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文檔簡介
1、鏈霉菌復(fù)雜的形態(tài)分化過程是鏈菌研究熱點之一.天藍鏈霉菌基因組計劃的完成,為形態(tài)及生理分化發(fā)育的研究提供了大量有用的信息.該研究根據(jù)天藍色鏈霉菌基因組計劃測出的序列,對兩個可能與形態(tài)分化及生理分化起負調(diào)節(jié)作用的nrs周源基因,通過基因中斷或置換,表型觀察和胞內(nèi)互補及定點誘變等方法來確定它們的功能及bldA的關(guān)系.首先,利用已構(gòu)建的一系列基因中斷（置換）結(jié)構(gòu)對M145染色體上相對應(yīng)的基因進行中斷（置換）,試圖尋找bldA調(diào)節(jié)分化的靶基因.用
2、Southern雜交的方法驗證雙交換的發(fā)生.觀察雙交換菌株表型,大多在各種培養(yǎng)基上與野生型菌株M145無明顯的形態(tài)學(xué)差異只有SC5H1.40c和SC5H1.41的基因中斷菌株ZH1與野生型菌株M145在SFM上表現(xiàn)出差異,即能過量產(chǎn)生放線紫紅素.這種表型能被含有完整的兩個基因的整合載體pHZ2543互補,而不能被只含有一個SC5H1.40c的整合型載體pHZ2533互補.然后,構(gòu)建了只中斷SC5H1.40的基因中斷結(jié)構(gòu)pHZ2531,用
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