簡介：2008年生物化學與分子生物學考博試題一名詞解釋密碼子的變偶性程序性死亡岡崎片斷單克隆抗體基因治療SD序列移碼突變Z型DNA蛋白質(zhì)組學反向PCR二大題簡述真核生物5’帽子結(jié)構(gòu)和功能。簡述NO作為信號分子的調(diào)節(jié)作用。運用你所學的知識和可能的實驗經(jīng)驗，研究一個新基因的生理功能。已知A和B蛋白質(zhì)作用于同一生理功能，至少用三種方法證明A和B之間有無相互作用，并給出所用原理。結(jié)合當前科學前沿，闡述真核生物基因表達調(diào)控。0808中科院分子生物學試題中科院分子生物學試題1、表觀遺傳，及調(diào)控方式，還有蛋白質(zhì)通過哪些共價修飾調(diào)控其功能2、蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的方法和比較，EMSA和DNASE1足跡法3、密碼子改造研究新蛋白藥物，原理，關鍵和方法4、設計研究未知基因（預測兩個跨膜區(qū)域）功能的實驗方案（不低于4個）5、質(zhì)粒改造原則6、誘導全能干細胞的方法，實驗方案等。（去年的NATURE上發(fā)表的）個人認為除了第二和五題之外，其它的題目都屬于一騎絕塵的，要么會，要么不會，想蒙是絕對沒門的。這門專業(yè)課能及格，我想都不錯了，特別是1，3，6題。不知道大家做的如何，反正第一題，我是意思都沒看懂，不知道連續(xù)的3問是不是指1個東西。還是最后1問是單獨的，與前面的2問無關20082008年中科院動物所生物化學與分子生物學年中科院動物所生物化學與分子生物學博士題博士題一名詞解釋密碼子的變偶性程序性死亡岡崎片斷單克隆抗體基因治療SD序列移碼突變Z型DNA蛋白質(zhì)組學反向PCR二大題簡述真核生物5’帽子結(jié)構(gòu)和功能。簡述NO作為信號分子的調(diào)節(jié)作用。運用你所學的知識和可能的實驗經(jīng)驗，研究一個新基因的生理功能。已知A和B蛋白質(zhì)作用于同一生理功能，至少用三種方法證明A和B之間有無相互作用，三、哺乳動物生殖細胞（配子）發(fā)生為例，簡述減數(shù)分裂異同點（18分）四、詳述造血干細胞的增殖分化的調(diào)節(jié)（18分）五、解釋題（請選擇10個小題，每題3分，共30分）1、整合素2、信號肽3、奢侈基因4、PCR技術5、MAPK信號通路6、巨大染色體7、鈣泵8、通訊連接9、細胞分化10、細胞周期11、溶酶體12、MPF13、基因組14、核仁組織區(qū)15、G0期細胞中科院動物所2002年細胞生物學（博士）名詞解釋（每題3分，共36分）1、細胞周期2、細胞分化3、干細胞4、細胞外基質(zhì)5、上皮6、信號傳導7、轉(zhuǎn)染8、端粒9、免疫球蛋白10、細胞骨架11、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)12、反意義RNA

簡介：1第二章第二章染色體與染色體與DNA1染色體（染色體（CHROMOSOME）是細胞在有絲分裂時遺傳物質(zhì)存在的特定形式，是間期細胞染色質(zhì)結(jié)構(gòu)緊密包裝的結(jié)果。真核生物的染色體在細胞生活周期的大部分時間里都是以染色質(zhì)染色質(zhì)CHROMATIN的形式存在的。染色質(zhì)是一種纖維狀結(jié)構(gòu)，叫做染色質(zhì)絲，它是由最基本的單位核小體核小體NUCLEOSOME成串排列而成的。原核生物原核生物PROKARYOTEDNA形成一系列的環(huán)狀附著在非組蛋白上形成類核。DNA染色體非組蛋白蛋白質(zhì)組蛋白（H1,H2A,H2B,H3,H4）組蛋白的一般特性組蛋白的一般特性P24①進化上的保守性②無組織特異性③肽鏈氨基酸分布的不對稱性堿性氨基酸集中分布在N端的半條鏈上。④組蛋白的可修飾性甲基化、乙基化、磷酸化及ADP核糖基化等。⑤H5組蛋白的特殊性富含賴氨酸（24）鳥類、魚類及兩棲類紅細胞染色體不含H1而帶有H5組蛋白的可修飾性組蛋白的可修飾性在細胞周期特定時間可發(fā)生甲基化、乙?；⒘姿峄虯DP核糖基化等。H3、H4修飾作用較普遍，H2B有乙?；饔谩1有磷酸化作用。所有這些修飾作用都有一個共同的特點，即降低組蛋白所攜帶的正電荷。這些組蛋白修飾的意義一是改變?nèi)旧w的結(jié)構(gòu)，直接影響轉(zhuǎn)錄活性；二是核小體表面發(fā)生改變，使其他調(diào)控蛋白易于和染色質(zhì)相互接觸，從而間接影響轉(zhuǎn)錄活性。2、DNA1DNA的變性和復性■變性（變性（DENATURATIONDNA雙鏈的氫鍵斷裂，最后完全變成單鏈的過程稱為變性?！鲈錾錾狧YPERCHROMATICEFFECT在變性過程中，260NM紫外線吸收值先緩慢上升，當達到某一溫度時驟然上升，稱為增色效應?！鋈诮鉁囟龋ㄈ诮鉁囟龋∕ELTINGTEMPERATURE，TM變性過程紫外線吸收值增加的中點稱為融解溫度。生理條件下為8595℃影響因素GC含量，PH值，離子強度，尿素，甲酰胺等■復性（復性（RENATURATION熱變性的DNA緩慢冷卻，單鏈恢復成雙鏈?！鰷p色效應（減色效應（HYPOCHROMATICEFFECT隨著DNA的復性，260NM紫外線吸收值降低的現(xiàn)象。2C值反常現(xiàn)象（CVALUEPARADOXC值是一種生物的單倍體基因組DNA的總量。真核細胞基因組的最大特點是它含有大量的重復序列，而且功能DNA序列大多被不編碼蛋白質(zhì)的非功能DNA所隔開，這就是著名的“C值反?，F(xiàn)象”。