小桐子高分辨率細胞學(xué)圖的建立及基于45SrDNA和端粒-FISH的核型分析.pdf

1、小桐子是世界上重要的能源植物之一，油脂含量很高，含油率高達40％～60％，分子組成與石油十分相似且更加穩(wěn)定，便于深加工成不同用途的專用油，已成為國際上研究最多的可生產(chǎn)生物柴油的能源植物之一。但由于小桐子細胞質(zhì)濃，染色體小并且不易分散的特點，目前有關(guān)小桐子的細胞學(xué)研究很少見報道。但細胞學(xué)的研究可以解決在小桐子分子生物學(xué)研究中其它研究手段無法解決的問題，比如測序分析中的gap大小的估計，染色體的調(diào)控等。因而對小桐子進行細胞學(xué)研究，構(gòu)建高分辨

2、率的染色體圖和核型圖對進一步研究小桐子的染色體分子生物學(xué)奠定基礎(chǔ)。
　　 本文首先摸索出小桐子高分辨率細胞學(xué)圖的建立方法，在此基礎(chǔ)上以45SrDNA和端粒-DNA為探針，進行染色體熒光原位雜交(fluorescenceinsituhybridization，F(xiàn)ISH)，建立了小桐子清晰、準確的核型圖，并對45SrDNA在不同來源小桐子中的分布進行分析。主要結(jié)果如下:
　　 (1)在小桐子的染色體制片過程中，根尖的長短，預(yù)

3、處理的時間和酶解相關(guān)因素對實驗影響較大。小桐子根尖的長度在長度為1.5～2.0cm，0.002mol/L8-羥基喹啉預(yù)處理2h時，37℃酶解1.5h后得的染色體濃縮程度適宜，分散均勻，形態(tài)清晰，細胞分裂相較多，并且沒有細胞質(zhì)覆蓋。小桐子花粉母細胞直徑在2mm左右能獲得較多粗線期染色體濃縮的分裂相。
　　 (2)基于45SrDNA和端粒-FISH的核型分析，小桐子的核型公式為2n=2x=22=12m+10sm，平均臂比為1.784