小鼠乳腺中胰島素樣生長(zhǎng)因子家族的表達(dá)和作用.pdf

1、出生后乳腺發(fā)育要經(jīng)歷青春期、妊娠期、泌乳期、退化期多個(gè)時(shí)期，在這期間乳腺的結(jié)構(gòu)和功能都將發(fā)生很大變化，乳腺實(shí)質(zhì)組織和脂肪組織劇烈變化。脂肪組織是乳腺不可缺少的組成部分，它在乳腺中不僅起著結(jié)構(gòu)支架作用，還能通過旁分泌途徑影響乳腺實(shí)質(zhì)的發(fā)育，乳腺實(shí)質(zhì)也能合成、分泌生長(zhǎng)因子影響脂肪組織的變化。胰島素樣生長(zhǎng)因子家族包括胰島素樣生長(zhǎng)因子(insulin-likegrowthfactors，IGFs)、胰島素樣生長(zhǎng)因子受體(insulin-like

2、growthfactorreceptor，IGFR)和胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(insulin-likegrowthfactorbindingproteins，IGFBPs)，在乳腺發(fā)育過程中對(duì)實(shí)質(zhì)組織和脂肪組織都起著重要作用。由于胰島素樣生長(zhǎng)因子家族成員對(duì)乳腺生長(zhǎng)和泌乳調(diào)控的重要作用，了解它們的表達(dá)規(guī)律和作用對(duì)于揭示乳腺發(fā)育和泌乳機(jī)理，運(yùn)用各種(遺傳和營(yíng)養(yǎng))手段實(shí)現(xiàn)對(duì)乳腺發(fā)育和乳腺功能的調(diào)控，保證乳腺健康，提高產(chǎn)奶動(dòng)物生產(chǎn)水平與效率具

3、有重要的學(xué)術(shù)理論和生產(chǎn)實(shí)際意義。 本研究選取正常小鼠乳腺組織各個(gè)發(fā)育時(shí)期的若干時(shí)點(diǎn)進(jìn)行研究。對(duì)乳腺脂肪組織染色結(jié)果顯示：小鼠乳腺發(fā)育過程中脂肪組織經(jīng)歷多次結(jié)構(gòu)和功能變化，青春期、妊娠期、退化期最為顯著；青春期，脂肪細(xì)胞分布在導(dǎo)管樹周圍，大的脂肪細(xì)胞開始分化為前成脂肪細(xì)胞；妊娠期，實(shí)質(zhì)組織取代脂肪組織成為乳腺的主體成分，腺泡腔內(nèi)出現(xiàn)脂滴；泌乳期，腺泡腔內(nèi)存在許多大小不一的脂滴；退化期，前成脂肪細(xì)胞重新分化成為大的脂肪細(xì)胞，脂肪組織

4、重新成為乳腺的主體成分。采用間接免疫熒光的雙重染色方法，通過激光掃描共聚焦顯微技術(shù)檢測(cè)乳腺中IGFs、IGFR及IGFBPs的表達(dá)，并進(jìn)行定量定位研究，同時(shí)對(duì)各時(shí)期的cyclinD1和PAI-1表達(dá)也進(jìn)行了檢測(cè)。檢測(cè)結(jié)果顯示：(1)IGF-I分布在導(dǎo)管和腺泡上皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞的胞質(zhì)區(qū)域和基質(zhì)，主要在青春期和妊娠期初期表達(dá)，對(duì)促進(jìn)未成熟乳腺導(dǎo)管發(fā)育和小葉腺泡形成有重要作用，對(duì)維持泌乳有一定影響；(2)IGF-Ⅱ在導(dǎo)管和腺泡上皮細(xì)胞基底膜側(cè)

5、特異表達(dá)，促進(jìn)導(dǎo)管形態(tài)發(fā)生，尤其對(duì)妊娠期小葉腺泡形成和分化有顯著作用，在泌乳乳腺大量表達(dá)，表明它具有啟動(dòng)和維持泌乳的作用；(3)IGF-IR分布于導(dǎo)管和腺泡上皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和基質(zhì)，尤其在妊娠期和泌乳期后期高水平表達(dá)，介導(dǎo)IGFs促進(jìn)導(dǎo)管和腺泡發(fā)育、維持泌乳的作用；(4)IGFBP-5低水平表達(dá)，分布于脂肪細(xì)胞胞質(zhì)區(qū)域和基質(zhì)，在一些導(dǎo)管和腺泡上皮細(xì)胞胞質(zhì)也檢測(cè)到IGFBP-5青春期初期以較高水平表達(dá)來調(diào)節(jié)IGFs作用，強(qiáng)制退化乳腺IGF

6、BP-5表達(dá)水平增強(qiáng)，在腺泡上皮細(xì)胞的頂膜側(cè)和基底膜側(cè)不均勻表達(dá)，能夠啟始乳腺的退化，通過上調(diào)纖溶酶活性促進(jìn)乳腺組織重建，但在體內(nèi)不能通過結(jié)合PAI-1來實(shí)現(xiàn)這些作用；(5)PAI-1表達(dá)穩(wěn)定，但在脂肪組織變化顯著的青春期初期、妊娠期初期和退化期啟始階段明顯上調(diào)；主要在脂肪細(xì)胞和乳腺上皮細(xì)胞表達(dá)，調(diào)控脂肪細(xì)胞分化和乳腺組織重建。(6)cyclinD1存在于導(dǎo)管和腺泡上皮細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和基質(zhì)；cyclinD1在青春期、妊娠期、泌乳期的啟始