幽門螺桿菌igg抗體分型檢測(cè)系統(tǒng)課件

1、幽門螺桿菌IgG抗體分型檢測(cè)系統(tǒng),泰州欣康基因數(shù)碼科技有限公司,幽門螺桿菌的認(rèn)知,1,1982年4月，Warren和Marshall發(fā)現(xiàn)并分離出幽門螺桿菌（Helicobacter Pylori; HP ）；HP是一種微厭氧、對(duì)生長(zhǎng)要求十分苛刻的革蘭氏陰性桿菌，體內(nèi)呈螺旋狀，體外呈桿狀；HP位于胃黏膜上皮表面、胃小彎或小彎之間，在胃竇部多見；鞭毛在運(yùn)動(dòng)中起推進(jìn)器作用，在定居過程中起拋錨作用；,幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn),幽 門 螺 桿 菌

2、,幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn),2005年澳大利亞科學(xué)家Barry J. Marshall和J. Robin Warren，因?yàn)榘l(fā)現(xiàn)了導(dǎo)致胃炎和胃潰瘍的細(xì)菌-幽門螺桿菌而獲得諾貝爾獎(jiǎng)，委員會(huì)在授獎(jiǎng)時(shí)說：由于幽門螺桿菌的發(fā)現(xiàn)，使得原本慢性的、經(jīng)常無藥可救的胃潰瘍變成了只需抗生素和一些其他藥物短期就可治愈的疾病。,Barry J. Marshall,Robin Warren,（Helicobacter Pylori; HP ）,一,世界范圍內(nèi)幽門螺旋桿

3、菌感染現(xiàn)狀,,,,,Hp在全球的人群的感染率均很高；其中發(fā)展中國家的感染率遠(yuǎn)超發(fā)達(dá)國家；,Hp在亞洲人群的感染率超過40%-80%；,幽門螺桿菌感染亞洲現(xiàn)狀,我國感染率超過40%-70%左右；,幽門螺桿菌中國感染現(xiàn)狀,人與人的直接和間接接觸傳播： 發(fā)達(dá)國家，口-口傳播的可能性大； 發(fā)展中國家，則以糞-口傳播為主；醫(yī)源性傳播： 胃鏡吸引閥、活檢孔道及活檢鉗可分離出Hp； 患者胃鏡檢查次數(shù)越多，Hp陽性率

4、越高；,Hp的傳播方式,H.pylori 致病機(jī)制,2,,H.pylori進(jìn)入機(jī)體,定植于胃上皮細(xì)胞,刺激機(jī)體釋放各種細(xì)胞因子,胃粘膜炎癥、壞死和免疫反應(yīng),胃泌素和生長(zhǎng)抑素調(diào)節(jié)失衡,胃酸分泌異常,胃部疾病,幽門螺桿菌侵襲性感染進(jìn)程,幽門螺桿菌侵襲性感染進(jìn)程,,,毒素,胃泌素,生長(zhǎng)抑素,,宿主,,胃粘膜損傷,,,直接,免疫反應(yīng),,失,衡,Hp定值,,,胃酸分泌異常,Hp致病因素,Hp產(chǎn)生的尿素酶（Ure）能將尿素分解為

5、氨和二氧化碳，氨在Hp周圍形成“氨云”，影響胃壁細(xì)胞表面的局部微環(huán)境，形成細(xì)胞損傷；,Hp能夠產(chǎn)生細(xì)胞毒素：空泡細(xì)胞毒素（VacA）細(xì)胞毒素相關(guān)基因A蛋白(Cag A)；,90%的十二指腸潰瘍和80%的胃潰瘍都是由HP引起的，同時(shí)與胃癌的發(fā)生密切相關(guān)，1994年世界衛(wèi)生組織已將HP定為Ⅰ類致癌因子；,Hp的致病因素主要： 尿素酶 細(xì)胞毒素 鞭毛 粘附素 超氧化物歧化酶 活性氧

