合作學習在初中英語寫作教學中的應(yīng)用研究

1、國內(nèi)圖書分類號：X703 國際圖書分類號：628.35 工學博士學位論文 產(chǎn)乙醇桿菌屬突變菌株 YR-3 的產(chǎn)氫行為 及其突變機制 博 士 研究生： 鄭國香 導 師： 任南琪 教授 申 請 學 位： 哈爾濱工業(yè)大學博士 學 科 、 專 業(yè)： 環(huán)境工程 所 在 單 位： 市政環(huán)境工程學院 答 辯 日 期： 2008 年 3 月 授予學位單位： 哈爾濱工業(yè)大學 摘 要 - I - 摘 要 人類的生存和發(fā)展都離不開能源，能源的短缺已經(jīng)成

2、為當前國際社會急需解決的難題之一；氫能作為一種清潔、高效、安全、可持續(xù)的新能源，被視為 21 世紀最具發(fā)展?jié)摿Φ哪茉?，已逐漸成為能源界關(guān)注的熱點。 發(fā)酵法生物制氫技術(shù)在工藝改進、運行調(diào)控、擴大原料利用范圍及高效菌株篩選等方面都取得相當大的進展。決定發(fā)酵法生物技術(shù)實現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的關(guān)鍵指標是提高系統(tǒng)的產(chǎn)氫能力和降低生產(chǎn)成本。在菌種產(chǎn)氫能力方面，各國學者致力于從自然界或產(chǎn)氫反應(yīng)器中分離篩選更高產(chǎn)氫的野生菌株，同時也利用傳統(tǒng)的誘變手段及基因工程手段

3、改良產(chǎn)氫菌種，以縮短獲得高產(chǎn)氫菌株的歷程。 針對提高野生菌株的產(chǎn)氫能力，本文改進傳統(tǒng)的育種手段對野生產(chǎn)氫菌Ethanoligenens harbinense ZGX4 進行誘變育種，經(jīng)穩(wěn)定性考察后得到一株產(chǎn)氫能力可提高 40%左右的產(chǎn)氫突變株 YR-3，并對其發(fā)酵行為進行了深入探討。利用 AFLP 技術(shù)及雙相蛋白電泳（2-DE）技術(shù)分別對其進行酶切后的基因多態(tài)性和蛋白質(zhì)組學分析，初步分析了高產(chǎn)突變菌株的產(chǎn)氫代謝突變機制。 通過對比不同誘

4、變因子對產(chǎn)氫細菌 ZGX4 的誘變效應(yīng)，確定紫外線+亞硝酸復(fù)合誘變方式對產(chǎn)氫細菌 ZGX4 的誘變效果最佳。利用這種處理方式篩選到產(chǎn)氫能力提高較大而且有較好絮凝能力的突變菌株。對分離培養(yǎng)基LM-1 進行了簡化，結(jié)合直接涂布分離培養(yǎng)法，采用紫外線和亞硝酸復(fù)合誘變篩選獲得一株高效產(chǎn)氫突變菌株 YR-3，生理生化指標和形態(tài)特征分析結(jié)果表明，YR-3 的表型上已經(jīng)發(fā)生了明顯變化。 采用間歇培養(yǎng)實驗分別對 YR-3 的培養(yǎng)條件進行單因子探討，并進

5、一步利用中心組合設(shè)計和響應(yīng)面法（RSM）對影響 YR-3 發(fā)酵產(chǎn)氫能力的四種因素（mC/mN、PBS 濃度、初始 pH、生物素）進行了分析，確定 YR-3 發(fā)酵產(chǎn)氫的最適培養(yǎng)條件：溫度 37±1 ℃，初始 pH 6.0，磷酸鹽緩沖液 80 mM，mC/mN 5.5，生物素 1.4 mg/L。 間歇培養(yǎng)實驗對比野生菌株 ZGX4 菌株和突變菌株 YR-3 的產(chǎn)氫性能，結(jié)果表明，突變株 YR-3 仍然為典型的乙醇厭氧發(fā)酵細菌，液相