髓核組織中ADAMTS-7，TNF-α的表達(dá)與椎間盤退變的實驗研究.pdf

1、目的:統(tǒng)計資料顯示下腰痛和坐骨神經(jīng)痛發(fā)病率越來高，嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量并給患者及社會帶來了巨大經(jīng)濟負(fù)擔(dān)。腰椎間盤退行性變是引起下腰痛和坐骨神經(jīng)痛的主要原因之一，目前沒有理想的手術(shù)方式及保守治療方法來緩解疼痛癥狀。因此探究腰椎間盤退變的病例機制及減緩腰椎間盤退變病程發(fā)展具有重大的意義，研究表明基質(zhì)金屬蛋白酶及炎癥因子在腰椎間盤退變中發(fā)揮重大作用，本論文為研究ADAMTS-7及TNF-α在椎間盤組織中的表達(dá)規(guī)律及其在腰椎間盤組織退變過程中

2、的作用。
　　方法:選取2013年12月-2014年5月山東大學(xué)齊魯醫(yī)院骨外科住院的50例患者，據(jù)Thompson分級分為3組:對照組(Control，n=5):來自脊柱爆裂骨折患者且其椎間盤組織突出合并神經(jīng)癥狀需行椎管減壓+內(nèi)固定術(shù)，MRI顯示無明顯退變;二級組(GradeⅡ，n=20);四級組(GradeⅣ，n=25)。分別采用免疫組織化學(xué)染色技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)對三組樣本的髓核組織進(jìn)行腫瘤壞死因子α(TN

3、F-α)和血小板凝血酶敏感蛋白樣模體的解整鏈蛋白金屬蛋白酶7(ADAMTS-7)進(jìn)行定性、定量檢測。
　　選取200g-250g Wister大鼠30只隨機分成兩組:對照組(Control group，n=10)、實驗組(Experimental group，n=20)。對實驗組大鼠行腰椎間盤針刺構(gòu)建退變模型，4周后，對病變間盤髓核組織及對照組相應(yīng)間盤髓核組織采用組織免疫化學(xué)染色技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)進(jìn)行TNF-

4、α、ADAMTS-7進(jìn)行定性、定量檢測。
　　對所得結(jié)果進(jìn)行各組之間比較，行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果:1、免疫組織化學(xué)技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡技術(shù)均顯示人退變髓核組織TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比正常髓核組織中的高(p＜0.01)，4級組TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比2級組中的要高(p＜0.01)。
　　2、動物實驗結(jié)果與人體髓核組織中結(jié)果基本一致。免疫組織化學(xué)技術(shù)、RT-PCR技術(shù)以及蛋白質(zhì)印跡

5、技術(shù)均顯示退變大鼠髓核組織TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)比正常髓核組織中的高(p＜0.01)。
　　結(jié)論:TNF-α、ADAMTS-7均表達(dá)于正常的髓核組織和退變的髓核組織中，并且退變的越嚴(yán)重表達(dá)量越多。在退變的髓核組織中TNF-α、ADAMTS-7的表達(dá)量都增加說明其與椎間盤的退變有密切的聯(lián)系，有研究表明TNF-α、ADAMTS-7在骨性關(guān)節(jié)炎中表達(dá)呈現(xiàn)正反饋通路加速其病程進(jìn)展，因此在椎間盤退變過程中可能也存在這樣的通路加速