6、 細(xì)胞因子,Vac A：是對(duì)上皮細(xì)胞有害的細(xì)胞毒素，稱之為空泡毒素，存在于細(xì)胞的外壁，可使上皮細(xì)胞因空泡形成而遭受破壞。 Cag A：細(xì)胞毒素相關(guān)基因A蛋白，可影響細(xì)胞毒素的表達(dá)。 有研究證實(shí)：含Cag A單克隆抗體陽性者比陰性者，患胃癌的危險(xiǎn)性高4倍。,Hp的致病因素,細(xì)胞毒素 Cag A、Vac A被認(rèn)為Hp最重要的致病因子：,胃黏膜相關(guān)性淋巴組織（MALT）淋巴瘤：早期根除HP，胃MALT淋巴瘤可以縮小或消失；根除H

7、p 已成為Hp 陽性低級(jí)別胃MALT 淋巴瘤的一線治療方法。胃癌：世界衛(wèi)生組織已將HP列為Ⅰ類致癌因子；HP感染率與胃癌發(fā)生率明顯正相關(guān)；HP主要定植部位與胃癌好發(fā)部位一致；,慢性胃炎：淺表性胃炎；彌漫性胃竇炎；多灶性萎縮性胃炎；HP持續(xù)感染，淺表性胃炎可發(fā)展為萎縮性胃炎、腸上皮化生和非典型增生（上皮內(nèi)瘤變），上述病變都屬于癌前病變；消化性潰瘍：HP的發(fā)現(xiàn)是消化性潰瘍?cè)诎l(fā)病機(jī)制及病因?qū)W的革命；“沒有胃酸就沒有潰瘍”；

8、“沒有HP就沒有潰瘍和潰瘍復(fù)發(fā)”；,HP與消化系統(tǒng)疾病,心腦血管疾?。汗跔顒?dòng)脈硬化性心臟?。–HD）；缺血性心臟??；腦血管疾病，中風(fēng)等；偏頭痛和原發(fā)雷諾現(xiàn)象；血液系統(tǒng)疾?。喝辫F性貧血；特發(fā)性血小板減少性紫癜；白血病；代謝性疾病肥胖、糖尿病等；,幽門螺桿菌與胃外疾病,自身免疫性疾病類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、自身免疫性甲狀腺炎；干燥綜合征等；呼吸系統(tǒng)疾病慢性阻塞性肺疾病（COPD）；支氣管擴(kuò)張；精神性疾病自閉癥、抑郁癥等；

9、皮膚病慢性蕁麻疹；食物過敏；酒槽鼻；,Maastricht-Ⅳ國際共識(shí)中提出HP感染與不明原因缺鐵性貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癜癥、維生素B12缺乏等等相關(guān)性；近幾年，關(guān)于HP感染與其他疾病的發(fā)生，也受了很多重視，如肝膽疾病、腦血管病、皮膚病等等。,H.pylori 根除治療及存在問題,3,17,,幽門螺桿菌胃炎是一種感染性疾病—傳染病幽門螺桿菌胃炎無論有無癥狀、伴或不伴有消化性潰瘍和胃癌，均應(yīng)該定義為一種感染性疾病根除幽門螺

10、桿菌治療是改善消化不良癥狀的一線治療方案所有感染幽門螺桿菌的個(gè)體都需要接受根除治療,,三聯(lián)療法,四聯(lián)療法,序貫療法,,復(fù)合療法,,,,治療策略,PPIs + 兩種抗生素,PPIs + 兩種抗生素 + 鉍劑,PPIs + 兩種抗生素 7天PPIs + 另外兩種抗生素 14天,四聯(lián)療法為基礎(chǔ)中藥輔助治療微生物輔助治療,抗生素+PPIs為基礎(chǔ)的治療策略,根除幽門螺桿菌中的臨床問題,隨著Hp 耐藥率的上升，標(biāo)準(zhǔn)三聯(lián)療法( PPI + 克

11、拉霉素+ 阿莫西林或PPI + 克拉霉素+ 甲硝唑) 的根除率已低于或遠(yuǎn)低于80%。,推薦用于根除治療中抗菌藥物，甲硝唑耐藥率60% ～ 70%，克拉霉素達(dá)20% ～ 38%，左氧氟沙星達(dá)30% ～38%，耐藥顯著影響根除率; 此外抗生素使用的副作用，不良反應(yīng)發(fā)生率高，進(jìn)而導(dǎo)致患者依從性差；,抗生素的耐藥,抗生素的副作用,抗生素的濫用,,根治 HP 治療方案的難點(diǎn),根除幽門螺桿菌中難點(diǎn),21,“發(fā)現(xiàn)即根除”策略是否適合我國？,高

