博寧霉素和二甲基黃青霉素抑制腫瘤細胞增殖的機制研究.pdf

1、抗腫瘤抗生素是由微生物代謝產生的抗腫瘤活性物質，種類很多，已應用于臨床的有十余種，絲裂霉素，多柔比星，博萊霉素等天然來源的抗腫瘤抗生素以及經化學修飾的同類物，已成為腫瘤治療的常用藥物。
　　 本論文研究博寧霉素（Boningmycin，BON）和二甲基黃青霉素（Xanthocillin Xdimethyl，XXD）對腫瘤細胞的作用機制。
　　 抗腫瘤藥物在低濃度下引起腫瘤細胞衰老，是一種重要的抑瘤機制，本論文以研究較多的

2、抗腫瘤藥物多柔比星（Doxorubicin，DOX），作為陽性對照藥。
　　 細胞衰老是抑制腫瘤的重要步驟，本論文觀察了BON引起人口腔上皮癌（KB）細胞和非小細胞肺癌（A549）細胞的衰老的機制；BON對人乳腺癌細胞（MCF-7）及耐多柔比星的MCF-7細胞（MCF-7/DOX）的作用機制進行了初步研究。
　　 通過MTT法和克隆形成率法檢測細胞增殖抑制作用，發(fā)現其對KB細胞有很好的增殖抑制作用。SA-β-gal染色檢

3、測細胞衰老，發(fā)現BON能引起KB細胞和A549細胞衰老；用不同濃度BON處理KB和A549細胞24 h，用流式細胞儀測定BON對細胞周期分布，細胞內活性氧自由基水平（reactive oxygen species，ROS）的影響，并與相同情況下DOX對細胞的作用進行比較。結果表明KB細胞對BON非常敏感，BON將KB細胞周期阻斷于G2/M期，作用比DOX略強；細胞內ROS水平升高，作用強度與DOX接近。BON對A549細胞的作用強度遠遠

4、弱于DOX。Westernblotting檢測蛋白的表達，結果表明0.1μmol·L-1博寧霉素誘導KB細胞衰老，檢測到衰老標志蛋白P21的表達明顯增加；而高濃度的博寧霉素激活細胞凋亡通路。
　　 BON能夠抑制MCF-7和MCF-7/DOX細胞的增殖，將細胞周期阻斷于G2/M期，凋亡標志蛋白PARP切割，說明BON引起細胞凋亡。
　　 抗腫瘤藥物的作用機制之一是誘導腫瘤細胞凋亡。細胞凋亡（apoptosis）是指為維持

5、內環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。主要形態(tài)特征是染色質凝集，核小體斷裂，形成凋亡小體等。
　　 XXD結構母核為黃青霉素（Xanthocillin），是以結核菌回旋酶B亞基為靶點的藥物篩選中得到，具有明顯的抑制結核菌的活性?？紤]到腫瘤細胞中也存在相似的酶類，極有可能XXD也具有明顯的抑制腫瘤細胞增殖的作用。本論文研究XXD對人口腔上皮癌（KB）和肝癌細胞（HepG2）細胞的作用機制。通過MTT法檢測發(fā)現XXD可以抑制