香蕉(musaspp.)不對稱體細胞融合再生植株的鑒定

1、中山大學碩士學位論文香蕉（Musa spp.）不對稱體細胞融合再生植株的鑒定姓名：龔慶申請學位級別：碩士專業(yè)：生物技術(shù)指導教師：黃學林20090607龔慶 香蕉( M u s a s p p ．) 不對稱體細胞融合再生植株的鑒定 中山大學碩士學位論文R A P D 檢測。在以貢蕉為供體，龍牙蕉為受體的3 株不對稱融合再生植株中，引物O P A l 7 和O P D l l 在L x G 2 號融合再生植株中檢測到供體貢蕉的特征條帶，因此

2、可以鑒定其為雜種。通過引物O P S 0 1 和O P H 0 9 的鑒定，在以大蕉為供體，龍牙蕉為受體的1 7 個不對稱融合再生植株中，其中9 株( 且p L x D l 7 ，L x D 2 0 ，L x D 2 1 ，L ×D 2 3 ，L x D 2 6 ，L x D 2 8 ，L x D 2 9 ，L x D 3 0 ，L x D 3 4 ) 的R A P D 圖譜顯示它們都含有受體親本龍牙蕉與供體親本大蕉的條帶，因

3、此被鑒定為雜種。實驗結(jié)果顯示，在供試的2 0 株體細胞不對稱融合再生植株中，R A P D 條帶圖譜大部分表現(xiàn)為受體親本的條帶( 5 ．9 條) ，只有少數(shù)( 1 條) 供體親本的條帶進入融合后代中，顯示出高度不對稱性。不對稱體細胞雜種可分為核不對稱雜種和胞質(zhì)雜種兩類。為了了解供試材料是否存在胞質(zhì)雜種，利用酶切片段多態(tài)。[ 生D N A ( C A P S ) 技術(shù)對融合再生植株進行檢測。結(jié)果表明，在所供試的2 0 株融合再生植株中沒有

4、篩選到胞質(zhì)雜種，融合再生植株的C A P S 圖譜與受體親本一致，無供體親本的條帶，也沒有出現(xiàn)重組條帶。此外，在所使用的引物／限制性內(nèi)切酶的組合中，龍牙蕉和貢蕉的線粒體D N A的差異比較小，只有1 個引物／限制性內(nèi)切酶組合可以區(qū)分龍牙蕉和貢蕉的線粒體D N A 。而有1 0 個引物／限制性內(nèi)切酶組合可以區(qū)分龍牙蕉和大蕉的線粒體基因組D N A 。我們推測，龍牙蕉與貢蕉的線粒體在進化上趨于一致，C A P S 有可能成為研究香蕉分類的一

5、種新的分子標記。同工酶作為一種生物化學標記，在雜種的鑒定中被廣泛應用。其中過氧化物同工酶與植物抗病性息息相關。通過親本及融合后代的過氧化物同工酶檢測發(fā)現(xiàn)，所有融合再生植株的P O D 同工酶譜帶都與受體親本龍牙蕉一致，不存在供體親本貢蕉或大蕉的特征條帶。這說明融合再生植株的過氧化物同工酶只表現(xiàn)受體親本的特征。利用流式細胞術(shù)對融合再生植株進行倍性鑒定，可以做為雜種鑒定的證據(jù)。以二倍體野生蕉為內(nèi)參，利用流式細胞術(shù)對龍牙蕉與大蕉的融合再生植株