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1、Y S 0 3 2 5 7關(guān)于心肌損傷中,b 肌細(xì)胞凋亡的研究:I 一氧化氯在心肌缺血/再灌注不目剛期的作用2 抗B .腎上腺素受體自身抗體的致潤【作用對在體太鼠,u 功能的影響S n /d l e s0 1 ] c a 』d l o m y o c y t c A p o p z o s i si n M y o c a r d i a l h ! j u t ?l T h c R o l c o f N i t r i c O x
2、i d e a [ D ] f f c ”c n l T l m cP o [ n l i n M 3 ㈣r d i z l l s c h e ?a n dR e p e v t h s i o n Ir :j u r ,2 P r o - u p o p t o t i 、_ a n d ( :¨d l 。d 。p Ⅲ?eE l I c c t 【) r t h e A n dp A d r e n l ! c e p l
3、 o rA u t o a n t i b o d y l n l { a L—j 坐塹L j 氆L——旦塹壹—煎攫—』蛋型} ±—一一一—生蟾曼熊魚l 生—j 酗蛀d 堡L 一山西醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文的i N O S 和R N S 是否參與缺血后硝基化應(yīng)激和心肌細(xì)胞凋亡。[ 材料和方法]1 、成年雄性W i s t a r 大鼠隨機(jī)分為四組:心肌缺血/再灌注偽手術(shù)組,心肌缺血/再灌注加生理鹽水組,L 一精氨酸早期處理組和L
4、.精氨酸晚期處理組。結(jié)扎左冠脈前降支,心肌缺血3 0 分鐘后,松結(jié)扎線進(jìn)行再灌注5 小時(shí)。分別于再灌注前1 0 分鐘和5 0 分鐘( 早期處理) 或再灌注后3 小時(shí)和4 小時(shí)( 晚期處理) 給予L 一精氨酸。手術(shù)過程中動(dòng)態(tài)監(jiān)測大鼠左心室功能;再灌注結(jié)束后,以E v a n ’SB l u e 和T T C 雙染色法檢測心梗面積;取心肌組織分別通過D N A L a d d e r 形成檢測、T U N E L 法和c a s p a s
5、 e - 3 活性檢測測定心肌細(xì)胞凋亡指標(biāo);以W e s t e r nB l o t t i n g 法測定心肌組織e N O S 、i N O S 表達(dá)水平:以硝酸酶還原法測定心肌組織總N O 的含量;以E L I S A 法檢測心肌組織硝基酪氨酸含量反應(yīng)O N O O 。水平。2 、雄性成年W i s t a r 大鼠心肌缺血3 0 分鐘/再灌注5 小時(shí),并且隨機(jī)給予下列處理措旌之一:①心肌缺血/再灌注+ 生理鹽水( M I /R
6、 + v e h i c l e ) :②心肌缺血/再灌注十L 一精氨酸( M I /R + L —a r g i n i n e ) ;③清除P M N s 后給予心肌缺血/再灌注+ 生理鹽水( P M N D +M I 瓜+ v e l l i c l e ) ;④清除P M N s 后給予心肌缺血/再灌注+ L 一精氨酸( P M N D +M I /R + L .a(chǎn) r g i n i n e ) ;⑤心肌缺血/再灌注+ 1 4
7、 0 0 W ( 一種選擇性i N O S 抑制劑)( M I /R + 1 4 0 0 W ) ;⑥心肌缺血/再灌注+ 1 4 0 0 W + L 一精氨酸( M I 爪+ 1 4 0 0 W + L —a r g i n i n e ) ;⑦心肌缺血,再灌注+ F e T M P y P ( 一種過氧亞硝基分解催化劑) + L .精氨酸( M 1 /R +F e T M P y P + L —a r g i n i n e ) 。檢
8、測由心肌缺血/再灌注引起、L .精氨酸加重的硝基化應(yīng)激和心肌細(xì)胞凋亡情況。[ 結(jié)果]1 .心肌缺血/再灌注早期給予L .精氨酸,顯著減輕了缺血/再灌注誘導(dǎo)的大鼠心功能降低( L V S P 和d P /d t m a x ) 、減少了缺血/再灌注誘導(dǎo)的心肌梗死面積、減輕了心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)、降低了c a s p a s e 一3 的活性、減少了心肌組織細(xì)胞毒性物質(zhì)O N 0 0 ‘( 通過檢測硝基酪氨酸含量) 的生成。說明在再灌注早期給予
9、L .精氨酸,可以通過減輕心肌細(xì)胞損傷,進(jìn)而改善再灌注后心功能的恢復(fù)。2 .與早期相反,再灌注晚期給予L - 精氨酸,則進(jìn)一步加重了缺血/再灌注誘導(dǎo)的L V S P和d P /d t m 。的下降、顯著增加了心肌組織N O x 的含量和O N O O 一的產(chǎn)生、加重了由缺血/再灌注誘導(dǎo)的心肌梗死面積和心肌細(xì)胞凋亡。提示,在再灌注晚期給予L .精氨酸,可以通過加重心肌細(xì)胞損傷,進(jìn)而延遲再灌注后心功能的恢復(fù)。3 .再灌注l 小時(shí),在心肌組織
10、內(nèi)未檢測到i N O S 表達(dá)的增加,但在再灌注3 小時(shí)則檢測到i N O S 的高度表達(dá):與此相反,各處理組大鼠心肌缺血3 0 分鐘/再灌注5 小時(shí)過程中,心肌組織e N O S 表達(dá)均未見差異。提示,在再灌注晚期給予L 一精氨酸所引起的心肌組織硝基化應(yīng)激增強(qiáng),很可能源于此時(shí)高度表達(dá)的i N O S 。4 .P M N s 被清除后,缺血/再灌注晚期給予L 一精氨酸所導(dǎo)致的硝基化應(yīng)激減弱,心肌細(xì)胞的凋亡也明顯減輕;用一種i N O S
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