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文檔簡介
1、西南大學碩士學位論文小桐子(Jatropha curcas L.)M代變異植株篩選的初步研究姓名:陳敦萍申請學位級別:碩士專業(yè):園林植物與觀賞園藝指導教師:李凌;楊清20090501兩南大學碩十論文 摘要1 .小桐子表型變異植株的篩選。在三種誘變方法處理得到的3 2 0 0 株M l 代植株中,共篩選出了1 8 株具有明顯表型變異的單。其變異主要表現(xiàn)在株型和葉片形態(tài)方面。誘變產(chǎn)生的表型變異頻率非常低,僅有0 .5 %。其中化學誘變的變異
2、率為0 .5 6 %,似) C 0 r r 輻射和碳氮低能離子注入誘變的變異率分別為0 .3 3 %和0 .7 6 %。在化學誘變中,E M S 誘變產(chǎn)生的變異率最高,為0 .6 2 %;其次是亞硝基胍0 .5 5 %;秋水仙素誘變的變異率0 .4 6 %為最低。2 .小桐子S R A P .P C R 反應體系和銀染方法的確定。本研究在實驗室已建立的S R A P - P C R反應體系的基礎上,對部分反應因素稍作了調(diào)整,得到了重復性
3、好、穩(wěn)定性強的小桐子S R A P分子標記圖譜。通過兩種銀染方法的實驗對比,確定了操作步驟簡便,擴增條帶清晰的S a l l g u i n e t t i 銀染法用于小桐子的分子鑒定實驗。3 .S R A P 分子標記檢測。本研究共篩選出了2 2 對擴增條帶清晰,結(jié)果穩(wěn)定而且擴增帶型有明顯差異的S R A P 引物組合用于分子檢測。結(jié)果顯示,2 2 對S R A P 引物一共擴增到2 6 6 條帶,其中多態(tài)性條帶數(shù)為5 4 條,多態(tài)性
4、比例為2 0 .3 %。說明誘變處理可以造成小桐子分子水平上的遺傳變異。4 .1 8 株表型變異植株的遺傳變異情況比較。分子檢測結(jié)果顯示,在1 8 株表型變異植株中,除V 一6 號和V .1 3 號以外,其他的1 6 株不僅在外部形態(tài)上發(fā)生了變異,而且也存在分子水平上的遺傳變異。其中V .5 號植株檢測到的多態(tài)性位點數(shù)最多,有2 3 個,多態(tài)性比率為9 .7 9 %;其次是V .1 號,V .8 號和V .1 1 號,檢測到的多態(tài)性位點
5、數(shù)分別為1 6 個,1 0 個,1 0 個。5 .三種誘變方法的效應比較。本研究分別利用化學藥劑,6 0 C o y 輻射和碳氮低能離子注入三種誘變方法處理小桐子種子。S R A P 標記結(jié)果表明:化學誘變中E M S 誘變產(chǎn)生的多態(tài)性位點總數(shù)最多,共有5 2 個;其次是亞硝基胍,共有3 3 個多態(tài)性位點;秋水仙素和碳氮低能離子注入誘變產(chǎn)生的多態(tài)性位點數(shù)均為3 個;而6 0 C o y 輻射誘變檢測到的多態(tài)性位點數(shù)最少,僅有劍1 個。關
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