先浸在帶酸性的水中,可增強(qiáng)它的染色力。酸性品紅容易跟堿起作用,所以染色過(guò)度,易在自來(lái)水中褪色。2、剛果紅剛果紅是酸性染料,呈棗
5、紅色粉末狀,能溶于水喝酒精,遇酸呈藍(lán)色。他能作染料,也用作指示劑。他在植物制片中常作為蘇木精或其他細(xì)胞染料的襯墊劑。他用來(lái)染細(xì)胞質(zhì)時(shí),能把膠制或纖維素染成紅色。在動(dòng)物組織制片中用來(lái)染神經(jīng)軸、彈性纖維、胚胎材料等。剛果紅可以跟蘇木靜作二重染色,也可用作類淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗滌和脫水處理要迅速。3、甲基藍(lán)甲基藍(lán)是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基藍(lán)在動(dòng)植物的制片技術(shù)方面應(yīng)用極廣。他跟伊紅合用能染神經(jīng)細(xì)胞,也是細(xì)菌制片中不可缺
6、少的染料。它的水溶液是原生動(dòng)物的活體染色劑。甲基藍(lán)極易氧化,因此用他染色后不能長(zhǎng)久保存。4、固綠固綠是酸性染料,能溶于水(溶解度為4%)和酒精(溶解度為9%)。固綠是一種染含有漿質(zhì)的纖維素細(xì)胞組織的染色劑,在染細(xì)胞和植物組織上應(yīng)用極廣。他和蘇木精、番紅并列為植物組織學(xué)上三中最常用的染料。5、蘇丹Ⅲ蘇丹Ⅲ是弱酸性染料,呈紅色粉末狀,易溶于脂肪和酒精(溶解度(1)把34.5克硫酸銅溶于500毫升蒸餾水中。(2)把125克氫氧化鉀(鈉)和17
7、3克酒石酸鉀鈉溶解在500毫升蒸餾水中。上述兩種溶液應(yīng)分別保存。在檢測(cè)葡萄糖時(shí),使他們等量的混合,加入待測(cè)物的試管內(nèi),加熱到沸騰。如果有葡萄糖,會(huì)形成紅色的氧化亞銅沉淀物。2、檢查淀粉的試劑魯哥氏(Lugol’s)溶液(碘液)取6克碘化鉀溶于20毫升蒸餾水中,攪拌到溶解后,加入4克碘,等碘充分溶解,在加入80毫升蒸餾水,貯存在棕色試劑瓶?jī)?nèi)。碘液用來(lái)測(cè)試食物樣品或葉片中的淀粉,也用作染色劑,例如可染色鞭毛、纖毛和細(xì)胞核等。3、檢查蛋白質(zhì)的
8、試劑配方一米倫(Millon)試劑在60毫升濃硝酸(比重1.42)中溶解40克汞(水浴加溫可助溶),溶解后加入兩倍體積的蒸餾水稀釋,靜置澄清后,取它上層的清液備用。這種試劑可長(zhǎng)期保存。在待測(cè)物中加入少量米倫試劑,加熱,如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紅色。這種試劑不能用來(lái)測(cè)定尿中的蛋白質(zhì)。配方二雙縮尿試劑分別配制10%氫氧化鈉溶液和1%硫酸銅溶液。在3毫升待測(cè)物中加入1毫升10%氫氧化鈉溶液和1滴1%硫酸銅溶液。如果有蛋白質(zhì),會(huì)出現(xiàn)紫色反應(yīng)。4、檢
9、查脂肪的試劑蘇丹Ⅲ(Ⅳ)酒精飽和溶液取0.2克蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ),放入純酒精中,加熱,使它充分溶解,成為飽和酒精溶液,過(guò)濾后密閉在試劑瓶?jī)?nèi)保存?zhèn)溆谩?、酸堿指示劑配方一酚酞試劑和試紙酚酞試劑取1克酚酞,溶解在100毫升60%的酒精溶液里,裝在試劑瓶?jī)?nèi)密閉保存。酚態(tài)試紙取1克酚酞,溶解在100毫升95%酒精溶液里,加入00毫升蒸餾水。把綠紙條放入酚酞溶液中浸濕后,取出,放在無(wú)氨氣影響處晾干。酚泰試劑(試紙)pH值變色范圍8.2~10,在酸
10、性和中性溶液中都無(wú)色,再堿性溶液中呈深紅色。配方二紅藍(lán)石蕊試紙取市售石蕊1克,放在80毫升10%酒精溶液中攪拌,使它溶解,然后過(guò)濾。把濾液分成兩份。1份滴入稀磷酸或稀硫酸,到出現(xiàn)紅色為止。另1份滴入稀氫氧化鈉溶液,到出現(xiàn)藍(lán)色為止。在上述制備的溶液中分別浸濕濾紙條,隨后取出濾紙條,放在蔽光處、無(wú)酸堿性氣體影響的地方晾干,即的紅、藍(lán)兩種石蕊試紙。紅石蕊試紙?jiān)趬A性溶液中變藍(lán),藍(lán)石蕊試紙?jiān)谒嵝匀芤褐凶兗t。6、檢查二氧化碳的試劑檢查二氧化碳的試劑
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