運(yùn)用PCR-RFLP標(biāo)記檢測南瓜疫病菌.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、利用1對特異引物對南瓜疫病菌(Phytophthora capsici)及疫霉屬(Phytophthora)部分真菌和常見土傳真菌12個(gè)種的14個(gè)菌株的18srDNA(即Small Subunit Ribosomal DNA)進(jìn)行擴(kuò)增,然后利用4種限制內(nèi)切酶(EcoRⅠ HaeⅢ HhaⅠ HinfⅠ)酶切PCR擴(kuò)增產(chǎn)物,分析各菌株間的DNA限制性片段多態(tài)性.并運(yùn)用該P(yáng)CR-RFLP檢測程序?qū)θ静∧瞎现仓赀M(jìn)行檢測,其結(jié)果如下:1.運(yùn)用供

2、試引物在所有供試疫霉屬菌株上均可擴(kuò)增到一條長為1770bp的特異DNA片段.2.經(jīng)限制性內(nèi)切酶酶切和聚類分析,表明采自不同寄主上和同一寄主不同地點(diǎn)的3個(gè)P.capsici在遺傳上是一致的.3.在南瓜植株發(fā)病莖病健交界處,發(fā)病葉病健交界處,發(fā)病果病健交界處,發(fā)病葉片的未顯癥部位和接種P.capsici 12小時(shí)的莖上擴(kuò)增到了約為1770bp的特異DNA片段.4.經(jīng)限制性酶切分析,該特異DNA片段具有與P.capsici標(biāo)準(zhǔn)菌株完全相同的酶

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