銀杏雄株葉片和花粉中黃酮類化合物的提取、檢測(cè)與分析.pdf

1、我國(guó)是銀杏的故鄉(xiāng)，銀杏資源豐富，銀杏雄株葉片與花粉是開(kāi)發(fā)利用銀杏功能性成分的重要資源。銀杏黃酮類化合物是重要的功能性成分。針對(duì)目前國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)對(duì)銀杏功能性成分開(kāi)發(fā)利用的需求及其研究進(jìn)展，研究銀杏雄株葉片和花粉中黃酮類化合物的提取與檢測(cè)技術(shù)及篩選高含量功能性成分的雄株具有重要的理論意義與應(yīng)用價(jià)值。本研究連續(xù)兩年分別于花期和7月-9月間隨機(jī)選取我國(guó)銀杏主要產(chǎn)區(qū)揚(yáng)州市及徐州市的87株銀杏雄株的葉片與花，采用正交設(shè)計(jì)優(yōu)化提取處理組合和RP-HPL

2、C等技術(shù)與方法對(duì)其黃酮類化合物進(jìn)行提取并檢測(cè)分析，對(duì)銀杏雄株葉片與花粉的黃酮類化合物含量分別進(jìn)行聚類分析。取得的研究結(jié)果主要有： 1、供試銀杏雄株的葉片和花粉兩者間槲皮素、山奈黃素和異鼠李素三種黃酮苷的含量差異較大，葉片中分別為0.595％、0.566％和0.44％；花粉中分別為0.081％、2.196％和0.060％；其總黃酮苷的含量分別為1.601％和2.187％。銀杏雄株葉片的總黃酮苷含量與葉片厚度、SLW呈極顯著正相關(guān)，

3、其葉片厚度、SLW可作為評(píng)價(jià)銀杏葉片中黃酮類化合物含量水平的重要指標(biāo)。 2、銀杏雄株花粉中總黃酮苷的含量高于葉片，主要表現(xiàn)為山奈黃素苷含量相對(duì)較高，葉片和花粉兩者間總黃酮苷含量的相關(guān)系數(shù)為0.9270*，呈顯著正相關(guān)。 3、選擇影響銀杏黃酮類化合物提取的溶劑濃度、料液比、提取溫度及提取時(shí)間為主要作用因子，分別設(shè)計(jì)3個(gè)處理水平，采用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)[L9(34)]優(yōu)化銀杏雄株黃酮類化合物提取體系，結(jié)果表明：70％的乙醇、1:1

4、5的料液比、80℃的提取溫度、40 min的超聲提取時(shí)間為銀杏雄株黃酮類化合物提取的最佳組合。 4、選用水溶劑提取銀杏黃酮類化合物，經(jīng)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)[L9(33)]優(yōu)化提取體系，結(jié)果表明：1:15的料液比、80℃的提取溫度、60 min的超聲提取時(shí)間為銀杏雄株黃酮類化合物水提取的最佳組合。銀杏雄株葉片的黃酮類化合物的乙醇提取得率為2.32％，水溶劑提取得率為0.396％，具顯著差異。 5、采用液氮-沸水溫差法對(duì)銀杏花粉進(jìn)行

5、破壁處理，銀杏花粉中黃酮類化合物可得到有效提取。 6、應(yīng)用銀杏黃酮類化合物提取的優(yōu)化體系，經(jīng)對(duì)供試樣品超聲波提取、石油醚及正己烷萃取、離心，銀杏雄株葉片和花粉中黃酮類化合物可得到有效分離。 7、采用ADS-17大孔樹(shù)脂吸附、吸附時(shí)間為30 min、70％乙醇溶液為洗脫液、洗脫液流速為1ml/min、洗脫量為3倍樹(shù)脂床體積，銀杏雄株葉片和花粉中黃酮類化合物可得到有效純化。 8、RP-HPLC檢測(cè)分析結(jié)果表明，供試銀

6、杏雄株間的各黃酮苷含量和總黃酮苷含量均存在顯著差異，構(gòu)建的銀杏雄株葉片和花粉中黃酮苷元的HPLC指紋圖譜是評(píng)價(jià)銀杏雄株葉片和花粉中黃酮類化合物含量水平的主要依據(jù)。 9、供試銀杏雄株葉片中總黃酮苷含量聚類分析取閾值15時(shí)，可分為3類，其中I類67株，II類15株，III類5株，其黃酮苷含量分別為1.542％、2.082％和0.951％。銀杏雄株花粉中黃酮苷含量聚類分析取閾值13時(shí)，同樣可分為3類，其中I類48株，II類38株，II