嗜線蟲真菌Duddingtonia flagrans培養(yǎng)技術(shù)及其對綿羊胃腸道線蟲病的防治試驗.pdf

1、嗜線蟲真菌Duddingtoniaflagrans培養(yǎng)技術(shù)及其對家畜胃腸道線蟲病的防治試驗嗜線蟲真菌Duddingtoniaflagrans是迄今發(fā)現(xiàn)并研究證明最具有家畜胃腸道線蟲病生物防制潛力的真菌。通過對該真菌的培養(yǎng)，制備大量的厚垣孢子，用于家畜胃腸道寄生蟲病的生物防治已取得明顯效果。本試驗對引進的Duddingtoniaflagrans菌株進行了培養(yǎng)基篩選、厚垣孢子生產(chǎn)技術(shù)及菌種保存、制種、發(fā)酵和擴大培養(yǎng)等方面的研究，并用培養(yǎng)生產(chǎn)

2、出的該真菌制劑對綿羊胃腸道線蟲病進行了田間防治試驗。 1.根據(jù)價格便宜、來源方便、制備簡單、厚垣孢子生成多的原則，確定小麥為嗜線蟲真菌D.flagrans的固體培養(yǎng)基質(zhì)、5％馬鈴薯汁或玉米汁作為液體培養(yǎng)基的配方最佳。 2.嗜線蟲真菌D.flagrans厚垣孢子最適生長溫度為25-30℃、培養(yǎng)基最適pH范圍為5.5-7.0；作為需氧真菌，D.flagrans最合適的培養(yǎng)基質(zhì)裝量(W)為培養(yǎng)容器容積的0.22-0.24，即2

3、50毫升三角瓶裝小麥60克左右。 3.低溫冷凍可長期保存嗜線蟲真菌D.flagrans菌種。將該真菌CMA瓊脂培養(yǎng)物裝入含20％甘油PBS的Ependorf管中凍存于液氮中，至少可保存78個月。將菌種直接凍存于-25℃可保存48個月。該真菌WA、CMA、PA瓊脂培養(yǎng)平板用Parfilm膜封口后置4℃冰箱可保存12個月。 4.PA、CMA和WA瓊脂平板可作為該真菌一級種子的良好培養(yǎng)基。該真菌固體二級種子以250毫升三角瓶為

4、培養(yǎng)容器，配方為小麥60克、5％馬鈴薯汁或玉米汁48毫升，厚垣孢子數(shù)可達5×105以上。該真菌擴大培養(yǎng)采用PVC塑料袋為發(fā)酵培養(yǎng)容器，成本低，方便實用，可滿足大量生產(chǎn)，孢子數(shù)達5×105以上。 5.用上述方法生產(chǎn)出的厚垣孢子以5×105/kg體重的劑量作為飼料添加劑，對伊犁地區(qū)圍欄草場放牧的綿羊進行胃腸道線蟲防制的田間試驗。結(jié)果表明，該真菌可使放牧草場中三期幼蟲較對照組減少82.6％；糞便EPG較對照組減少87.3％。表明用該技