核小體核小體NUCLEOSOME用于包裝染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)單位，是由DNA鏈纏繞一個組蛋白核（H2A、H2B、H3、H42的八聚體】構(gòu)成的。原核生物原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點●基因組很小，大多只有一條染色體●結(jié)構(gòu)簡煉●存在轉(zhuǎn)錄單元TRNASCRIPTIONALOPERON●多順反子POLYCISTRON重疊基因由基因內(nèi)基因、部分重疊基因、一個堿基重疊組成。真核生物真核生物基因組結(jié)構(gòu)特點●真核基因組結(jié)構(gòu)龐大3109BP、染色質(zhì)、核膜●單順反子●基因不連續(xù)性斷裂基因（INTERRUPTEDGENE）、內(nèi)含子INTRON、外顯子EXON●非編碼區(qū)較多多于編碼序列91●含有大量重復序列■不重復序列不重復序列/單一序列單一序列在基因組中有一個或幾個拷貝。真核生物的大多數(shù)基因在單倍體中都是單拷貝的。如蛋清蛋白、血紅蛋白等功能主要是編碼蛋白質(zhì)。■中度重復序列中度重復序列在基因組中的拷貝數(shù)為101～104。如RRNA、TRNA一般是不編碼蛋白質(zhì)的序列，在調(diào)控基因表達中起重要作用■高度重復序列高度重復序列拷貝數(shù)達到幾百個到幾百萬個?！裥l(wèi)星DNAA?T含量很高的簡單高度重復序列。1、DNA的一級結(jié)構(gòu)的一級結(jié)構(gòu)指4種脫氧核苷酸的連接及其排列順序，DNA序列是這一概念的簡稱。堿基序列特征●雙鏈反向平行配對而成●脫氧核糖和磷酸交替連接，構(gòu)成DNA骨架，堿基排在內(nèi)側(cè)核小體3方向相反，形成許多不連續(xù)的片段，最后再連成一條完整的DNA鏈為滯后鏈。在DNA復制過程中，前導鏈能連續(xù)合成，而滯后鏈只能是斷續(xù)的合成5??3?的多個短片段，這些不連續(xù)的小片段稱為岡崎片段。4、切除RNA引物，填補缺口，連接相鄰的DNA片段（復制終止）當復制叉遇到約22個堿基的重復性終止子序列（TER）時，TERTUS蛋白復合物能使DNAB不再將DNA解鏈，阻擋復制叉繼續(xù)前移。P47在DNA聚合酶Ⅰ催化下切除RNA引物；留下的空隙由DNA聚合酶Ⅰ催化合成一段DNA填補上；在DNA連接酶作用下，連接相鄰的DNA鏈（四）復制的幾種主要方式P42雙鏈環(huán)狀、Θ型復制、雙向等速1、滾環(huán)型滾環(huán)型（1）模板鏈和新合成的鏈分開（2）不需RNA引物，在正鏈3‘－OH上延伸（3）只有一個復制叉2、D環(huán)復制環(huán)復制單向復制的特殊方式如動物線粒體DNA（五）真核生物中DNA的復制特點1、真核生物每條染色體上有多個復制起點，多復制子（約150BP左右）；2、復制叉移動的速度較慢（約50BP／秒），僅為原核生物的1／10。3、真核生物染色體在全部復制完之前,各個起始點不再重新開始DNA復制；真核生物快速生長時，往往采用更多的復制起點。4、真核生物有多種DNA聚合酶。5、真核生物DNA復制過程中的引物及岡崎片段的長度均小于原核生物。（真核岡崎片段長約100200BP，原核岡崎片段長約10002000BP。）（六）原核和真核生物原核和真核生物DNA的復制特點比較的復制特點比較①復制起點（ORI）原核一個，真核多個；②復制子原核一個，真核多個；③復制子長度原核長；真核短；④復制叉原核多個；真核多個；⑤復制移動速度原核較快；真核較慢；⑥真核生物染色體在全部完成復制前，各起始點的DNA復制不能再開始。而在快速生長的原核生物中，復制起點上可以連續(xù)開始新的DNA復制。⑦原核生物染色體的復制與細胞分裂同步，可以多次復制；真核生物染色體的復制發(fā)生在S期，是細胞分類的特定時期，而且僅此一次。四、DNA的修復DNA修復系統(tǒng)功能錯配修復恢復錯配堿基切除修復切除突變的堿基核甘酸切除修復修復被破壞的DNADNA直接修復SOS系統(tǒng)修復嘧啶二體或甲基化DNADNA的修復，導致變異1、錯配修復錯配修復（MISMATCHREPAIR）●DAM甲基化酶使母鏈位于5’GATC序列中腺甘酸甲基化●甲基化緊隨在DNA復制之后進行（幾秒種后至幾分鐘內(nèi)）●根據(jù)復制叉上DNA甲基化程度，切除尚未甲基化的子鏈上的錯配堿基2、堿基切除修復堿基切除修復EXCISIONREPAIR所有細胞中都帶有不同類型、能識別受損核苷酸位點的糖苷水解酶，它能特意切除受損核苷酸上的NΒ糖苷鍵，在DNA鏈上形成去嘌呤或去嘧啶位點，統(tǒng)稱為AP位點。一些堿基在自發(fā)或誘變下會發(fā)生脫酰胺，然后改變配對性質(zhì)，造成氨基轉(zhuǎn)換突變腺嘌呤變?yōu)榇吸S嘌呤與胞嘧啶配對鳥嘌呤變?yōu)辄S嘌呤與胞嘧啶配對胞嘧啶變?yōu)槟蜞奏づc腺嘌呤配對3、核苷酸切除修復核苷酸切除修復1）通過特異的核酸內(nèi)切酶識別損傷部位2）由酶的復合物在損傷的兩邊切除幾個核苷酸3）DNA聚合酶以母鏈為模板復制合成新子鏈4）DNA連接酶將切口補平4、DNA的直接修復的直接修復在DNA光解酶的作用下將環(huán)丁烷胸腺嘧啶二體和64光化物還原成為單體甲基轉(zhuǎn)移酶使O6甲基鳥嘌呤脫甲基生成鳥嘌呤，防止GT配對SOS反應SOSRESPONSE是細胞DNA受到損傷或復制系統(tǒng)受到抑制的緊急情況下，細胞為求生存而產(chǎn)生的一種應急措施。包括誘導DNA損傷修復、誘變效應、細胞分裂的抑制以及溶原性細菌釋放噬菌體等。細胞癌變也與SOS反應有關。兩個作用（1）DNA的修復；（2）產(chǎn)

