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文檔簡介
1、熒光探針,即熒光傳感器,是一種新的化學(xué)檢測(cè)手段,具有靈敏性較高、選擇性專一、用量低和操作方便等優(yōu)點(diǎn),在分析化學(xué)、生物化學(xué)、環(huán)境科學(xué)和臨床有著重要的應(yīng)用。大部分生物分子本身熒光較弱或無熒光,檢測(cè)靈敏度很差?,F(xiàn)在人們用熒光性較強(qiáng)的標(biāo)記試劑對(duì)待測(cè)物進(jìn)行標(biāo)記,生成熒光強(qiáng)度較高的共價(jià)或非共價(jià)結(jié)合的物質(zhì),大大降低檢出限,這就是熒光探針技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)。最近幾年,熒光探針開發(fā)、設(shè)計(jì)的研究越來越受到人們的關(guān)注。
本論文包括以下三部分:
一
2、、設(shè)計(jì)一種以芘作為發(fā)光基團(tuán)的熒光探針,即探針PYPA。經(jīng)過合成、分離后,再用核磁質(zhì)譜來驗(yàn)證探針PYPA的結(jié)構(gòu),最后做探針檢測(cè)金屬離子的應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。研究發(fā)現(xiàn),探針PYPA在PPi存在的條件下可以專一性檢測(cè)甲醇/水(V甲醇/V水=3/2,HEPES緩沖液1.0 mM,pH=7.20)溶液中的Zn2+。其中,探針PYPA與Zn2+和PPi通過2:2:1絡(luò)合,檢測(cè)Zn2+的結(jié)合常數(shù)Ka=3.343×105 M-1,檢出限為0.030μM。
3、 二、設(shè)計(jì)一種以熒光素作為發(fā)光基團(tuán)的熒光探針 FLTC,通過合成和分離后經(jīng)核磁和質(zhì)譜驗(yàn)證探針FLTC的結(jié)構(gòu),再做探針FLTC熒光分析性實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明,探針FLTC可以專一性檢測(cè)乙醇/水(V乙醇/V水=3/2,HEPES緩沖液0.5 mM,pH=7.15)溶液中的Hg2+。其中,探針FLTC與Hg2+的結(jié)合比例為1:1,檢測(cè)Hg2+的結(jié)合常數(shù)Ka=2.2078×104 M-1,檢出限為0.21μM,不同的是探針FLTC在Hg2+存在的條
4、件下還可以檢測(cè)Ag+。
三、設(shè)計(jì)一種以羅丹明B作為發(fā)光基團(tuán)的熒光探針RBTA,合成后先用核磁質(zhì)譜確認(rèn)其結(jié)構(gòu),再做熒光和紫外分析性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明,探針FLTC可以檢測(cè)乙醇/水(V乙醇/V水=3/2,HEPES緩沖液0.5 mM,pH=7.10)溶液中的Fe3+和Sn2+。通過Job’s plot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證探針RBTA與Fe3+和Sn2+都是以1:1的方式絡(luò)合,與Fe3+和Sn2+結(jié)合常數(shù)Ka分別為3.26×103 M-1(Fe3+
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