N，N，N-三甲基-N-辛基殼聚糖作為非病毒基因載體的研究.pdf

1、殼聚糖是自然界廣泛存在的天然陽離子多糖，生物相容性和生物降解性能好、安全無毒，作為非病毒基因載體具有潛在的應(yīng)用價值。但殼聚糖溶解性差、靶向性弱和轉(zhuǎn)染率低等缺點限制了其應(yīng)用。本文通過烷基化反應(yīng)，將烷基長鏈接到殼聚糖主鏈上，再通過季銨化反應(yīng)，改善其親水性，合成出一種新型的殼聚糖基非病毒基因載體-N,N,N-三甲基-N-辛基殼聚糖。
　　 紅外分析和核磁共振譜圖分析表明，成功合成了目標(biāo)產(chǎn)物，元素分析結(jié)果表明，所制得的三組N,N,N-三

2、甲基-N-辛基殼聚糖（TM-ACS）烷基側(cè)鏈的取代度隨著辛醛投料量的增加而變大，核磁共振分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三組產(chǎn)物的季銨化取代度逐漸減小。溶解性實驗結(jié)果表明，三組產(chǎn)物的溶解性比原料殼聚糖明顯改善，能很好的溶解在1％醋酸溶液和水中，甚至在pH=7.4的PBS緩沖溶液中也具有良好的溶解性。
　　 以芘為熒光探針，利用穩(wěn)態(tài)熒光法，測定了不同濃度下，TM-ACS增溶芘后的熒光光譜，研究TM-ACS在水中的聚集行為，通過繪制I373/I384

3、-濃度的曲線，得出TM-ACS在水中臨界膠束濃度。
　　 采用復(fù)凝法，制備了不同N/P的TM-ACS-1/EGFP-DNA復(fù)合物，瓊脂糖凝膠電泳研究表明，N/P=1時，該殼聚糖衍生物就可以完全阻滯DNA的遷移；復(fù)合物的粒徑隨著N/P的增大而逐漸減小，并穩(wěn)定在180nm左右，Zeta電勢隨著N/P的增大而增大；MTT檢測發(fā)現(xiàn)復(fù)合物對Chang liver肝實質(zhì)細胞的細胞毒性較小，進一步細胞毒性試驗表明，TM-ACS-1材料本身對A