大鼠胚胎期嗅上皮中嗅細胞發(fā)育及細胞凋亡的研究.pdf

1、[研究背景] 嗅覺是哺乳動物的重要感覺器官之一，它同視覺、聽覺一樣，是人體捕獲外界信息的特殊裝置。人類的嗅覺具有辨別氣味、增進食欲、識別環(huán)境、報警等作用。嗅覺還通過中樞神經(jīng)系統(tǒng)影響人的情緒、調(diào)節(jié)生命周期。對一些特殊職業(yè)，如香精師、美食家、偵察員、醫(yī)師、公安消防人員等，靈敏的嗅覺更是必不可少。嗅神經(jīng)元是唯一暴露在外界環(huán)境中的神經(jīng)元容易受到外界的損傷。FrankME等報道人類永久性嗅覺障礙發(fā)病率約1.2％，暫時性嗅覺障礙發(fā)病率約62

2、.4％，由于缺乏客觀檢查方法和發(fā)生機制不明等原因，嗅覺障礙一直缺乏有效的治療方法。隨著人們生活水平的提高，生活質(zhì)量有更高的要求，嗅覺越來越引起重視。本實驗通過對大鼠嗅感覺上皮發(fā)育過程的組織化學及大鼠嗅上皮細胞凋亡的研究以期對嗅覺障礙的發(fā)生及治療提供一定的理論依據(jù)。 [研究目的] 免疫組化方法檢測神經(jīng)特異性烯醇酶(NSE)及嗅細胞標記蛋白(OMP)在胎鼠嗅上皮發(fā)育過程中的表達，末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP缺口末端標記

3、技術(shù)(TUNEL)檢測胎鼠嗅上皮發(fā)育過程中的細胞凋亡，以揭示哺乳動物胚胎期嗅上皮的發(fā)生、發(fā)育、成熟及凋亡過程。 [研究方法] 取大鼠不同孕期(E13-E21)胚胎鼻部標本，免疫組化方法檢測神經(jīng)特異性烯醇酶(NSE)及嗅細胞標記蛋白(OMP)在不同胎齡胎鼠嗅上皮中的表達及其規(guī)律。TUNEL方法檢測其嗅上皮細胞凋亡，并計算細胞凋亡指數(shù)(AI)。統(tǒng)計學方法數(shù)據(jù)以x±s表示，采用spss10.0統(tǒng)計軟件處理，各組間平均數(shù)比較采用

4、非參數(shù)秩和檢驗，P<0.05為具有統(tǒng)計學意義。 [結(jié)果] 大鼠E13天胎鼠嗅上皮中即有神經(jīng)特異性烯醇酶表達(NSE)，細胞數(shù)量多，細胞排列尚不規(guī)律，沒有形成典型的柱狀上皮形念。隨胎齡增加陽性細胞數(shù)量增加，排列規(guī)律，細胞形態(tài)更接近雙極細胞。E14-E21天胎鼠，在嗅上皮中均可見大量陽性細胞。E13天胎鼠嗅上皮中未見OMP陽性表達細胞。在大鼠E14天胎鼠，嗅上皮中開始出現(xiàn)嗅細胞標記蛋白(OMP)陽性細胞，數(shù)量少散在分布，隨胎

5、齡增加陽性細胞數(shù)量增多。至E17天達高峰，以后漸趨穩(wěn)定。在E13天胎鼠嗅上皮中可見細胞凋亡，細胞凋亡數(shù)量少，E13-E15天胎鼠嗅上皮中細胞凋亡數(shù)量較穩(wěn)定，至E16天胎鼠嗅上皮中凋亡細胞數(shù)量明顯增加，達到高峰，E18天-E21天胎鼠嗅上皮中凋亡細胞數(shù)量逐漸減少漸趨于穩(wěn)定。E16天胎鼠嗅上皮中凋亡指數(shù)與其他天數(shù)之間P<0.05，差異有顯著性。其他組間P>0.05。 [結(jié)論] 嗅細胞標記蛋白(OMP)與神經(jīng)特異性烯醇化酶(N