月季黑斑病菌薔薇盤二孢(Marssonina Rosae)形態(tài)多樣性、致病性多樣性和遺傳多樣性研究.pdf

1、2007-2008年，從中國北京、河南、陜西、山東、湖北、安徽、浙江、江西、重慶、福建、廣東等地采集薔薇屬植物黑斑病的發(fā)病葉片共計61個樣本，盡量覆蓋了中國地域的東部、中部和南部，寄主包括薔薇屬植物的月季、玫瑰、薔薇、黃刺玫。從中分離純化得到了22個薔薇盤二孢菌的分離物。 通過測定發(fā)現(xiàn)，61個樣本病原菌分生孢子的大小差異明顯。其中分生孢子的大小、菌落顏色和生長速率三者之間存在如下關(guān)系：長的分生孢子(L>18.0μm)一般形成(淡

2、)黃色的菌落，短的分生孢子(L<16.5μm)一般形成(灰)黑色菌落，中等大小的孢子(16.5μm

3、二孢菌的形態(tài)多樣性的原因。中國存在地理種群，其形態(tài)上存在分化，即薔薇盤二孢菌在中國的地理形態(tài)種群分布如下：華北地區(qū)、西北地區(qū)及華中北部為一類：華中南部為一類；華東北部為一類；華東南部為一類；華南地區(qū)、西南地區(qū)為一類。 通過田間調(diào)查月季黑斑病的發(fā)病情況，對月季黑斑病的病情指數(shù)進行顯著性方差分析，發(fā)現(xiàn)不同的月季品種抗病性差異顯著；致病性測定結(jié)果表明，薔薇盤二孢菌致病性存在多樣性，20個菌株被劃分為高致病、中致病和低致病三類。其中高致

4、病菌株包括來自北京的Mr2、Mr1、山東的Mr13、杭州的Mr47；中致病菌株包括來自山東的Mr10、Mr12、Mr14、Mr15、來自杭州的Mr45、Mr46、來自湖北的Mr49、來自福建的Mr55；低致病菌株包括來自山東的Mr9、Mr11、Mr16、來自北京的Mr3、來自陜西的Mr53、來自重慶的Mr54、來自湖北的Mr48、來自廣東的Mr56，對北京和山東地區(qū)為代表的北方菌株的致病與以福建、浙江、廣東地區(qū)為代表的南方菌株致病進行比

5、較，發(fā)現(xiàn)兩者之間差異不顯著。 通過對供試菌株進行菌絲融合鑒定發(fā)現(xiàn)，絕大部分菌株兩兩之間都能夠完全或者部分發(fā)生融合，但不同菌株的菌絲融合狀況差別較大，來自湖北的菌株Mr48幾乎能與所有的菌株完全融合，而來自山東泰安的菌株Mr11則幾乎與所有的菌株都不能夠融合；即使來自同一地方的菌株，菌絲融合結(jié)果差別也較大，同樣來自湖北的菌株Mr49則只能與Mr54、Mr55、Mr48等少數(shù)幾個菌株能夠完全融合。這說明薔薇盤二孢的菌絲融合與地理來源

6、關(guān)系不大，而與其寄主關(guān)系密切。 對4個供試菌株的ITS1區(qū)序列和已知登錄號的Marssonina屬的菌株進行BLAST分析可知，從北京‘金瑪麗82’、杭州華家池、茅家埠月季上獲得的ITS核苷酸的ITS1區(qū)序列與國外已經(jīng)提交的AY904059的ITS1區(qū)相似性達到了100％，親緣關(guān)系最近，從山東泰安的品種‘素玉’上獲得的ITS核苷酸的ITS1區(qū)序列與AY904059的相似性僅為97％，親緣關(guān)系較近。上述菌株均來源于Marssoni

7、na rosae，其中FJ493247、FJ493248、FJ493249的寄主為月季，F(xiàn)J493242的寄主為薔薇，兩者的ITS1區(qū)序列存在差異，其中有6個位點存在明顯差異，分別是3、15、33、43、87、148。從月季上獲取的分離物，這6個位點分別為A、C、C、A、C、G，從薔薇上獲取的分離物，這6個位點分別為G、T、G、G、T、A。經(jīng)過擴增比較發(fā)現(xiàn)Marssonina RosaeITS1區(qū)為高變區(qū)。從而證明薔薇盤二孢菌在遺傳上存