中藥更年春方對去勢大鼠神經(jīng)內分泌免疫功能影響的觀察.pdf

1、隨著社會的老齡化，圍絕經(jīng)期綜合征的發(fā)病率也隨之升高，神經(jīng)內分泌免疫功能的紊亂被認為是其發(fā)病的根本。目前國內外針對圍絕經(jīng)期綜合征主要采用激素替代療法進行治療，但因其副作用及禁忌癥限制了其在臨床上的應用。近年來因中藥治療圍絕經(jīng)期綜合征副作用小，而療效顯著，已逐漸成為圍絕經(jīng)期綜合征的主要治療方法。中藥更年春方(GNC)是我院根據(jù)中醫(yī)理論及多年臨床實踐而研制，在治療圍絕經(jīng)期綜合征方面已取得良好療效，因此有必要研究GNC對圍絕經(jīng)期綜合征的治療機制

2、。本研究擬通過體外實驗研究，從神經(jīng)內分泌免疫功能角度出發(fā)，探討GNC對圍絕經(jīng)期綜合征的治療機制，為GNC用于臨床提供有效的科學依據(jù)。
　　第一部分中藥更年春方對去勢大鼠學習記憶能力的影響
　　目的:觀察GNC對去勢大鼠學習記憶能力的影響，探討GNC對神經(jīng)系統(tǒng)功能的影響機制。
　　方法:本研究實驗分7組。3月齡SD雌性大鼠去勢(OVX)后隨機分組，灌服中藥復方GNC作為OVX+GNC組（實驗組），灌服戊酸雌二醇作為OVX

3、+ E2組（陽性對照組），灌服生理鹽水作為OVX+NS組（模型組）;手術過程相同但不去勢的SD雌性大鼠即假手術（Sham）后隨機分組，灌服GNC為Sham+GNC組，灌服生理鹽水為Sham+NS組;未行任何手術的SD雌性大鼠即正常(NC)后隨機分組，灌服生理鹽水作為NC+NS組，不灌任何藥物大鼠作為NC組。灌藥3個月后經(jīng)Morris水迷宮實驗檢測各組大鼠的學習記憶能力。
　　結果:
　　(1)在Morris水迷宮實驗中定位航

4、行能力測試(place navigation performance，PNP)中，OVX+NS組與NC+NS組、NC組比較，逃避潛伏期(escapelatent period，ELP)時間明顯延長(P＜0.05);OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，ELP時間明顯縮短(P＜0.05);Sham+GNC組與Sham+NS組、NC組比較ELP時間明顯延長(P＜0.05); OVX+E2組與OVX+GNC組比較，ELP無明顯

5、差異(P＜0.05)。
　　(2)在空間探索能力測試(spatial probe performance，SPP)中，OVX+NS組與NC+NS組及NC組比較，穿越平臺次數(shù)明顯減少(P＜0.05); OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，穿越平臺次數(shù)明顯增多(P＜0.05);Sham+GNC組與Sham+NS組及NC組比較，穿越平臺次數(shù)明顯減少(P＜0.05);OVX+E2組與OVX+GNC組比較，穿越平臺次數(shù)無明

6、顯差異(P＜0.05)。在探索軌跡圖中，OVX+NS組與NC+NS組及NC組比較，探索軌跡呈現(xiàn)無規(guī)律分布;OVX+GNC組、OVX+E2組與OVX+NS組比較，探索軌跡明顯集中分布于平臺所在位置附近;Sham+GNC組與Sham+NS組及NC組比較，探索軌跡呈現(xiàn)無規(guī)律分布;OVX+E2組與OVX+GNC組比較，探索軌跡的分布無明顯差異。
　　結論:去勢會導致大鼠學習記憶能力減退;GNC可提高去勢大鼠的學習記憶能力，效果與E2類似;

