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1、解磷微生物具有將土壤中難溶性的磷溶解為植物可吸收利用的有效磷的生物學(xué)特性,不僅能提高土壤中有效磷含量,促進(jìn)植物對(duì)磷的吸收利用,而且能促進(jìn)植物的生長(zhǎng),目前已成為農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中重點(diǎn)研究方向。但這方面的研究主要集中在農(nóng)作物上,對(duì)桉樹(shù)林木的研究報(bào)道還比較少。本研究對(duì)柳桉、鄧恩桉和巨桉3種林地土壤中解磷菌進(jìn)行分離,篩選出解無(wú)機(jī)磷菌和解有機(jī)磷菌較強(qiáng)的菌株,再探討培養(yǎng)液有效磷含量、pH、總有機(jī)酸含量以及它們之間相關(guān)性;模擬干旱條件下解磷菌的解磷能力
2、;并通過(guò)盆栽試驗(yàn),測(cè)定植物凈光合速率、生物量、植物體內(nèi)磷含量等指標(biāo),探討解磷菌對(duì)植物生長(zhǎng)的影響。同時(shí)對(duì)解無(wú)機(jī)磷活力較強(qiáng)的菌株進(jìn)行16s rDNA序列測(cè)定,在Genbank上進(jìn)行比對(duì)分析,初步確定菌株的分類地位。
(1)不同桉樹(shù)林解磷菌的篩選從3種不同桉樹(shù)人工林土壤中篩選出解磷細(xì)菌,柳桉林土壤無(wú)機(jī)磷菌和有機(jī)磷菌數(shù)量均大于其它兩種桉樹(shù)人工林土壤中解磷菌數(shù)量,初步斷定柳桉林土壤肥力相對(duì)比較好。無(wú)機(jī)磷菌P6、P7、P8、P19、P
3、25、P26和P28解磷能力較強(qiáng),并且其培養(yǎng)液溶磷量與pS值存在極顯著相關(guān)關(guān)系。有機(jī)磷菌YP8、YP16、YP17、YP18、YP26、YP27、YP29、YP30的解磷能力較強(qiáng),培養(yǎng)液溶磷量與pH值不存在顯著相關(guān)性。
(2)菌株活力研究解無(wú)機(jī)磷能力較強(qiáng)的7株菌株對(duì)不同磷源物質(zhì)的解磷能力差異很大。菌株P(guān)6對(duì)磷酸鋁的溶解活力最強(qiáng),達(dá)16.920μg/ml;P8次之,為12.779μg/ml,培養(yǎng)液中磷酸鋁含量與pH值之間沒(méi)有
4、相關(guān)關(guān)系。7株菌株對(duì)磷酸鐵的溶解能力并不是很強(qiáng),只有P6、P7、P19溶解活力大于空白。培養(yǎng)液磷酸鐵含量與pH之間存在相關(guān)關(guān)系。7株菌株對(duì)磷酸一氫鈣的解磷活力比較強(qiáng),可達(dá)138.120~410.550μg/ml,明顯大于對(duì)其它磷源物質(zhì)的解磷活力,菌株溶解磷酸一氫鈣含量與pn不存在相關(guān)關(guān)系。
聚乙二醇6000(PEG-6000)模擬干旱脅迫下,7株無(wú)機(jī)磷菌的解磷能力發(fā)生無(wú)規(guī)律變化。在10%的PEG處理下,菌株溶解活力差異顯著
5、,溶解活力P7>P8>P19>P26>P25>P28>P6;在20%處理下,溶解活力P7>P26>P19>P25>Pg>P28>P6;在30%處理下,溶解活力為P8>P19>P26>P25>P28>P6>P7。不同菌株總體上隨著脅迫強(qiáng)度增大,溶解活力下降,結(jié)果顯示菌株P(guān)8和P19具有較強(qiáng)的耐干旱能力。5株無(wú)機(jī)菌進(jìn)行以磷酸鈣為唯一磷源物質(zhì)的液體培養(yǎng),隨著時(shí)間的推移菌株P(guān)6、P7、P8、P25在培養(yǎng)期間磷含量出現(xiàn)多個(gè)峰值,總體上在d3(d3
6、表第3天,以此類推)達(dá)首個(gè)最值;菌株P(guān)19在培養(yǎng)過(guò)程中解磷能力有所下降。培養(yǎng)液pH值總體上呈現(xiàn)下降的趨勢(shì),P25、P7在d5~d7菌液pH值下降。培養(yǎng)液中總有機(jī)酸的含量,除了P6下降,其它的都隨時(shí)間的推移而上升。
(3)解磷菌的分子分類鑒定對(duì)篩選出來(lái)的解磷菌進(jìn)行測(cè)序比對(duì)表明,桉樹(shù)林土壤中的解磷菌主要以芽孢桿菌屬(Bacillus sp.)為主,占69.23%,此外還有葡萄球菌屬(Staphylococcus),以及梭形桿菌
7、屬(Lysinibacillus)。各菌株的16S rDNA序列都已在GenBank上注冊(cè)。
(4)解磷菌對(duì)桉樹(shù)苗木生長(zhǎng)的影響田間試驗(yàn)表明不同處理菌株對(duì)桉樹(shù)生長(zhǎng)均有一定的促進(jìn)作用。其中單菌處理2、20、21、22的植株鮮重和干重增幅都達(dá)60%以上;單菌處理20、21、22的植株樹(shù)高和地徑的增幅達(dá)30%以上;而混菌處理及菌加有機(jī)肥處理對(duì)桉樹(shù)生物量的促進(jìn)作用也很明顯。
植物體內(nèi)有效磷的含量較空白有很大的提升。單菌
8、處理2增幅最大,其次為處理22?;炀幚?6、28的促進(jìn)效果比單菌處理效果更佳。不同處理提高了桉樹(shù)的凈光合速率,單菌處理2、3、20、21、22、23作用明顯,其中處理23增幅最大,其次為處理2。混菌處理7增幅最大,菌加有機(jī)肥處理中處理17增幅最大。不同處理植物葉綠素含量差異很大,其中處理2、3、5、12、14增幅為負(fù)值。較空白,單菌處理增幅最大為處理23,其次為處理21;混菌處理中增幅最大的為處理40;單菌加有機(jī)肥增幅最大為處理38。
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