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文檔簡介
1、中山大學(xué)博士學(xué)位論文1.負(fù)載肝癌干細(xì)胞RNA樹突狀細(xì)胞疫苗誘導(dǎo)的抗肝癌免疫應(yīng)答研究;2.EDIL3的表達(dá)和肝癌患者預(yù)后的關(guān)系姓名:孫建聰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士專業(yè):腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師:夏建川20100520中I ¨大學(xué)博。{ j 學(xué)位論文.摘要的D C 疫茁可作為一種新的靶向殺傷腫瘤干細(xì)胞的免疫治療方法。然而目前還未見應(yīng)用負(fù)載肝癌干細(xì)胞R N A 的D C 疫苗用于治療肝癌的研究報(bào)道。以往的研究證實(shí),C D l 3 3 + 肝癌細(xì)胞具
2、有較強(qiáng)的克隆形成能力和增殖能力,在動(dòng)物體內(nèi)有很強(qiáng)的成瘤能力。基于以上的研究結(jié)果,我們?cè)O(shè)想負(fù)載肝癌干細(xì)胞R N A 的D C 疫苗可能能夠誘導(dǎo)特異性抗肝癌的免疫反應(yīng),不僅能夠殺傷普通肝癌細(xì)胞,而且能夠殺傷肝癌干細(xì)胞,達(dá)到抑制肝癌復(fù)發(fā)的目的。目 的制備負(fù)載C D l 3 3 + 肝癌干細(xì)胞R N A 的D C 疫苗,并研究其在體內(nèi)外誘導(dǎo)抗肝癌干細(xì)胞免疫應(yīng)答的作用,尋找一種增強(qiáng)抗肝癌樹突狀細(xì)胞疫苗的新途徑,為臨床制備更有效,更特異的D C 抗
3、肝癌疫苗奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法l 采用免疫磁珠分選法( M A C S ) 或者流式細(xì)胞儀分選法從H u h 7 肝癌細(xì)胞系中分選純化C D l 3 3 + 肝癌干細(xì)胞,然后在體內(nèi)外進(jìn)行鑒定;2 提取C D l 3 3 + H u h 7 細(xì)胞的總R N A ;3 從外周血單核細(xì)胞誘導(dǎo)生成未成熟D C s ,同時(shí)收集T 淋巴細(xì)胞備用;4 用C D l 3 3 + H u h 7R N A 負(fù)載D C s ,采用O K .4 3 2 刺激D
4、C s 成熟,制備負(fù)載C D l 3 3 + H u h 7 R N A 的D C 疫苗( C D l 3 3 + H u h 7 一D C s ) ;5 流式細(xì)胞儀檢測(cè)C D l 3 3 + H u h 7 .D C s 表面共刺激分子的表達(dá);6 利用M T S 檢測(cè)C D l 3 3 + H u h 7 一D C s 刺激自身T 淋巴細(xì)胞增殖的能力;7 用L D H 釋放法檢測(cè)C D l 3 3 + H u h 7 一D C s 誘
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