7、未去勢大鼠灌服GNC反而導致學習記憶能力減退。
　　第二部分中藥更年春方對去勢大鼠神經(jīng)遞質、細胞因子、瘦素及子宮內膜的影響
　　目的:觀察GNC對去勢大鼠神經(jīng)內分泌免疫功能的影響，探討GNC對圍絕經(jīng)期綜合征的治療機制。
　　方法:本研究實驗分8組。3月齡SD雌性大鼠去勢(OVX)后隨機分組，灌服中藥復方GNC高劑量（OVX+GNCH組）、灌服中藥復方GNC顆粒制劑中劑量（OVX+GNCM組）、灌服中藥復方GNC顆粒制劑

8、低劑量（OVX+GNCL組）作為實驗組，灌服戊酸雌二醇高劑量（OVX+ EH組）、灌服戊酸雌二醇低劑量（OVX+ EL組）作為陽性對照組，灌服雙蒸水（OVX+D組）作為模型組。手術過程相同但不去勢的SD雌性大鼠即假手術（Sham）隨機分組，以灌服中藥復方GNC中劑量作為Sham+GNCM組、灌服雙蒸水作為Sham+D組。灌藥30天各組大鼠測體重后，經(jīng)心臟采血處死后，取大鼠大腦后分離下丘腦，檢測神經(jīng)遞質(NE、DA、5-HT、5-HIAA

9、)水平;取大鼠血清檢測細胞因子（IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-2、IFN-γ）水平、Leptin水平、E2水平;取大鼠子宮檢測子宮內膜厚度。
　　結果:
　　(1) OVX+D組與Sham各組比較，大鼠下丘腦內神經(jīng)遞質NE、DA含量明顯降低(P＜0.05)，5-HT、5-HIAA含量、5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯升高(P＜0.05); OVX+GNCH組、OVX+GNCM組、OVX+ EH組與OVX+D組

10、比較，下丘腦內神經(jīng)遞質NE含量明顯降低(P＜0.05)。OVX+GNC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，大鼠下丘腦內神經(jīng)遞質DA含量明顯升高(P＜0.05)、5-HT、5-HIAA含量明顯降低(P＜0.05)、5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯下降(P＜0.05);OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，大鼠下丘腦神經(jīng)遞質之間均無明顯差異。OVX+GNCH組、OVX+ EH組與OVX+GNCM組、OVX+GNCL組比較，大鼠下

11、丘腦內神經(jīng)遞質5-HT含量明顯降低(P＜0.05)，5-HT/NE、5-HT/DA比值明顯下降(P＜0.05)。
　　(2) OVX+D組與Sham各組比較，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯升高(P＜0.05)，血清IL-2、IFN-γ水平明顯降低(P＜0.05);OVX+GNC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，血清IL-1β、IL-6、TNF-α水平明顯降低(P＜0.05)，血清IL-2、IFN-γ水平明顯升高

12、(P＜0.05); OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，血清細胞因子的含量之間均無明顯差異。OVX+GNCH組與OVX+GNCL組比較，血清IFN-γ水平明顯升高(P＜0.05);OVX+EH組與OVX+ EL組比較，血清IFN-γ水平明顯升高(P＜0.05)。
　　(3)灌藥前各組體重之間無明顯差異。灌藥后OVX+D組與Sham各組比較，體重明顯增加(P＜0.05)，血清leptin水平明顯升高(P＜0.05); OVX+G

13、NC各組、OVX+E各組與OVX+D組比較，體重明顯降低(P＜0.05)，血清leptin水平明顯降低(P＜0.05);OVX+GNC各組與OVX+E各組比較，體重及血清leptin水平均無明顯差異。
　　(4) OVX+D組與Sham各組比較，血清E2水平明顯降低(P＜0.01)，子宮內膜厚度明顯變薄(P＜0.01); OVX+GNC各組與OVX+D組比較，血清E2水平無明顯差異，子宮內膜厚度無明顯差異;OVX+E各組與OVX+