生物治療學(xué)抗體治療

1、抗體治療發(fā)展介紹,,,,抗體,ADCC,靶向結(jié)合,特異性結(jié)合,CDC,鼠源抗體,CONTENTS,,,,,,鼠源抗體人源化,藥物嵌合抗體,免疫檢查點(diǎn),CAR-T,,目錄,,PPT模板下載：www.1ppt.com/moban/ 行業(yè)PPT模板：www.1ppt.com/hangye/ 節(jié)日PPT模板：www.1ppt.com/jieri/ PPT素材下載：www.1ppt.com/sucai/PPT背景圖

2、片：www.1ppt.com/beijing/ PPT圖表下載：www.1ppt.com/tubiao/ 優(yōu)秀PPT下載：www.1ppt.com/xiazai/ PPT教程： www.1ppt.com/powerpoint/ Word教程： www.1ppt.com/word/ Excel教程：www.1ppt.com/excel/ 資料下載：www.1pp

3、t.com/ziliao/ PPT課件下載：www.1ppt.com/kejian/ 范文下載：www.1ppt.com/fanwen/ 試卷下載：www.1ppt.com/shiti/ 教案下載：www.1ppt.com/jiaoan/ PPT論壇：www.1ppt.cn,,鼠源抗體,,雜交瘤技術(shù),抗淋巴瘤單抗,莫羅單抗-CD３,單抗17-1A,,,抗體治療早期

4、抗體血清：追溯至19世紀(jì)末，已有用動(dòng)物來(lái)源的抗血清用于白喉等傳染病的早期治療。1975：雜交瘤技術(shù)問世，重新開啟抗體治療的時(shí)代。大量生產(chǎn)單克隆抗體。1982：第一次利用單抗治療腫瘤，制備出一個(gè)獨(dú)特的抗淋巴瘤單抗，使患者瘤體消失，使人們開始熱衷于腫瘤的抗體治療研發(fā)。隨后：1986年，美國(guó)FDA批準(zhǔn)抗CD3單抗-莫羅單抗-CD3，OKT3進(jìn)入市場(chǎng)，用于器官移植時(shí)的抗排異反應(yīng)。1995年，歐洲批準(zhǔn)單抗17-1A上市， 這是一個(gè)

5、針對(duì)17-1A抗原的鼠源 IgG2a單抗，主要治療結(jié)直腸癌，但療效不明顯。,鼠源抗體,鼠源抗體作為異源蛋白進(jìn)入人體，會(huì)誘發(fā)HAMA反應(yīng)。激發(fā)人體產(chǎn)生HAMA，清除鼠源抗體，導(dǎo)致其在人體內(nèi)半衰期短。大部分的鼠源抗體的Fc段不能激活人體的效應(yīng)系統(tǒng)，即ADCC和CDC。嚴(yán)重的HAMA反應(yīng)甚至可能導(dǎo)致過敏性休克。導(dǎo)致很長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)沒有新的單抗藥物上市。,,,,鼠源抗體,,單抗人源化,,嵌合抗體,CDR移植抗體,表面氨基酸殘基人源

6、化,人源抗體,,單抗人源化,,,1997年第一個(gè)抗CD20的嵌合抗體——利妥昔單抗（美羅華），用于治療非霍奇金淋巴瘤,1998年第一個(gè)人源化抗Her2單抗——曲妥珠單抗（赫賽?。?，用于治療乳腺癌,2000年8月成立的百泰生物是我國(guó)唯一一家實(shí)現(xiàn)人源化單克隆抗體產(chǎn)業(yè)化的企業(yè)，研發(fā)并成功產(chǎn)業(yè)化我國(guó)首個(gè)人源化單抗藥物泰欣生，用于抗腫瘤治療,人源化思路,隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，人們可以對(duì)抗體和抗體片段的編碼基因進(jìn)行操作，人們開始對(duì)單克隆抗體進(jìn)行

7、人源化改造。,人-鼠嵌合抗體,將異源單抗的輕、重鏈可變區(qū)基因插入含有人抗體恒定區(qū)的表達(dá)載體中，轉(zhuǎn)化哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)出嵌合抗體,單抗人源化,,CDR移植抗體,,,,,,改進(jìn)方法,存在問題,可變區(qū)中主要起作用的為3個(gè)CDR，6個(gè)CDR形成的平面結(jié)構(gòu)為抗原抗體特異性結(jié)合的關(guān)鍵部位。,由于骨架區(qū)的相對(duì)保守性，將鼠單抗的CDR區(qū)移植到人單抗（去CDR）的骨架上，可以最大限度的消除異源性。,骨架區(qū)的氨基酸可能與CDR區(qū)形成某些構(gòu)象，因而對(duì)抗體親和力

