Burkholderia ambifaria菌脂多糖相關(guān)O-抗原二糖重復(fù)片段及其寡聚體的合成研究.pdf

1、洋蔥伯克霍爾德復(fù)合菌群（Burkholderia cepacia complex，Bcc）是由一組基因型不同而表型相似的細(xì)菌構(gòu)成，并且可以廣泛地存在于自然環(huán)境中，不僅能降解環(huán)境污染物還能感染植物和人體。其中，Bcc菌作為人體條件致病菌而廣受關(guān)注。它可誘發(fā)易感人群（如肺部囊性纖維化患者或慢性肉芽腫病的患者）產(chǎn)生不可控的壞死性肺炎和敗血癥，通常具有較高的死亡率。此外，Bcc還具有較高的耐藥性，以及不明確的致病機(jī)制，使人群感染后難以治愈。因此

2、，我們需要尋找和發(fā)展新的治療和預(yù)防方法，用于Bcc感染的治療。
　　研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)菌脂多糖相關(guān)O-抗原可以作為用于疫苗開(kāi)發(fā)的抗原靶標(biāo)。但這類(lèi)多糖抗原屬于非T細(xì)胞依賴性抗原，只能與B細(xì)胞作用，引起一個(gè)短暫的、親和力較低的IgM抗體應(yīng)答，并且在整個(gè)免疫過(guò)程中沒(méi)有T細(xì)胞的參與，不會(huì)形成免疫記憶，因此對(duì)于2歲以下兒童、老人以及免疫缺陷者的免疫保護(hù)效果差。人們發(fā)現(xiàn)多糖-蛋白綴合物疫苗能夠很好地解決上述問(wèn)題。該類(lèi)疫苗一般由細(xì)菌表面多糖抗原與具有

3、免疫原性的載體蛋白如破傷風(fēng)類(lèi)毒素、白喉類(lèi)毒素等共價(jià)綴合而成，可以誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生高親和力的IgG抗體，且通常具有免疫記憶。目前，已上市的多糖-蛋白綴合疫苗有肺炎球菌多糖結(jié)合疫苗、流感嗜血桿菌b型（Haeophilus influenzaetypeb，Hib）多糖結(jié)合疫苗、腦膜炎球菌多糖結(jié)合疫苗等。它們都已被證實(shí)可以產(chǎn)生免疫記憶:當(dāng)同種抗原再次出現(xiàn)時(shí)，能快速應(yīng)答生成高親和力的IgG抗體，同時(shí)生成能夠存活更長(zhǎng)時(shí)間的記憶B細(xì)胞。
　　Bcc

4、脂多糖的O-抗原是理想的候選疫苗靶標(biāo)之一，但是來(lái)自于細(xì)菌表面的O-抗原具有結(jié)構(gòu)復(fù)雜、成分不均一、結(jié)構(gòu)不明確的特點(diǎn)，因而限制了Bcc疫苗的發(fā)展。近年來(lái)隨著化學(xué)合成技術(shù)的完善，科學(xué)家們已經(jīng)運(yùn)用化學(xué)的方法來(lái)合成多種純度較高、成分均一和結(jié)構(gòu)明確的寡糖分子（包括O-抗原）。因此，化學(xué)合成法已經(jīng)成為糖抗原獲取的一條新途徑。
　　本論文內(nèi)容主要介紹Burkholderia ambifaria菌脂多糖的O-抗原二糖重復(fù)片段及其寡聚體的合成。本論文

5、所獲得的不同長(zhǎng)度的寡糖片段可以與具有免疫活性的載體蛋白或者載體小分子鏈接形成相應(yīng)的糖綴合物，為后續(xù)各種生物免疫學(xué)研究提供材料，并且用于Burkholderia ambifaria糖類(lèi)疫苗的研究。主要包括以下兩章內(nèi)容:
　　第一章對(duì)洋蔥伯克霍爾德復(fù)合菌群的概況及其致病因子的研究現(xiàn)狀以及抗藥性等進(jìn)行了簡(jiǎn)要介紹。
　　第二章是基于Burkholderia ambifaria菌19182脂多糖相關(guān)O-抗原的二糖重復(fù)片段的結(jié)構(gòu)，合成了

6、二糖、四糖與六糖三個(gè)目標(biāo)分子。其O-抗原的二糖重復(fù)片段是由D-鼠李糖以及6-脫氧-D-阿卓糖組成的。在目標(biāo)產(chǎn)物中既存在α構(gòu)型糖苷鍵，也存在β構(gòu)型糖苷鍵。鑒于6-脫氧-阿卓糖的β構(gòu)型糖苷鍵相對(duì)難以合成，同時(shí)為了優(yōu)化合成步驟和提高總收率，我們首先設(shè)計(jì)合成β構(gòu)型的二糖模塊4，而后通過(guò)采用[2+2]和[2+2+2]的合成策略以α鍵的鏈接方式來(lái)構(gòu)建目標(biāo)四糖和六糖產(chǎn)物。為了提高二糖模塊4合成產(chǎn)率以及β構(gòu)型的立體選擇性，我們?cè)诤铣蓵r(shí)選用了不同的溶劑以