簡介：藥學分子生物學藥學分子生物學交卷時間20170709151524一、單選題12分核酸變性后可發(fā)生哪種效應（）?A減色效應?B增色效應?C失去對紫外線的吸收能力?D最大吸收峰波長發(fā)生轉(zhuǎn)移?E最小吸收峰波長發(fā)生轉(zhuǎn)移糾錯得分0知識點藥學分子生物學收起解析答案B解析22分真核生物的延伸因子是（）?AEFTU?BEFTS?CEFG?DEEF1?EEEF3糾錯得分0知識點藥學分子生物學52分利用限制性核酸內(nèi)切酶酶切時切斷的是（）?A氫鍵?B磷酸二酯鍵?C配位鍵?D離子鍵?E疏水作用糾錯得分0知識點藥學分子生物學收起解析答案B解析62分TRNA分子上結(jié)合氨基酸的序列是（）?ACAA3′?BCCA3′?CAAC3′?DACA3′?ECCA5′糾錯得分0知識點藥學分子生物學收起解析答案B解析72分氨基酸活化酶（）

簡介：生物秀考研頻道生物秀考研頻道您的考研助手您的考研助手HTTP//WWWBBIOOCOM/KY/生物秀下載平臺專業(yè)生物資源下載平臺HTTP//WWWBBIOOCOM/SOFT/1第二章第二章DNA與染色體與染色體一、填空題一、填空題1．病毒Φ．病毒ΦX174及M13的遺傳物質(zhì)都是的遺傳物質(zhì)都是單鏈單鏈DNA。2．AIDS病毒的遺傳物質(zhì)是病毒的遺傳物質(zhì)是單鏈單鏈RNA。3．X射線分析證明一個完整的射線分析證明一個完整的DNA螺旋延伸長度為螺旋延伸長度為34NM。4．．氫氫鍵負責維持鍵負責維持A-T間（或間（或G-C間）的親和力間）的親和力5．天然存在的．天然存在的DNA分子形式為右手分子形式為右手B型螺旋。型螺旋。二、選擇題（單選或多選）二、選擇題（單選或多選）1．證明．證明DNA是遺傳物質(zhì)的兩個關鍵性實驗是是遺傳物質(zhì)的兩個關鍵性實驗是肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性和T2噬菌體感染大腸噬菌體感染大腸桿菌。這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是桿菌。這兩個實驗中主要的論點證據(jù)是（C）。）。A．從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到．從被感染的生物體內(nèi)重新分離得到DNA作為疾病的致病劑作為疾病的致病劑B．DNA突變導致毒性喪失突變導致毒性喪失C．生物體吸收的外源．生物體吸收的外源DNA（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能（而并非蛋白質(zhì)）改變了其遺傳潛能D．DNA是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子是不能在生物體間轉(zhuǎn)移的，因此它一定是一種非常保守的分子E．真核心生物、原核生物、病毒的．真核心生物、原核生物、病毒的DNA能相互混合并彼此替代能相互混合并彼此替代2．1953年WATSON和CRICK提出（提出（A）。）。A．多核苷酸．多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋B．DNA的復制是半保留的，常常形成親本的復制是半保留的，常常形成親本-子代雙螺旋雜合鏈子代雙螺旋雜合鏈C．三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼．三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼D．遺傳物質(zhì)通常是．遺傳物質(zhì)通常是DNA而非而非RNAE．分離到回復突變體證明這一突變并非是一個缺失突變．分離到回復突變體證明這一突變并非是一個缺失突變3．DNA雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。雙螺旋的解鏈或變性打斷了互補堿基間的氫鍵，并因此改變了它們的光吸收特性。以下哪以下哪些是對些是對DNA的解鏈溫度的的解鏈溫度的正確描述（正確描述（C、D）A．哺乳動物．哺乳動物DNA約為約為45℃，因此發(fā)燒時體溫高于℃，因此發(fā)燒時體溫高于42℃是十分危險的℃是十分危險的B．依賴于．依賴于A-T含量，因為含量，因為A-T含量越高則雙鏈分開所需要的能量越少含量越高則雙鏈分開所需要的能量越少C．是雙鏈．是雙鏈DNA中兩條單鏈分開過程中溫度變化范圍的中間值中兩條單鏈分開過程中溫度變化范圍的中間值D．可通過堿基在．可通過堿基在260NM的特征吸收峰的改變來確定的特征吸收峰的改變來確定E．就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時的溫度．就是單鏈發(fā)生斷裂（磷酸二酯鍵斷裂）時的溫度生物秀考研頻道生物秀考研頻道您的考研助手您的考研助手HTTP//WWWBBIOOCOM/KY/生物秀下載平臺專業(yè)生物資源下載平臺HTTP//WWWBBIOOCOM/SOFT/3A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍F．10000倍11．DNA在中期染色體中壓縮多少倍在中期染色體中壓縮多少倍（F）A．6倍B．10倍C．40倍D．240倍E．1000倍F．10000倍12．分裂間期的早期，．分裂間期的早期，DNA處于（處于（A）狀態(tài)。）狀態(tài)。A．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子B．