黃酒糟蛋白酶法提取工藝研究.pdf

1、本論文針對(duì)黃酒糟組織致密，粗纖維含量高的成分特點(diǎn)，從提高蛋白提取率的角度出發(fā)，重點(diǎn)針對(duì)黃酒糟蛋白的提取工藝進(jìn)行了研究，探索了水洗和纖維素酶解條件，比較了堿法提取和酶法提取的黃酒糟蛋白的各種理化性質(zhì)差異性。主要研究成果包括： (1)以60℃， 1：6料液比水洗30min，可以獲得蛋白質(zhì)含量為35.71％的酒糟。根據(jù)幾組預(yù)實(shí)驗(yàn)和纖維素酶的最適反應(yīng)體系，確定纖維素酶的水解條件為：料液比1：10，加酶量28U/g，pH為5，反應(yīng)時(shí)間30

2、min，溫度50℃，此條件下纖維素的降解率為37.25％。 (2)通過單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)，確定了堿性蛋白酶水解黃酒糟蛋白的優(yōu)化工藝條件為：加酶量為2000U/g，料液比1：8，反應(yīng)pH值10，反應(yīng)時(shí)間3h，溫度為50℃，蛋白提取率為74.42％。 (3)通過正交實(shí)驗(yàn)確定了堿法提取黃酒糟蛋白的兩種優(yōu)化工藝條件：料液比1：8，pH值11，反應(yīng)時(shí)間3h，溫度為50℃，或是料液比1：8，pH值11，反應(yīng)時(shí)間4h，溫度為45℃。

3、在這兩個(gè)條件下進(jìn)行提取，蛋白質(zhì)得率約為67％。 (4)對(duì)堿性蛋白酶提取酒糟蛋白進(jìn)行二次正交旋轉(zhuǎn)組合回歸分析，檢驗(yàn)結(jié)果保留了X<,1>、X<,2>、X<,3>、X<,4>、X<,1><'2>、X<,1>X<,3>、X<,2>X<,3>、X<,2>X<,4>、X<,3><'2>八個(gè)顯著項(xiàng)，去除其它幾個(gè)P值>0.1的不顯著項(xiàng)，得到回歸方程為： Y=74.19+1.07X<,1>-0.64X<,2>-1.05X<,3>+1.95X<,4

4、>.1.24X<,1><'2>+0.92X<,1>X<,3>-2.34X<,2>X<,3>+1.51X<,2>X<,4>-0.51X<,3><'2>(5)通過SDS-PAGE對(duì)預(yù)消化蛋白的分子量分布進(jìn)行了分析，發(fā)現(xiàn)堿性蛋白酶水解黃酒糟提取得到的產(chǎn)物主要是分子量小于4.1KDa的小肽物質(zhì)，具有很好的溶解性；堿法制得的黃酒糟蛋白分子量主要分布在20-35kDa范圍內(nèi)，其溶解性很低。兩種方法制得的黃酒糟蛋白，發(fā)泡性和乳化性不高，其發(fā)泡性分別為