顆粒軟骨加NBCA結合3D打印技術輔助制作耳支架的實驗研究.pdf

1、目的:本研究使用顆粒軟骨加NBCA(α-氰基丙烯酸正丁酯)結合3D打印技術輔助制作耳支架，再將制作好的耳支架植入新西蘭大白兔背部，觀察耳支架的形狀及存活情況，探討顆粒軟骨加α-氰基丙烯酸正丁酯結合3D打印技術輔助制作耳支架的可行性，進而為將來軟骨3D打印耳支架提供一定的理論和實驗基礎。
　　方法:首先任意選取2015年7月至2015年8月期間于湖南省人民醫(yī)院整形美容外科就診的耳畸形病人一名，利用三維CT掃描，獲取患者健側耳廓的數(shù)字

2、化模型，將其轉化為對側耳廓模型后，根據(jù)該模型打印PLA耳支架模型，模型可分為陽模和陰模兩種，陽模是真實比例的耳廓支架模型，陰模里面是空的，這個空間恰好是一個耳廓支架的形狀。于新西蘭大白兔背部置入皮膚擴張器行皮膚擴張，4周后，得到擴張皮瓣。取兔耳軟骨，剪碎成顆粒狀，將顆粒軟骨放入陰模中，使之充分與陰模嵌合，軟骨顆粒之間用α-氰基丙烯酸正丁酯粘連，這樣碎軟骨就構建了一個耳支架，然后對照陽模進行微調(diào)，約半小時后耳軟骨穩(wěn)固成形。測量其長度、寬度

3、、高度及重量后將其植入新西蘭大白兔背部擴張皮瓣下方，再造耳廓成形。動態(tài)觀察再造耳廓的形態(tài)，于術后4周、8周、12周分批取出耳支架，測量耳支架的長度、寬度、高度及重量，分別與術前進行比較，同時進行常規(guī)組織病理學檢測觀察顆粒軟骨的組織學變化，并采用免疫組織化學染色檢測軟骨細胞Ⅱ型膠原的表達，進一步分析軟骨細胞的存活狀況。
　　結果:支架植入后即刻，大體觀察耳廓形態(tài)良好，輪廓清晰，耳輪、對耳輪及其上下腳明顯，耳舟、三角窩清晰，凹凸分明。

4、術后第3天，組織水腫明顯，支架輪廓逐漸模糊，對耳輪上下腳逐漸顯示不清，耳舟、三角窩凹陷變淺，術后第7天拔出負壓引流管，組織持續(xù)水腫，耳支架輪廓模糊。術后4周，組織水腫逐漸消退，耳支架輪廓逐漸顯現(xiàn)，至術后第8周時，耳支架輪廓清晰可見，耳輪、對耳輪及其上下腳明顯，耳舟、三角窩清晰。術后12周，耳支架輪廓清晰，耳輪出現(xiàn)輕微變形，對耳輪及其上下腳明顯，耳舟、三角窩凹陷存在。術后4周、8周、12周分批取出耳支架，測量其長度、寬度、高度及重量，與植

5、入前支架比較，長度、寬度、高度差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05);重量差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)。組織病理學檢測發(fā)現(xiàn)，隨著植入時間的延長，軟骨膜內(nèi)新生軟骨細胞逐漸增多，體積逐漸增大，成熟軟骨細胞逐漸增多。軟骨碎片之間的α-氰基丙烯酸正丁酯未見明顯分解，絕大部分軟骨片之間仍被α-氰基丙烯酸正丁酯間隔，少部分軟骨片之間有纖維連接形成，隨著植入時間延長，軟骨片之間的連接有增多的趨勢。軟骨Ⅱ型膠原免疫組織化學染色結果發(fā)現(xiàn)，術后4周，Ⅱ型膠原

6、染色弱陽性。術后8周，Ⅱ型膠原染色弱陽性。術后12周，Ⅱ型膠原染色陽性。術后4周、8周、12周IOD值差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)，說明隨著植入時間的延長，軟骨細胞Ⅱ型膠原表達逐漸增多。
　　結論:1.顆粒軟骨加α-氰基丙烯酸正丁酯結合3D打印模具可以制成三維立體的耳支架，并且保持特定的形態(tài)。
　　2.α-氰基丙烯酸正丁酯能有效連接顆粒軟骨，并且不影響軟骨細胞的存活。
　　3.以顆粒軟骨加組織粘合劑結合3D打印模具