半保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．半保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C．保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D．單鏈．單鏈DNAE．以上都不正確．以上都不正確13．分裂間期．分裂間期S期，期，DNA處于（處于（B）狀態(tài)。）狀態(tài)。A．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子．單體連續(xù)的線性雙螺旋分子B．半保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．半保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)C．保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)．保留復制的雙螺旋結(jié)構(gòu)D．單鏈．單鏈DNAE．以上都不正確．以上都不正確14．當一個基因具有活性時（．當一個基因具有活性時（A、C）。）。A．啟動子一般是不帶有核小體的．啟動子一般是不帶有核小體的B．整個基因一般是不帶有核小體的．整個基因一般是不帶有核小體的C．基因被核小體遮蓋，但染色質(zhì)結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變以至于整個基因?qū)怂崦附到飧用舾校虮缓诵◇w遮蓋，但染色質(zhì)結(jié)構(gòu)已發(fā)生改變以至于整個基因?qū)怂崦附到飧用舾腥?、判斷題三、判斷題1．在高鹽和低溫條件下由在高鹽和低溫條件下由DNA單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補性，單鏈雜交形成的雙螺旋表現(xiàn)出幾乎完全的互補性，這一過程可看作這一過程可看作是一個復性（退火）反應。是一個復性（退火）反應。（錯誤錯誤）2．單個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接到．單個核苷酸通過磷酸二酯鍵連接到DNA骨架上。骨架上。正確正確3．DNA分子整體都具有強的負電性分子整體都具有強的負電性，因此沒有極性，因此沒有極性。。（錯誤錯誤）4．在核酸雙螺旋（如．在核酸雙螺旋（如DNA）中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序）中形成發(fā)夾環(huán)結(jié)構(gòu)的頻率比單鏈分子低。發(fā)夾結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生需要回文序列使雙鏈形成對稱的發(fā)夾，呈十字結(jié)構(gòu)列使雙鏈形成對稱的發(fā)夾，呈十字結(jié)構(gòu)。正確正確5．．病毒的遺傳因子可包括病毒的遺傳因子可包括1-300個基因。個基因。與生命有機體不同，與生命有機體不同，病毒的遺傳因子可能是病毒的遺傳因子可能是DNA或RNA，，（但不可能同時兼有）因此（但不可能同時兼有）因此DNA不是完全通用的遺傳物質(zhì)。不是完全通用的遺傳物質(zhì)。正確正確6．一段長度．一段長度100BP的DNA，具有，具有4100種可能的序列組合形式。種可能的序列組合形式。正確正確7．C0T1/2與基因組大小相關。與基因組大小相關。正確正確8．C0T1/2與基因組復雜性相關。與基因組復雜性相關。正確正確9．非組蛋白染色體蛋白負責．非組蛋白染色體蛋白負責30NM纖絲高度有序的壓縮。纖絲高度有序的壓縮。正確正確10．．因為組蛋白因為組蛋白H4在所有物種中都是一樣的，在所有物種中都是一樣的，可以預期該蛋白質(zhì)基因在不同物種中也是一樣的。（可以預期該蛋白質(zhì)基因在不同物種中也是一樣的。（錯錯誤）（不同物種組蛋白）（不同物種組蛋白H4基因的核苷酸序列變化很大基因的核苷酸序列變化很大，），）

簡介：生物化學與分子生物學重點生物化學與分子生物學重點11BIOXCN20061113234437來源綠色生命網(wǎng)第一章緒論一、生物化學的的概念生物化學（BIOCHEMISTRY是利用化學的原理與方法去探討生命的一門科學，它是介于化學、生物學及物理學之間的一門邊緣學科。二、生物化學的發(fā)展1．敘述生物化學階段是生物化學發(fā)展的萌芽階段，其主要的工作是分析和研究生物體的組成成分以及生物體的分泌物和排泄物。2．動態(tài)生物化學階段是生物化學蓬勃發(fā)展的時期。就在這一時期，人們基本上弄清了生物體內(nèi)各種主要化學物質(zhì)的代謝途徑。3．分子生物學階段這一階段的主要研究工作就是探討各種生物大分子的結(jié)構(gòu)與其功能之間的關系。三、生物化學研究的主要方面1．生物體的物質(zhì)組成高等生物體主要由蛋白質(zhì)、核酸、糖類、脂類以及水、無機鹽等組成，此外還含有一些低分子物質(zhì)。2．物質(zhì)代謝物質(zhì)代謝的基本過程主要包括三大步驟消化、吸收→中間代謝→排泄。其中，中間代謝過程是在細胞內(nèi)進行的，最為復雜的化學變化過程，它包括合成代謝，分解代謝，物質(zhì)互變，代謝調(diào)控，能量代謝幾方面的內(nèi)容。3．細胞信號轉(zhuǎn)導細胞內(nèi)存在多條信號轉(zhuǎn)導途徑，而這些途徑之間通過一定的方式方式相互交織在一起，從而構(gòu)成了非常復雜的信號轉(zhuǎn)導網(wǎng)絡，調(diào)控細胞的代謝、生理活動及生長分化。