新城疫病毒F基因與雞IL-2重組DNA疫苗的研究.pdf

1、東北農(nóng)業(yè)大學博士學位論文新城疫病毒F基因與雞IL2重組DNA疫苗的研究姓名：姜永厚申請學位級別：博士專業(yè)：基礎獸醫(yī)學指導教師：劉忠貴2000.5.1東北農(nóng)業(yè)大學中文摘要博士學位論文胞的增殖、分化，增強細胞免疫應答；另一方面作用B細胞，促進其活化分泌Ig，加速抗體生成，進而加強體液免疫。3新城疫病毒F基因與雞Ⅱ，2重組DNA疫苗的研究利用國內首次克隆得到的雞IL2與新城疫弱毒D26株的F基因，經(jīng)載體改建將二者以非融合表達形式共同克隆于真核

2、表達質粒pcDNA3上經(jīng)酶切分析、PCR鑒定證實成功構建了共表達雞IL2與新城疫F蛋白的重組質粒(pcDNAFIL2)。采用胸肌多點注射方法接種14日齡SPF雛雞免疫后每周采集試驗雞胸腺、法氏囊、血液，無菌分離T、B淋巴細胞和血清，以MTT法和ELISA分別檢測免疫雞T、B淋巴細胞增殖反應和抗體變化規(guī)律。結果顯示：與單獨接種F基因疫苗試驗組相比接種重組質粒試驗組雞只的體液免疫和細胞免疫均明顯增強；且免疫效果優(yōu)于兩種質粒的混合注射。免疫后

3、以新城疫標準強毒F。毛攻擊，接種重組質粒試驗雞有70％存活：混合接種F基因和IL2質粒試驗雞有5【J％存活；單獨接種F基因疫苗試驗雞只有30％存活。試驗結果表明共表達IL2可極大提高新城疫DNA疫苗的效力。新城疫F基因與雞IL。2重組質粒的成功構建在國內外尚來見報道，不僅首次證實了雞IL2在新城疫基因免疫中的免疫增強作用而且為雞IL2這一新型佐劑在禽類基因免疫中的應用提供了試驗依據(jù)。同時也為探討禽類重組基因疫苗的構建奠定了基礎。4新城疫

4、基因疫苗、雞幾2質粒免疫SPF雛雞免疫器官的組織學變化新城疫基因疫苗免疫后，試驗雞胸腺皮質增厚其中淋巴細胞數(shù)目增多。法氏囊淋巴濾泡明顯增大，淋巴細胞數(shù)目增多。脾臟白髓區(qū)增大淋巴小結數(shù)量增多，體積增大，其中淋巴細胞數(shù)量增多。以上主要免疫器官在免疫后的組織學變化再次證實了基因疫苗免疫可以誘導體液免疫和細胞免疫的結論。另外將IL2免疫雞與空白對照雞、F基因疫苗免疫雞進行了形態(tài)學和組織學的比較，接種IL2質粒試驗雞剖檢未見病理變化：整個免疫過程