市售食用菌鮮品外源細(xì)菌多樣性研究及乳球菌快速檢測(cè)方法的建立.pdf

1、食用菌兼具營(yíng)養(yǎng)、美味、保健三大優(yōu)點(diǎn)，廣受消費(fèi)者青睞。食用菌產(chǎn)品有干品和鮮品之分，由于運(yùn)輸、銷售環(huán)節(jié)未能全程冷鏈，常溫下外源細(xì)菌大量繁殖，導(dǎo)致食用菌鮮品的嚴(yán)重劣變。為此，本文以香菇等多種食用菌鮮品為研究對(duì)象，探究外源細(xì)菌種類、數(shù)量、多樣性，分析其在貨架期的動(dòng)態(tài)變化。在此基礎(chǔ)上，選用金針菇中優(yōu)勢(shì)細(xì)菌為例，創(chuàng)建快速檢測(cè)方法。研究結(jié)果如下:
　　1.通過(guò)平板培養(yǎng)和16S rDNA高通量測(cè)序法，對(duì)香菇等九種食用菌鮮品外源細(xì)菌種類、數(shù)量、多樣

2、性進(jìn)行研究，結(jié)果表明:平板培養(yǎng)法中，不同食用菌鮮品表面均可分離到美洲愛文菌（Ewingella americana），為優(yōu)勢(shì)細(xì)菌，其次是乳酸乳球菌乳酸亞種（Lactococcus lactis subsp.lactis）。16S rDNA高通量測(cè)序法對(duì)物種相對(duì)豐度進(jìn)行分析，表明雙孢蘑菇、茶樹菇、猴頭菇、蟹味菇、平菇等食用菌鮮品外源細(xì)菌中假單胞菌屬（Pseudomonas）豐度最高，黑木耳、金針菇、香菇、杏鮑菇則分別以鞘氨醇單胞菌屬（Sp

3、hingomons）、乳球菌屬（Lactococcus）、伯克氏菌屬（Burkholderia）、歐文氏菌屬（Erwinia）豐度最高。多樣性分析結(jié)果表明，黑木耳、香菇外源細(xì)菌物種多樣性最高，杏鮑菇外源細(xì)菌物種多樣性最低;香菇、杏鮑菇、茶樹菇外源細(xì)菌群落明顯區(qū)別于其他六種食用菌。
　　2.對(duì)金針菇、蟹味菇以及杏鮑菇貨架期1-5天外源細(xì)菌進(jìn)行種類與數(shù)量的研究，結(jié)果表明:平板培養(yǎng)法中，菌落計(jì)數(shù)發(fā)現(xiàn)三者貨架期第5天外源細(xì)菌數(shù)量均較第1天

4、有顯著性增加，分別增長(zhǎng)了35倍（蟹味菇）、418倍（金針菇）、4117倍（杏鮑菇）;種類鑒定發(fā)現(xiàn)金針菇貨架期外源細(xì)菌優(yōu)勢(shì)種為美洲愛文菌和變形肥桿菌（Obesumbacterium proteus）;蟹味菇貨架期外源細(xì)菌優(yōu)勢(shì)種為解鳥氨酸拉烏爾菌（Raoultella ornithinolytica）和深紅沙雷氏菌（Serratia rubidaea）;杏鮑菇貨架期外源細(xì)菌優(yōu)勢(shì)種為美洲愛文菌和北京泛菌（Pantoea beijingensi

5、s）。16S rDNA高通量測(cè)序法發(fā)現(xiàn)金針菇外源細(xì)菌物種豐富度低于其他兩者;三種菇表面均存在大量的假單胞菌屬和乳球菌屬，蟹味菇和杏鮑菇假單胞菌居多，隨貨架期延長(zhǎng)豐度增大，金針菇乳球菌屬居多，隨貨架期延長(zhǎng)比例降低。兩種方法中16S rDNA高通量測(cè)序法對(duì)物種鑒定更為全面，對(duì)外源細(xì)菌豐度的變化可進(jìn)行量化分析。
　　3.創(chuàng)建乳球菌LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)快速檢測(cè)方法。以金針