4．生物分子的結(jié)構(gòu)與功能通過對生物大分子結(jié)構(gòu)的理解，揭示結(jié)構(gòu)與功能之間的關系。5．遺傳與繁殖對生物體遺傳與繁殖的分子機制的研究，也是現(xiàn)代生物化學與分子生物學研究的NH形成鏈間氫鍵；③側(cè)鏈基團分別交替位于片層的上、下方。⑶Β轉(zhuǎn)角多肽鏈180°回折部分，通常由四個氨基酸殘基構(gòu)成，借1、4殘基之間形成氫鍵維系。⑷無規(guī)卷曲主鏈骨架無規(guī)律盤繞的部分。3．三級結(jié)構(gòu)指多肽鏈所有原子的空間排布。其維系鍵主要是非共價鍵（次級鍵）氫鍵、疏水鍵、范德華力、離子鍵等，也可涉及二硫鍵。4．四級結(jié)構(gòu)指亞基之間的立體排布、接觸部位的布局等，其維系鍵為非共價鍵。亞基是指參與構(gòu)成蛋白質(zhì)四級結(jié)構(gòu)的而又具有獨立三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈。五、蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)1．兩性解離與等電點蛋白質(zhì)分子中仍然存在游離的氨基和游離的羧基，因此蛋白質(zhì)與氨基酸一樣具有兩性解離的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子所帶正、負電荷相等時溶液的PH值稱為蛋白質(zhì)的等電點。2．蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)蛋白質(zhì)具有親水溶膠的性質(zhì)。蛋白質(zhì)分子表面的水化膜和表面電荷是穩(wěn)定蛋白質(zhì)親水溶膠的兩個重要因素。3．蛋白質(zhì)的紫外吸收蛋白質(zhì)分子中的色氨酸、酪氨酸和苯丙氨酸殘基對紫外光有吸收，以色氨酸吸收最強，最大吸收峰為280NM。4．蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)在某些理化因素的作用下，其特定的空間結(jié)構(gòu)被破壞而導致其理化性質(zhì)改變及生物活性喪失，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性。引起蛋白質(zhì)變性的因素有高溫、高壓、電離輻射、超聲波、紫外線及有機溶劑、重金屬鹽、強酸強堿等。絕大多數(shù)蛋白質(zhì)分子的變性是不可逆的。六、蛋白質(zhì)的分離與純化1．鹽析與有機溶劑沉淀在蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽，以破壞蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)，使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀析出，稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、氯化鈉、硫酸鈉等。鹽析時，溶液的PH在蛋白質(zhì)的等電點處效果最好。凡能與水以任意比例混合的有機溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白質(zhì)沉淀。2．電泳蛋白質(zhì)分子在高于或低于其PI的溶液中帶凈的負或正電荷，因此在電場中可以移動。電泳遷移率的大小主要取決于蛋白質(zhì)分子所帶電荷量以及分子大小。

簡介：點擊查看更多黃渤海中華哲水蚤現(xiàn)場食物的分子生物學分析方法及應用精彩內(nèi)容。

簡介：中圖分類號中圖分類號Q946單位代碼單位代碼10231學號號42009732轉(zhuǎn)IL4基因番茄（基因番茄（LYCOPERSIONESCULENTUMMILL）后代分子生物學檢測及其生理特性的研究學科專業(yè)植物學研究方向植物分子生物學作者姓名張鵬指導教師朱宏教授于麗杰教授哈爾濱師范大學二〇一二年六月ATHESISSUBMITTEDFORTHEDEGREEOFMASTERMOLECULARBIOLOGYDETECTIONANDPHYSIOLOGICALCHARACTERISTICSOFTRANSGENICTOMATOWITHINTERLEUKIN4GENECANDIDATEZHANGPENGSUPERVISORPROFZHUHONGPROFYULIJIESPECIALITYBOTANYDATEOFDEFENCEJUNE,2012DEGREECONFERRINGINSTITUTIONHARBINNORMALUNIVERSITY

