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文檔簡介
1、目的：分離、培養(yǎng)并鑒定兔骨髓間充質(zhì)干細胞(rMSCs)，將rMSCs在三維殼聚糖(Chitosan)支架上培養(yǎng)，并在一定條件下誘導其髓核細胞分化，探討組織工程髓核的可行性。 方法：rMSCs的分離、培養(yǎng)、鑒定；將體外培養(yǎng)傳3代的兔骨髓間充質(zhì)干細胞，接種于殼聚糖支架，給予1％ITS-A(主要含有胰島素、轉(zhuǎn)鐵蛋白和亞硒酸)誘導其髓核細胞分化，體外培養(yǎng)7d、14d、21d，并同時設立非誘導對照組。觀察三維支架上rMscs的生長及誘導情
2、況。對支架細胞復合物行Ⅱ型膠原免疫組化檢測，并分別測定培養(yǎng)液中糖胺聚糖(GAG)含量、Ⅱ型膠原的表達，MTT法測定細胞活力。 結(jié)果：應用梯度離心法和體外貼壁培養(yǎng)法，可有效分離rMSCs，本實驗也證明rMSCs具有向成骨細胞、脂肪細胞、軟骨細胞三向分化的潛能。rMSCs在殼聚糖三維支架上可以生長，培養(yǎng)液中GAG含量、Ⅱ型膠原蛋白表達等顯示rMSCs可向髓核細胞分化。 結(jié)論：三維殼聚糖支架上培養(yǎng)的rMSCs，在一定條件下，可
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