11014.中國(guó)兩棲類病原壺菌檢測(cè)與有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析(pra)

1、學(xué)校代碼：10225學(xué)號(hào)：B14127學(xué)位論文中國(guó)兩棲類病原壺菌檢測(cè)與有害生物風(fēng)險(xiǎn)分析(PRA)指導(dǎo)教師姓名：申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：論文提交日期：授予學(xué)位單位：馬建章博士朱蘊(yùn)琦東北林業(yè)大學(xué)2014年3月東北林業(yè)大學(xué)學(xué)科專業(yè)：野生動(dòng)植物保護(hù)與利用論文答辯日期：2014年6月授予學(xué)位日期：答辯委員會(huì)主席：劉娣教授論文評(píng)閱人：素夕厶櫛素大學(xué)摘要摘要自1998年首次出現(xiàn)以來(lái)，壺菌病已經(jīng)成為全球兩棲類的重要傳染性疾病之一。兩棲類壺菌病已經(jīng)導(dǎo)致全球近200

2、種兩棲類區(qū)域性滅絕，50％的兩棲類種群數(shù)量降低，因此該病被視為目前人類正經(jīng)歷著的唯一一場(chǎng)動(dòng)物大滅絕的罪魁禍?zhǔn)?。并且，由于壺茵及其孢子可以隨水體、兩棲類個(gè)體、接觸過(guò)的物品等自然因素或隨貿(mào)易全球傳播，這種特性極大地增加了壺菌的擴(kuò)散風(fēng)險(xiǎn)以及其跨境監(jiān)管和防控的難度。因此，明確我國(guó)面臨的壺菌風(fēng)險(xiǎn)，對(duì)于有效保護(hù)我國(guó)兩棲類種群安全、生態(tài)健康和兩棲類貿(mào)易安全都具有重要意義。本研究分為兩個(gè)部分，第一部分主要分析了我國(guó)國(guó)內(nèi)壺菌感染風(fēng)險(xiǎn)，定位了我國(guó)壺菌風(fēng)險(xiǎn)水

3、平，為世界各國(guó)的生態(tài)健康做出貢獻(xiàn)。針對(duì)這一目標(biāo)，采用了流行病學(xué)調(diào)查的方法，結(jié)合國(guó)內(nèi)兩棲類種屬分布特點(diǎn)以及牛蛙引種歷史等，確定黑龍江、廣西、四川、云南、湖南、湖北、安徽、河南采樣地區(qū)8個(gè)，采集了中國(guó)林蛙、虎紋蛙、中華大蟾蜍、牛蛙、澤蛙5種兩棲類樣本386個(gè)，利用壺菌培養(yǎng)、鏡檢、病理組織學(xué)檢查和分子克隆方法進(jìn)行陽(yáng)性樣本檢測(cè)；此外，還建立了適用于大面積、快速檢測(cè)的壺菌等溫環(huán)介導(dǎo)擴(kuò)增(LAMP)檢測(cè)方法，并應(yīng)用于樣本進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)于疑似樣本采用熒

4、光實(shí)時(shí)PCR方法進(jìn)行復(fù)檢，確保檢測(cè)的特異性和靈敏性。經(jīng)檢測(cè)，在目標(biāo)地區(qū)樣本中未檢出壺菌。第二部分主要分析了全球兩棲類壺菌風(fēng)險(xiǎn)的分布，研究并確定了風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)。本研究是依據(jù)現(xiàn)行中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《進(jìn)出境動(dòng)物和動(dòng)物產(chǎn)品風(fēng)險(xiǎn)分析程序和技術(shù)要求》(SN／T2486—2010)和新西蘭(BIOSECU砌TYNEWZEALAND對(duì)SKANALYSISPROCEDURESVersion1，12April2006)開展：利用描述性研究方法

5、對(duì)目標(biāo)地區(qū)的自然情況、獸醫(yī)組織機(jī)構(gòu)、檢疫水平等多項(xiàng)內(nèi)容進(jìn)行了分析，從傳入釋放可能性、接觸發(fā)生可能性和傳入后果3個(gè)方面對(duì)潛在的檢疫性有害生物進(jìn)行評(píng)估，確定是否為檢疫性有害生物，并確定傳入的可能性和風(fēng)險(xiǎn)，結(jié)果以定性表達(dá)。具體而言，就是利用壺菌釋放評(píng)估表、壺菌接觸暴露評(píng)估表、壺菌風(fēng)險(xiǎn)后果評(píng)估表獲得基礎(chǔ)測(cè)量數(shù)據(jù)，經(jīng)釋放評(píng)估和接觸暴露評(píng)估綜合分析，后果評(píng)估與釋放、接觸評(píng)估綜合分析，壺菌定植和傳播的可能性評(píng)估得到各輸出國(guó)、各輸出大洲兩棲類壺菌的風(fēng)險(xiǎn)