簡介：中國醫(yī)科大學碩士學位論文腺病毒載體介導共刺激分子B71基因?qū)和文讣毎鲶w外生物學特性的影響姓名王斌申請學位級別碩士專業(yè)小兒外科指導教師劉磊20070401中文論著摘要腺病毒載體介導共刺激分子B7．1基因?qū)和文讣毎鲶w外生物學特性的影響實驗背景和目的人體的抗腫瘤免疫以T細胞介導的細胞免疫為主，T細胞的活化需雙信號刺激第一信號由T細胞抗原受體TCR與抗原提呈細胞APC上的抗原肽MHC分子復合物結(jié)合提供，第二信號由APC上的共刺激分子與T細胞上的相應配體結(jié)合提供。只有雙信號共同刺激才能有效激活特異性的T細胞，缺乏第二信號造成T細胞克隆凋亡，使腫瘤細胞產(chǎn)生免疫逃避。APC上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B7．1分子是重要的粘附分子。肝母細胞瘤被認為是一種弱免疫原性的惡性腫瘤，腫瘤細胞表面缺乏足夠的可以與淋巴細胞表面結(jié)合的配體，主要是指B7一ICD80和B72CD86，其中缺乏B7．1分子的表達是其無法提供第二信號的重要原因。我們希望通過基因轉(zhuǎn)染的技術手段達到提高肝母細胞瘤細胞表面的B7．1分子抗體表達水平，恢復其傳導第二信號刺激的能力，從而誘導特異性抗腫瘤免疫反應的目的。為此，我們進行了以下的實驗研究。1．檢測肝母細胞瘤細胞中B7．1分子的表達水平。2通過含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染肝母細胞瘤細胞株，建立B7．1分子高表達的陽性克隆。3．觀察轉(zhuǎn)染后腫瘤細胞B7．1分子的表達水平及細胞生物學特性的變化4．觀察轉(zhuǎn)染含HB7．1基因的瘤苗對T淋巴細胞增殖的影響。實驗方法通過含HB7．1基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)入HEPG2細胞，流式細胞儀FCM檢測HEPG2和HEPG2／HB7．1細胞表面BT1分子的表達水平。觀察HEPG2和HEPG2／B_B7．1細胞的生長曲線。用混合淋巴細胞培養(yǎng)法檢測瘤苗對T淋巴細胞增

簡介：山東大學碩士學位論文新型免疫分子TIM4對小鼠巨噬細胞系RAW2647生物學活性的影響姓名續(xù)力云申請學位級別碩士專業(yè)醫(yī)學免疫學指導教師高立芬20080512山東大學碩士學位論文RPM，REVOLUTIONAPERMINUTE，每分轉(zhuǎn)數(shù)RT．PCR，REVERSETRANSCRIPTIONPCR，逆轉(zhuǎn)錄PCRS，SECOND，秒TNF．A，TUMORNECROSISFACTORALPHA，腫瘤壞死因子噸TIM，TCELLIMMUNOGLOBULINDOMAINANDMUCINDOMAINPROTEIN，T細胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白TIM4，TCELLIMMUNOGLOBULINDOMAINANDMUCINDOMAINPROTEIN一4，T細胞免疫球蛋白域粘蛋白域蛋白48

簡介：新疆農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文58SRDNA和ITS序列同源性分析在酸馬奶酵母菌分子生物學鑒定中的應用姓名茍榮申請學位級別碩士專業(yè)動物遺傳育種與繁殖指導教師姚新奎20080601ABSTRACTINTHISTHESIS，THECATEGORYSTATUSOF6STRAINYEASTS，WHICHWEREISOLATEDFROMKOUMISSOF4DIFFERENTREGIONS，WASNOTDETERMINEDACCORDINGTOITSMORPHOLOGYANDBIOCHEMISTRY．GENOMEDNAWASEXTRACTEDANDUSEAPAIROFPRIMERS，NAMEDITS1ANDITS4AMPLIFY5．8SRRNAANDITSGENEFROMSTRAINSRESPECTIVELY．THEAMPLIFICATIONWASPURIFIEDANDCONNECTEDINTOTHEPMD19TVECTOR．AFTERCLONEANDIDENTIFICATION，DETERMINEDTHESEQUENCE．THENCOMPAREDTHESEQUENCESWEOBTAINEDWIMTHESEQUENCESINGENBANKDATABASEINORDERTOIDENTIFYTHESTRAINS．ANDPHYLOGENETICDENDROGRAMWEREESTABLISHED．COMBINEDWITHANALYSISOFTHEPHYOLGENETICTREEANDPARTIALSEQUENCESOF5．8SRDNAANDITS，Y12WASCLASSIFIEDASSACCHAROMYCESUNISPORUS．J14AND33WASCLASSIFIEDASKLUYVEROMYCESMARXIANUS．H19WASCLASSIFIEDASISSATCHENKIAORIENTALIS．30AND39WASCLASSIFIEDASCANDIDAETHANOLICA．THERESULTOFJ14WASASSAMEASTHATOF仃ADITIONALCLASSIFICATIONBEFORE．KEYWORDSKOUMISS；YEAST5．8SRDNAITS；HOMOLOGY；PHYLOGENETICDENDROGRAM

簡介：重慶醫(yī)科大學博士學位論文1輕度認知功能障礙與阿爾茨海默病臨床綜合性評價的對照研究2ALZHEIMER病大鼠腦內(nèi)突觸功能障礙分子生物學機制及干預的實驗研究姓名李強申請學位級別博士專業(yè)神經(jīng)病學指導教師胡長林20080501重慶醫(yī)科大學博士研究生學位論文PKCⅣ巳蛆KGADPHGVDACHACHRSERLTPCREBGSK313DHYZJGPROTEINKINASEC蛋白激酶CMITOGENACTIVATEDPROTEINKINASES促分裂素原活化蛋白激酶GLYCERALDEHYDE一3．PHOSPHATE甘油醛3一磷酸脫氫酶DEHYDROGENASEGRANULOVACUOLARDEGENERATIONACETYLCHOLINE空泡變性乙酰膽堿ACETYLCHOLINERECEPTOR乙酰膽堿受體SERINE絲氨酸LONGTERMPOTENTIATION長時程增強CAMPRESPONSEELEMENTBINDINGCAMPI應答元件結(jié)合GLYCOGENSYNTHASEKINASE一3PDIHUANGYIZHIJINGAO葡萄糖合成激酶．