12、Hp感染率：Hp感染率超過50%，引起胃癌患者只占1%？Hp都是有害菌嗎？過分根除是否會(huì)引發(fā)菌群紊亂？,臨床根除幽門螺桿菌的思考,,,,,,,H.pylori 分型檢測(cè)的重要意義,4,應(yīng)對(duì)措施,解決問題的辦法,醫(yī)生：有明確適應(yīng)癥再使用抗生素；精準(zhǔn)診斷：查明致病病原體；辨別有效抗生素；精準(zhǔn)治療：制定個(gè)體化精準(zhǔn)治療方案；病情跟蹤；抗生素療效跟蹤；患者：正確選擇抗生素藥物和治療方式；普及合理使用抗生素知識(shí)；,

13、準(zhǔn)確檢測(cè)/診斷幽門螺桿菌的重要性,幽門螺桿菌的研究是胃腸道領(lǐng)域最熱門的研究課題：1999年，第一次全國幽門螺桿菌專家共識(shí)會(huì)在海南召開；“1999海南共識(shí)”2000年，“中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化疾病分會(huì)幽門螺桿菌學(xué)組 ”正式成立；香港大學(xué)瑪麗醫(yī)院林兆鑫教授指出：“越來越廣泛的檢測(cè)和治療HP感染的過程中，出現(xiàn)的第二個(gè)問題就是耐藥性和感染復(fù)發(fā)率”；中華醫(yī)學(xué)會(huì)消化學(xué)會(huì)、全國幽門螺桿菌學(xué)組副組長(zhǎng)胡伏蓮教授在“中國幽門螺桿菌研究現(xiàn)狀”中指出：“HP耐

14、藥性是HP根除失敗的主要原因”；幽門螺桿菌的清除中外要有別，中國的清除計(jì)劃要依據(jù)中國國情來建立，不能盲目參照國外方案！在中國，幽門螺旋桿菌的分型性剖析非常重要。,幽門螺桿菌共識(shí),H.pylori 的毒力因子與分型,H.pylori 菌株的基因型多態(tài)性與其致病性有密切的關(guān)系，其中最主要的是空泡毒素A(vacA)和細(xì)胞毒相關(guān)基因(cagA)蛋白。,H.pylori 的檢測(cè)分型,H.pylori 的毒力分型與致病性的關(guān)系,國內(nèi)外研究表明，95

15、％的十二指腸潰瘍、75％的胃潰瘍病人、80％以上的胃癌病人感染的是CagA陽性I型H.pylori 。,幽門螺桿菌IgG抗體分型檢測(cè)系統(tǒng) ——泰州欣康基因數(shù)碼科技有限公司,5,泰州欣康基因數(shù)碼科技有限公司坐落于中國國家級(jí)醫(yī)藥高新科技園區(qū)——江蘇泰州中國醫(yī)藥城，成立于 2012年2月，是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售和服務(wù)于一體的生物高新科技創(chuàng)新企業(yè)。公司所生產(chǎn)的組合式生物芯片獲得了行業(yè)最高級(jí)別的知識(shí)產(chǎn)權(quán)獎(jiǎng)項(xiàng)——中國專利

16、金獎(jiǎng)和聯(lián)合國世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織金獎(jiǎng)。,公司介紹,,系統(tǒng)構(gòu)成,幽門螺桿菌檢測(cè)芯片,蛋白生物芯片閱讀儀,數(shù)據(jù)報(bào)告,,,所生產(chǎn)的組合式生物芯片獲得了行業(yè)最高級(jí)別的知識(shí)產(chǎn)權(quán)獎(jiǎng)項(xiàng)——中國專利金獎(jiǎng)和聯(lián)合國世界知識(shí)產(chǎn)權(quán)組織金獎(jiǎng)，同時(shí)取得兩項(xiàng)實(shí)用新型專利。,,產(chǎn)品質(zhì)量體系認(rèn)證,,研發(fā)技術(shù)團(tuán)隊(duì),采用微量點(diǎn)樣等方法，將大量生物大分子有序地固化于硝酸纖維膜表面；生物大分子組成密集二維分子排列；生物大分子與待測(cè)物結(jié)構(gòu)形成抗體復(fù)合物，并顯色；電荷偶聯(lián)攝影像機(jī)