8、有影響。,單抗人源化,,,,,,,選擇適當(dāng)?shù)墓羌?在抗體數(shù)據(jù)庫(kù)中選擇與要改造的鼠單抗同源性最高的序列。,人工構(gòu)建合適的骨架,確定氨基酸殘基,骨架表達(dá),利用分子生物學(xué)的方法人工構(gòu)建一個(gè)符合氨基酸殘基要求的可變區(qū)骨架。,利用計(jì)算機(jī)軟件分析抗體可變區(qū)的三維構(gòu)象，分析其中起關(guān)鍵作用的氨基酸殘基。,如果已有相應(yīng)的cDNA，則可用基因編輯技術(shù)直接組成新的抗體基因進(jìn)行表達(dá)，如果沒有，則人工合成完整的可變區(qū)基因,單抗人源化,表面重塑抗體,表面重塑抗體是

9、指對(duì)異源抗體表面氨基酸殘基進(jìn)行人源化改造。該方法的原則是僅替換與人抗體SAR差別明顯的區(qū)域，在維持抗體活性并兼顧減少異源性基礎(chǔ)上選用與人抗體表面殘基相似的氨基酸替換；另外，所替換的區(qū)段不應(yīng)過多，對(duì)于影響側(cè)鏈大小、電荷、疏水性，或可能形成氫鍵從而影響到抗體互補(bǔ)決定區(qū)（CDR）構(gòu)象的殘基盡量不替換。,單抗人源化,,人源抗體,基于抗體庫(kù)技術(shù)的開發(fā),人源抗體,不是人源化抗體,無(wú)免疫原性,利用抗原即可直接從非免疫動(dòng)物抗體庫(kù)中篩選出特異性抗體，并

10、能篩選到針對(duì)該物種自身抗原的抗體,,,,,,,,,克隆出人抗體全套可變區(qū)基因,與有關(guān)載體連接,導(dǎo)入受體菌系統(tǒng),受體菌蛋白合成分泌,抗體表達(dá)在細(xì)菌、噬菌體等表面,篩選與擴(kuò)增，得到特定的人源抗體,2006年第一個(gè)抗表皮生長(zhǎng)因子的人源抗體—帕尼莫單抗被批準(zhǔn)治療結(jié)直腸癌,單抗人源化,,ADC抗體藥物偶聯(lián)物,,ADC,,,,,,,何為ADC？將抗體與細(xì)胞毒性藥物連接起來(lái)，通過抗體的靶向作用將細(xì)胞毒藥物靶向腫瘤，進(jìn)而降低化療中常見的藥物非特異性

11、的全身毒性。,首例ADC藥物2000年被FDA批準(zhǔn)用于治療急性粒細(xì)胞白血病的Mylotarg，但由于偶聯(lián)技術(shù)、靶向性、有效性等受限，完整的抗體偶聯(lián)藥物在血液不穩(wěn)定，導(dǎo)致致死性毒性的產(chǎn)生，于2010年撤市,再次熱門2011年被FDA批準(zhǔn)用于治療霍奇金淋巴瘤和系統(tǒng)性間變性大細(xì)胞淋巴瘤的SGN-35，2013年被FDA批準(zhǔn)用于HER2陽(yáng)性乳腺癌的T-DM1的研制成功,,ADC,,,,抗體,連接,藥物,放射免疫偶聯(lián)物

12、 免疫毒素 化學(xué)免疫偶聯(lián)物 抗體導(dǎo)向酶-前藥治療,,,,ADC,,,,,,,,,1,2,3,4,理想的靶點(diǎn)抗原，應(yīng)在在腫瘤細(xì)胞表面過量表達(dá)，但是在正常組織中無(wú)表達(dá)或者極少表達(dá)。其次當(dāng)ADC藥物中抗體和靶點(diǎn)結(jié)合后，可以有效內(nèi)化，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)釋放藥物，對(duì)靶細(xì)胞進(jìn)行殺傷。,選擇靶點(diǎn),抗體,偶聯(lián)子,藥物選擇,抗體和靶抗原的高親和力是ADC有效起到靶向殺傷的核心所在，一般認(rèn)為親

13、和力指數(shù)KD< 10 nM是對(duì)抗體的基本要求。在這基礎(chǔ)上，再篩選免疫原性低，半衰期長(zhǎng)，在血液中穩(wěn)定的抗體。,理想的偶聯(lián)子既可以在血液中維持穩(wěn)定，又可以在靶細(xì)胞有效釋放藥物?，F(xiàn)在常用的偶聯(lián)子可以分為兩大類： cleavable linkers 和non-cleavable linkers。根據(jù)靶點(diǎn)的不同選擇相應(yīng)的偶聯(lián)子,由于抗體進(jìn)入體內(nèi)后，能有效進(jìn)入腫瘤部位的約占總量的0.003–0.08%，因此就需要藥物對(duì)靶細(xì)胞具有高效，高靈敏的

