第一部分6-α乙基鵝去氧膽酸及其衍生物的設計與合成第二部分氯硝柳胺衍生物的設計與合成.pdf

1、第一部分：6-α乙基鵝去氧膽酸及其衍生物的設計與合成
　　6-α乙基鵝去氧膽酸(6-alpha ethyl chenodeoxycholic acid，6ECDCA)，又稱奧貝膽酸，為鵝去氧膽酸6-α乙基取代衍生物，是第一個進入臨床研究的法尼酯X受體（Farnesoid X receptor，F(xiàn)XR）選擇性激動劑，通過激活肝、腸、腎等組織的FXR,抑制膽汁酸的合成,增加胰島素的敏感性,調(diào)節(jié)脂肪代謝和血糖平衡。法尼酯X受體（FXR）

2、屬于核受體超家族成員，主要表達于肝臟、胃腸道及腎臟。作為一種膽汁酸受體，F(xiàn)XR通過調(diào)控一系列基因的表達，調(diào)節(jié)膽汁酸的合成、轉(zhuǎn)運和代謝，在膽汁酸及膽固醇的代謝過程中具有重要作用,成為重要的藥物靶點。作為FXR的特異性激動劑，6-α乙基鵝去氧膽酸胞外EC50為99nmol/L,胞內(nèi)EC50為85nmol/L，具有比FXR天然激動劑鵝去氧膽酸高約100倍的活性。臨床研究結(jié)果表明，奧貝膽酸對原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）和非酒精性脂肪性肝炎（NA

3、SH）均具有良好的治療作用。已獲得美國FDA治療伴隨肝纖維化的非酒精性脂肪性肝炎突破性療法和治療原發(fā)性膽汁性肝硬化患者的快速通道資格，同時在美國和歐洲獲得了治療PBC患者孤兒藥資格，用于治療那些對舊標準治療藥物熊去氧膽酸沒有充分應答或不能耐受的患者，有望取代熊去氧膽酸的治療地位，成為治療NASH和PBC的特效藥物，在肝病治療領域顯示出巨大的應用前景。
　　構(gòu)效關(guān)系分析表明，6-α乙基鵝去氧膽酸分子6位乙基和24位羧基是其活性的特異

4、性官能團。本課題在保持6位乙基和24位羧基的基礎上，對6-α乙基鵝去氧膽酸分子3位羥基進行衍生化改造，引入極性的氨基酸基團，以氨基甲酸酯鍵作為連接子，利于肝酶的選擇性水解，提高藥物的肝靶向性，同時利用氨基酸的極性基團提高水溶性，改善藥代動力學性質(zhì)。在此基礎上，設計合成了6個氨基酸衍生物，利用1H-NMR及ESI-MS確證了化合物結(jié)構(gòu)。
　　首先，對陽性對照藥6-α乙基鵝去氧膽酸的合成工藝進行了優(yōu)化。文獻報道的6-α乙基鵝去氧膽酸合

5、成路線長，反應條件苛刻，需要低溫及無水無氧條件，總收率低，不易放大量合成制備。本文選擇鵝去氧膽酸為起始原料，經(jīng)過氧化、酯化、硅醚化、亞乙基化、還原、氫化，得到目標化合物。通過改進氧化劑類型及配比，改變24位羧基保護策略，摒棄苛刻的無水無氧條件，以及改善氫化條件等，對合成路線進行了優(yōu)化，提高了各步中間體收率，總產(chǎn)率達42％。可作為中試放大量合成路線的基礎。接著，以合成的6-α乙基鵝去氧膽酸為原料，對設計的氨基酸衍生物進行了合成及結(jié)構(gòu)確證，

6、相關(guān)化合物的活性正在測試中。
　　本論文以鵝去氧膽酸為原料，經(jīng)過一系列反應得到6-α乙基鵝去氧膽酸，然后以其為先導化合物，設計合成了6個氨基酸類衍生物，相關(guān)化合物的活性正在測試中。所有化合物化學結(jié)構(gòu)均通過MS和1H-NMR鑒定。
　　第二部分：氯硝柳胺衍生物的設計、合成與生物活性評價
　　氯硝柳胺又稱又名育米生、滅絳靈、百螺殺等，臨床上用于治療腸道寄生蟲感染，對多種絳蟲有效。近年來通過多種高通量篩選研究表明氯硝柳胺是一

7、種具有潛在抗腫瘤作用的藥物。氯硝柳胺通過抑制Wnt/β-catenin,mTORC1，STAT3，NF-kB,ROS和Notch等信號通路，靶向腫瘤細胞中的線粒體細胞誘導細胞周期阻滯、生長抑制，細胞凋亡。許多體外和體內(nèi)實驗研究都表明了氯硝柳胺的抗腫瘤活性，對腫瘤干細胞的抑制作用讓氯硝柳胺成為治療腫瘤的潛在藥物。
　　體外細胞實驗和動物體內(nèi)實驗都證明了氯硝柳胺可以抑制不同腫瘤細胞的增殖、轉(zhuǎn)移、侵襲浸潤能力，并且促進腫瘤細胞的凋亡等，

8、從而發(fā)揮出抗腫瘤細胞的活性。這些特性使氯硝柳胺很有可能會成為有效的抗腫瘤物運用于臨床實踐中。
　　由氯硝柳胺水溶性較差，于其過低的水溶性導致其體內(nèi)生物利用度偏低，在SD大鼠中口服生物利用度只有10%左右，成藥性差，比較低的口服生物利用度和比較差的水溶性降低了氯硝柳胺在臨床應用中的抗腫瘤效果。但是對其進行適當?shù)幕瘜W修飾，可顯著改善其水溶性，提高其在體內(nèi)的生物利用度。因此，氯硝柳胺具有成為新的天然來源藥物活性先導物研究潛力。
　

9、　本課題主要對氯硝柳胺2位羥基進行衍生化改造，引入特異性而且能夠提高其水溶性的極性基團，來提高其特異性的生物利用度，同時提高其在水中的溶解性，改善氯硝柳胺在人體內(nèi)的藥代動力學性質(zhì)。引入各種不同的脂肪鏈羧基基團以或脂肪鏈氨基基團或肟基基團，通過醚鍵與氯硝柳胺的2位羥基偶聯(lián)，來改善其水溶性和體內(nèi)藥代動力學特性。
　　本論文以氯硝柳胺為原料，共設計合成了三大類15個衍生物，其中羧酸類衍生物7個，氨基類衍生物4個，肟類衍生物4個，有關(guān)化合