3D地黃益知浸膏RTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPOLYMERASE逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應CHAINREACTIONPSD．95GAP43POSTSYNAPTICDENSITY95突觸后致密物一95GROWTH．ASSOCIATEDPROTEIN．43生長相關蛋白43EGTAETHYLENEGGLYCOLBISN,N,N’，N’一7,醇雙四乙酸EDTAETHYLENEDIAMINEN，NTERTRAACETIC乙二胺四乙酸ODSDS強SDEPCPIPFAACIDOPTICALDENSITY光密度十二烷基磺酸鈉TRISHYDROXYMETHYLAMINOMETHANE三羥甲基氨基甲烷DIETHYLPROCARBONATE二乙基焦碳酸酯PROPIDIUMIODIDE碘化丙錠PARAFORMALDOHYDE多聚甲醛2

簡介：第二軍醫(yī)大學博士學位論文1抑制糖皮質(zhì)激素受體表達導致小鼠巨噬細胞系RAW2647增殖加快的分子機制2非基因毒應激對RHOB的誘導作用及其生物學意義姓名王曉慧申請學位級別博士專業(yè)病理學與病理生理學指導教師盧建20050501第二軍醫(yī)大學博J一學位論文1二曉慧DEXGCGRRHOBSⅡ沖CTLSHP．2MAPKDCCTNFANORNAISIRNAGREEDKCDⅪRAWGR一胄一舭VECTORABBREVIATJONSDEXAMETHASONEGLUCOCORTICOIDGLUCOCORTICOIDRECEPTORRASHOMOLOGBSIGNALREGULATINGPROTEINⅡ1SH2DMAINCONTAININGPROTEINPHOSPHASTASE2MITOGENACTIVEDPROTEINKINASEDEXTRANCOATEDCHARCOALTULTIORNECROSISFACTOR0【NITRICOXIDERNAINTERFEFENCESMALLINTERFERENCERNAGLUCOCORTIEOIDRESPONSEELEMENTCYCLINDEPENDENTKINASESCYCLINDEPENDENTKINASESINHIBITORTHERAW264．7CELLLINEWHICHSTABLYTRANSFECTEDWITHPSILENCER2．1一U6一GRSIRNAEXPRESSIONVECTORTHERAW264．7CELLLINEWHICHSTABLYTRANSFECTEDWITHBLANKPSILENCER2．1一U6EXPRESSIONVECTOR

簡介：中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士學位論文1基于靶酶結(jié)構(gòu)的HCVNS3解旋酶抑制劑的虛擬篩選及分子生物學活性評價2真菌039007代謝產(chǎn)物抗動脈粥樣硬化活性成分的提取分離姓名趙桂玉申請學位級別碩士專業(yè)微生物與生化藥學指導教師司書毅20070601中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士研究生學位論文英文縮略語LUCLUCIF打船EPBSPHOSPHATEBUFFERSALINEP雌RPEROXISOMEPROLIFERATORACTIVATEDRECEPTORRCTREVERSECHOLESTEROLTRANSPORTRNAMB伽UCLEICACIDRTPCRREVERSETRANSCRIPTIONPCRSRBISCAVENGERRECEPTORCLASSBTYPEISRBHSCAVENGERRECEPTORCLASSBTYPEIISREBP1STEROLREGULATORYELEMENTBINDINGPROTEINITCTOTALCHOLES幻ROLTGTRIGLYCERIDET墻TRIHYDROXYME也Y1鋤ILL咄TLL鋤E2螢火蟲熒光素酶磷酸鹽緩沖液過氧化酶體增殖型激活體受體膽固醇逆轉(zhuǎn)運核糖核酸逆轉(zhuǎn)錄．聚合酶鏈式反應清道夫受體B族I型清遵夫受體B族Ⅱ型固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白總膽固醇甘油三酯三羥甲基氨基甲烷

簡介：1分子生物學大實驗分子生物學大實驗目的基因的克隆及表達目的基因的克隆及表達第一節(jié)基因操作概述2一、聚合酶鏈式反應PCR2二、質(zhì)粒概述4三、凝膠電泳5四、大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備和轉(zhuǎn)化6五、重組質(zhì)粒的連接7六、限制性內(nèi)切酶消化7七、SDSPAGE蛋白質(zhì)電泳7第二節(jié)材料、設備及試劑7一、材料8二、設備8三、試劑9第三節(jié)操作步驟10一、目的基因的獲得10二、PET21BT（PET21BR、PET21B）載體的獲得11三、PET21B等與目的片段的連接作用12四、轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5Α進行陽性克隆子篩選與鑒定13五、轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21PLYST，搖菌進行SDSPAGE電泳。