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文檔簡介
1、GB/T 21510—××××附 錄 A(規(guī)范性)粉末抗菌性能試驗方法 振蕩法A.1 適用范圍本試驗方法適用于測定納米粉末的抗菌性能。A.2 試驗設(shè)備和材料A.2.1 試驗設(shè)備A2型二級生物安全柜、恒溫振蕩培養(yǎng)箱(300 r/min) 、恒溫培養(yǎng)箱、壓力蒸汽滅菌鍋、電熱恒溫干烤箱[(0~250)℃]、冷藏冰箱、 微波爐(輸出功率≥700w) 、 天平(感量0.001g) 。A.2.2 試驗器材三角
2、燒瓶(容量為500ml、250ml、150 ml)、 平皿(直徑為90mm) 、試管(18mm×180mm) 、量筒(100ml) 、吸管(10ml、5ml、1 ml)、酒精燈、試管架等。A.2.3 培養(yǎng)基及試劑A.2.3.1 普通營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化鈉 5g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至7.2~7.4,高壓蒸汽滅菌121℃,20 min。用途:用于金黃色葡萄球菌和大腸桿菌增菌培養(yǎng)。A.2.3.2 普通
3、營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨 10g牛肉膏 5g氯化鈉 5g瓊脂 20g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至7.2~7.4,高壓蒸汽滅菌121℃,20 min。 用途:用于金黃色葡萄球菌和大腸桿菌的培養(yǎng)。A.2.3.3 沙堡氏瓊脂培養(yǎng)基蛋白胨 10g葡萄糖 40g瓊脂 20g蒸餾水 1000ml調(diào)pH值至5.4~5.8,高壓蒸汽滅菌115℃,30 min。用途:用于白色念珠菌的培養(yǎng)。A.2.3.4 含 0.1% 吐溫-80 的磷酸鹽緩沖液[PBS,0
4、.03mol/L, pH(7.2~7.4)]磷酸氫二鈉(Na2HPO4,無水) 2.83g磷酸二氫鉀(KH2PO4) 1.36g非離子表面活性劑吐溫-80 1.0g蒸餾水 1000ml高壓蒸汽滅菌121℃,20 min。 用途:用于菌液和試驗樣本的稀釋。GB/T 21510—××××將含對照樣本和試驗樣本的三角燒瓶固定于恒溫振蕩培養(yǎng)箱的搖床上,在作用溫度37℃±1℃條件下,以150r/m
5、in速度,檢測樣品需要稀釋后使用的材料振蕩接觸1h~4h,不需要稀釋直接使用的材料振蕩接觸4h~24h。A.3.2.6 振蕩接觸一定時間后活菌計數(shù)振蕩后的對照樣液和試驗樣液經(jīng)適當(dāng)稀釋后,分別取1.0 ml 的樣液接種于滅菌平皿中,每樣液平行接種2個平皿,傾注45℃~55℃已溶化的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,待瓊脂培養(yǎng)基凝固后翻轉(zhuǎn)平板,將上述平板置于37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中,做活菌培養(yǎng)計數(shù)。A.3.2.7 陰性對照組陰性對照組分別吸取試驗同
6、批次稀釋液、培養(yǎng)基與試驗樣本一起放入37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。觀察有無污染。A.3.2.8 觀察結(jié)果對細菌培養(yǎng)24h~48h后觀察最終結(jié)果,對白色念珠菌培養(yǎng)48h~72h后觀察最終結(jié)果。菌落計數(shù)按中華人民共和國衛(wèi)生部《消毒技術(shù)規(guī)范》(2017年版)中菌落總數(shù)測定方法。A.4 試驗要求A.4.1“0”接觸時間對照組的菌落數(shù)應(yīng)在 1×104cfu/ml~5×104cfu/ml。陰性對照應(yīng)無菌生長。A.4.2
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