17、（CCD）對(duì)雜交信號(hào)的強(qiáng)度進(jìn)行快速分析；判斷待測(cè)樣品中靶分子的數(shù)量；,芯片原理,,,,細(xì)胞毒素相關(guān)基因A蛋白，可影響細(xì)胞毒素的表達(dá)，誘導(dǎo)宿主胃粘膜局部產(chǎn)生多種細(xì)胞因子。 血清中檢測(cè)到Gag A抗體是Hp感染的一個(gè)高度特異性標(biāo)志，在慢性胃炎、胃和十二指腸潰瘍、胃癌中，Cag A抗體的陽性率分別可以高達(dá)67.54%、73.17%、9.00%、53.33%。,,VacA因其可致細(xì)胞空泡變性而得名，與消化性潰瘍密切相關(guān)，從消化性潰瘍患者分離到

18、VacA陽性菌株的頻率比慢性胃炎高。,,,Hp蛋白芯片篩查項(xiàng)目,尿素酶是Hp主要抗原之一，也是Hp感染后誘導(dǎo)胃粘膜炎癥反應(yīng)的重要誘發(fā)因子之一，所有的野生型的Hp都產(chǎn)生尿素酶，Hp是人胃內(nèi)產(chǎn)生高活性尿素酶的唯一菌株，可以引起Hp感染患者的血清中抗Hp IgG和IgA的滴度顯著升高，因此可以確定是否存在Hp感染，并可以判定感染嚴(yán)重程度和抗Hp療效。,指導(dǎo)臨床合理用藥,分型檢測(cè)，細(xì)分患者類型，服務(wù)于臨床精準(zhǔn)治療和個(gè)體化治療；指導(dǎo)臨床合理用藥，

19、打擊抗生素濫用，建立行業(yè)金標(biāo)準(zhǔn)；,Hp抗體分型檢測(cè)的重要意義,臨床常用HP檢測(cè)方法比較,幽門螺桿菌非侵入性診斷方法,,,蛋白芯片技術(shù)的發(fā)展進(jìn)程,H.pylori 分型檢測(cè)蛋白芯片滿足臨床精準(zhǔn)治療的需求，指導(dǎo)臨床合理用藥具有巨大意義,幽門螺桿菌IgG抗體分型檢測(cè)系統(tǒng)臨床研究,6,臨床研究（一）,蛋白芯片檢測(cè)Hp抗體與Bolt比較,研究單位：吉林省第三人民醫(yī)院 遼寧省第三人民醫(yī)院

20、 遼寧中醫(yī)院大學(xué)附屬第三醫(yī)院,1050例樣本檢測(cè)結(jié)果,結(jié)果：陽性符合率：97.90%；陰性符合率：98.21%；總體符合率：98.1%；,欣康生產(chǎn)的IgG抗體檢測(cè)試劑盒（蛋白芯片）與深圳伯勞特生物制品有限公司的抗體分型試劑盒（免疫印跡法）檢測(cè)結(jié)果一致性較好。,適 用 人 群,適用人群1、普通人群體檢 ：1994年世界衛(wèi)生組織（WHO）已將HP列為Ⅰ類致癌因子，我國的HP感染率達(dá)到40%-60%。2、消化

21、系統(tǒng)疾病患者：慢性胃炎、十二指腸和胃潰瘍等患者，應(yīng)及早進(jìn)行針對(duì)H.pylori 病菌進(jìn)行篩查。3、兒童和青少年人群：研究表明兒童、青少年攜帶H.pylori 的比例很高，多為口口相傳或飲食衛(wèi)生所導(dǎo)致，因此兒童和青少年的早期篩查尤為重要。4、飲食不規(guī)律者：長(zhǎng)期熬夜加班、飲酒吸煙、飲食不規(guī)律者、需定期進(jìn)行H.pylori 病菌進(jìn)行篩查。5、接受治療后患者：曾患有胃炎、胃潰瘍、胃癌等疾病患者，定期進(jìn)行檢查。,實(shí)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)幽門螺桿菌Cag