14六、融合蛋白的毒力測定16第四節(jié)本實驗的實驗報告1634、模板PCR反應必須以DNA為模板進行擴增，模板DNA可以是單鏈分子，也可以是雙鏈分子，可以是線狀分子，也可以是環(huán)狀分子線狀分子比環(huán)狀分子的擴增效果稍好。就模板DNA而言，影響PCR的主要因素是模板的數(shù)量和純度。一般反應中的模板數(shù)量為102～105個拷貝，對于單拷貝基因，這需要01ΜG的人基因組DNA，10NG的酵母DNA，1NG的大腸桿菌DNA。擴增多拷貝序列時，用量更少。靈敏的PCR可從一個細胞，一根頭發(fā)，一個孢子或一個精子提取的DNA中分析目的序列。模板量過多則可能增加非特異性產(chǎn)物。DNA中的雜質(zhì)也會影響PCR的效率。5、TAQDNA聚合酶一般TAQDNA聚合酶活性半衰期為925℃130MIN，95℃40MIN，97℃5MIN。現(xiàn)在人們又發(fā)現(xiàn)許多新的耐熱的DNA聚合酶，這些酶的活性在高溫下活性可維持更長時間。TAQDNA聚合酶的酶活性單位定義為74℃下，30MIN，摻入10NMOLLDNTP到核酸中所需的酶量。TAQDNA聚合酶的一個致命弱點是它的出錯率，一般PCR中出錯率為2104核苷酸每輪循環(huán)。在100ΜLPCR反應中，15～2單位的TAQDNA聚合酶就足以進行30輪循環(huán)。所用的酶量可根據(jù)DNA、引物及其它因素的變化進行適當?shù)脑鰷p。酶量過多會使產(chǎn)物非特異性增加，過少則使產(chǎn)量降低。6、反應緩沖液反應緩沖液一般含10～50MMOLLTRISCL20℃下PH83～88，50MMOLLKCL和適當濃度的MG2。TRISCL在20℃時PH為83～88，但在實際PCR反應中，PH為68～78。50MMOLL的KCL有利于引物的退火。另外，反應液可加入5MMOLL的二硫蘇糖醇DDT或100ΜGML的牛血清白蛋白BSA，它們可穩(wěn)定酶活性。（二）、PCR反應參數(shù)1、變性在第一輪循環(huán)前，在94℃下變性5～10MIN非常重要，它可使模板DNA完全解鏈，然后加入TAQDNA聚合酶HOTSTART，這樣可減少聚合酶在低溫下仍有活性從而延伸非特異性配對的引物與模板復合物所造成的錯誤。變性不完全，往往使PCR失敗，因為未變性完全的DNA雙鏈會很快復性，減少DNA產(chǎn)量。一般變性溫度與時間為94℃1MIN。在變性溫度下，雙鏈DNA解鏈只需幾秒鐘即可完全，所耗時間主要是為使反應體系完全達到適當?shù)臏囟取?、退火引物退火的溫度和所需時間的長短取決于引物的堿基組成，引物的長度、引物與模板的配對程度以及引物的濃度。實際使用的退火溫度比擴增引物的TM值約低5℃。一般當引物中GC含量高，長度長并與模板完全配對時，應提高退火溫度。退火溫度越高，所得產(chǎn)物的特異性越高。通常退火溫度和時間為37℃～55℃，1～2MIN。3、延伸延伸反應通常為72℃，接近于TAQDNA聚合酶的最適反應溫度75℃。實際

簡介：證明證明DNA是遺傳物質(zhì)的關鍵性實驗是（是遺傳物質(zhì)的關鍵性實驗是（AC）。）。A肺炎球菌在老鼠體內(nèi)的毒性BBDNA的X光衍射CT噬菌體感染大腸桿菌D孟德爾的豌豆雜交E摩爾根的果蠅連鎖遺傳試驗目前的中心法則所包含的遺傳信息傳遞包括（目前的中心法則所包含的遺傳信息傳遞包括（ADE）。）。ADNA到DNAB蛋白質(zhì)到RNACRNA到RNADRNA到DNAEDNA到RNA1953年WATSON和CRICK提出提出AA多核苷酸DNA鏈通過氫鍵連接成一個雙螺旋BDNA的復制是半保留的，常常形成親本子代雙螺旋雜合鏈C三個連續(xù)的核苷酸代表一個遺傳密碼D遺傳物質(zhì)通常是DNA而非RNAE遺傳信息的傳遞是從DNA到RNA組蛋白都含有大量的（組蛋白都含有大量的（C）。）。A精氨酸和組氨酸B組氨酸和賴氨酸C精氨酸和賴氨酸組蛋白的凈電荷是（組蛋白的凈電荷是（A）。）。A正B中性C負核小體是由（核小體是由（BCDE）各兩個分子生成的八聚體。）各兩個分子生成的八聚體。AH1BH2ACH2BDH3EH4GC含量越高含量越高TM值越高的原因是（值越高的原因是（B）。）。AGC之間形成共價鍵BGC之間形成三個氫鍵CGC之間形成離子鍵DGC易于甲基化DNA的復制（的復制（B）A包括一個雙螺旋中兩條子鏈的合成B遵循新的子鏈與其親本鏈相配對的原則C依賴于物種特異的遺傳密碼D可以從DNA鏈上的任何一個部位開始E是一個描述基因表達的過程一個復制子是一個復制子是CA細胞分裂期間復制產(chǎn)物被分離之后的DNA片段B復制的DNA片段和在此過程中所需的酶和蛋白C任何自發(fā)復制的DNA序列它與復制起始點相連D從起始密碼子到終止密碼子之間的DNA片段E復制起點和復制叉之間的DNA片段下列關于下列關于DNA復制的說法是正確的有（復制的說法是正確的有（DEF）A按全保留機制進行B接3’→5’方向進行C需要4種DNMP的參與D需要DNA連接酶的作用E涉及RNA引物的形成F需要DNA聚合酶Ⅰ滾環(huán)復制（滾環(huán)復制（D）A是細菌DNA的主要復制方式B涉及岡崎片段的合成C產(chǎn)生的復制子總是雙鏈環(huán)狀拷貝D是噬菌體DNA在細菌中最通常的種復制方式DNA多聚體的形成要求有模板和一個自由多聚體的形成要求有模板和一個自由3’OH端的存在。這個末端的形成是靠（端的存在。這個末端的形成是靠（ACD）A在起點或?qū)槠纹鹗嘉稽c上的一個RNA引發(fā)體的合成B自由的脫氧核糖核苷酸和模板一起隨機按WATSONCRICK原則進行配對