14、殺傷作用,,,免疫檢查點(diǎn)抗體,,免疫檢查點(diǎn),腫瘤免疫耐受,CTLA-4,PD-1,新的發(fā)展,,,免疫檢查點(diǎn)免疫檢查點(diǎn)是一類免疫抑制性的分子，可以調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的強(qiáng)度和廣度，從而避免正常組織的損傷和破壞，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中，免疫檢查點(diǎn)成為免疫耐受的主要原因之一正常的免疫耐受是人體重要的防御維護(hù)機(jī)制，例如保證免疫系統(tǒng)不識(shí)別自身抗原和細(xì)胞、防止自身免疫疾病發(fā)生、保護(hù)生殖細(xì)胞、胎兒不受母體攻擊等。病理性的免疫耐受是指病原體為了長(zhǎng)

15、期在體內(nèi)存活和逃避免疫的監(jiān)督，造成免疫系統(tǒng)對(duì)其不識(shí)別和不應(yīng)答。,,免疫檢查點(diǎn)抗體,免疫檢查點(diǎn)抗體,免疫檢查點(diǎn)抗體,,,,盡管免疫檢查點(diǎn)抗體療法現(xiàn)在很熱門，但在研究中還是發(fā)現(xiàn)存在耐藥性問題，而且過度使用該療法會(huì)導(dǎo)致T細(xì)胞釋放大量炎癥因子，引起炎癥反應(yīng)，甚至殺滅自身細(xì)胞，所以要嚴(yán)格控制使用時(shí)間。,日前，我國(guó)中科院傅陽(yáng)心教授發(fā)現(xiàn)，I型干擾素是自發(fā)性腫瘤排斥反應(yīng)和腫瘤治療誘發(fā)的抗腫瘤T細(xì)胞反應(yīng)的關(guān)鍵，干擾素對(duì)激發(fā)腫瘤特異性T細(xì)胞應(yīng)答至關(guān)重要,傅

16、陽(yáng)心團(tuán)隊(duì)在研究中創(chuàng)建了加載I型干擾素的融合性腫瘤抗體（Ab-IFNβ）。免疫治療中Ab-IFNβ直接靶向腫瘤微環(huán)境內(nèi)的樹突狀細(xì)胞，通過增強(qiáng)抗原的交叉提呈來(lái)重新活化細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。此外，Ab-IFNβ治療能夠誘導(dǎo)PD-L1信號(hào)通路的阻斷，克服治療獲得性藥物耐受，徹底清除已建立的腫瘤組織。,免疫檢查點(diǎn)抗體,,CAR-T,,CAR-T,CAR-T細(xì)胞具有與腫瘤相關(guān)抗原特異結(jié)合的抗體（scFv）部分、跨膜區(qū)和胞漿內(nèi)淋巴細(xì)胞信號(hào)部分。因此，該

17、細(xì)胞具有腫瘤抗原識(shí)別特異性強(qiáng)、親和力高、非MHC限制性及可在體內(nèi)外大量擴(kuò)增等優(yōu)點(diǎn)。 理想的目標(biāo)抗原僅在抗體腫瘤細(xì)胞表面表達(dá)的腫瘤特異性抗。不幸的是腫瘤表達(dá)的大多數(shù)抗原不具備腫瘤特異，因此大多數(shù)的CAR都以腫瘤相關(guān)性抗原作為靶點(diǎn)，但這往往會(huì)導(dǎo)致“脫靶”的可能性。同時(shí)對(duì)于相關(guān)的抗原選擇也需要注意避免選擇分泌型抗原，以避免CAR-T脫靶的可能。,CAR-T,CAR-T技術(shù)面臨兩個(gè)挑戰(zhàn)： 一是靶點(diǎn)的特異性選擇，就是那

18、雙引導(dǎo)T細(xì)胞殺傷腫瘤細(xì)胞的眼睛。這雙眼睛一定要特異，否則就會(huì)攻擊正常的細(xì)胞，引起不可預(yù)知的副作用； 一是CAR-T對(duì)實(shí)體瘤的作用。CAR-T治療白血病的效果很好，白血病是在血液中的，不存在腫瘤微環(huán)境對(duì)免疫細(xì)胞的抑制問題。但是，實(shí)體瘤就不一樣了，它有自己特定的微環(huán)境，這個(gè)環(huán)境是會(huì)抑制對(duì)他進(jìn)行殺傷的T細(xì)胞的，當(dāng)然也包括CAR-T細(xì)胞。解決辦法就是PD-1抗體和CAR-T一起使用，希望能解除微環(huán)境對(duì)CAR-T細(xì)胞的抑制。所以，P