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文檔簡介
1、作物雜志Crops廖俊杰李艷李英慧摘要為適應草莓組培苗工廠化生產(chǎn)的要求,對工作中積累下的關于草莓組培苗生產(chǎn)的經(jīng)驗進行了總結(jié)和分析,希望能降低生產(chǎn)成本、促進草莓生產(chǎn)的規(guī)模化、產(chǎn)業(yè)化。關鍵詞草莓;工廠化;生產(chǎn)成本植物組織培養(yǎng)技術不但在花藥培養(yǎng)單倍體、優(yōu)良品種選育、體細胞融合和種質(zhì)保存等研究領域發(fā)揮了重要的作用,而且廣泛地用于植物無性系快速繁殖、脫毒苗的培育等生產(chǎn)中。生產(chǎn)實踐已經(jīng)證明,草莓脫毒組培苗不但具有優(yōu)良的農(nóng)藝性狀和抗性,而且可以顯著地
2、增加產(chǎn)量、改良果實品質(zhì)。近幾年,草莓的組織培養(yǎng)技術已日趨完善,而這種組織培養(yǎng)技術能否在我國草莓生產(chǎn)中發(fā)展普及,主要取決于能否使組培苗的生產(chǎn)成本得到有效的降低,既讓商家獲益,又讓草莓苗的價格低到農(nóng)戶可以接受,從而促進我國的草莓生產(chǎn),推動草莓業(yè)的發(fā)展?;诮鼛啄陮Σ葺M織培養(yǎng)技術的研究及在生產(chǎn)工作中積累的實踐經(jīng)驗,就如何降低生產(chǎn)成本提出幾項改良措施,僅供參考。1培養(yǎng)瓶的選擇在傳統(tǒng)的植物組織培養(yǎng)中,多以玻璃三角瓶為培養(yǎng)容器,其優(yōu)點是透光性好、
3、輕便,非常適用于科學研究;其缺點是價格高、易碎、容積小,在大批量的生產(chǎn)中就會相應地增加生產(chǎn)成本?,F(xiàn)在市場上出售的柱形塑料瓶可彌補這個缺點,其容積大、價格便宜、使用期長,雖然透光性不如三角瓶好,但實踐證明,對草莓苗的生長不會有太大的影響,而且可以提高工作效率。如買不到這種塑料瓶,可以用250mL的玻璃罐頭瓶代替,用封口膜封口。在生產(chǎn)中以這兩種培養(yǎng)瓶為培養(yǎng)容器時要特別注意滅菌處理,因為這種大容積培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基的廖俊杰,廣東輕工職業(yè)技術學院食
4、品與生物工程系,510300,廣州李艷,李美慧【通訊作者)遼寧師范大學遼寧省植物基因工程重點實驗室,l1602~大連市收稿日期:2005—06—1640體積也會相應增大,一般在40mL左右,如按常規(guī)滅菌,容易造成滅菌的不徹底,所以要適當?shù)难娱L滅菌時間。而且罐頭瓶等培養(yǎng)瓶呈圓柱形,放人消毒筒內(nèi)進行滅菌時如排列緊密,瓶與瓶之間幾乎不留空隙,不利于蒸氣的流通和熱交換,使培養(yǎng)基升溫緩慢,其中的雜菌不能被完全殺滅,因此在滅菌時要注意消毒筒內(nèi)培養(yǎng)瓶
5、不要放得太緊,留出一定的空隙。因為體積大、通氣性好、容器上部空間相對較大,草莓組培苗在塑料瓶和罐頭瓶等柱形培養(yǎng)容器中的接種密度可適當增加,在生長培養(yǎng)基上的接種密度可達到20瓶,而在lOOmL的三角瓶中的接種密度一般為10瓶,雖然使用的培養(yǎng)基量也有所增加(由30mL增加到40mL),但總的來講,顯著地提高了工作效率,相應地降低了生產(chǎn)成本。2培養(yǎng)基的組成在初代增殖培養(yǎng)階段盡可能地增加繁殖系數(shù)可以降低生產(chǎn)成本,但是增加繁殖系數(shù)就意味著增加培養(yǎng)
6、基內(nèi)的激素含量,這樣就會降低組培苗的質(zhì)量,比如加大玻璃化苗的比例,影響其后續(xù)生長,因此繁殖系數(shù)的增加要適當。在生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn),配置培養(yǎng)基時以食用白砂糖代替蔗糖、自來水代替蒸餾水可以降低成本,同時對組培苗的培養(yǎng)不會產(chǎn)生影響。幾種有機成分對草莓組培苗的生長影響不大,適當?shù)臅r候可以省去。移栽前的壯苗培養(yǎng)基的體積很重要,lOOmL的三角瓶加入20mL培養(yǎng)基,培養(yǎng)3O天后,組培苗葉色濃綠、生長健壯、葉柄含水量少;而加入30mL培養(yǎng)基時,組培苗的葉柄細
7、嫩、含水量大,移栽后易腐爛、難成活。草莓組培苗移栽時帶根與否在相同培養(yǎng)條件下對其成活率的影響不大,完全可以省略生根培養(yǎng)。3污染組培苗的處理在草莓組培苗的工廠化生產(chǎn)中,經(jīng)常碰到組培苗及培養(yǎng)基被細菌、霉菌、酵母菌、放線菌等污染的情況,輕者導致組培苗生長勢弱并影響下一代的生長,維普資訊作物雜志Crops重者會導致組培苗的大面積死亡,大幅度提高草莓組培苗的生產(chǎn)成本,造成較大的經(jīng)濟損失。因此,有效地防止和抑制污染、保證組培材料正常生長及分化、排除
8、不必要的損失也是降低生產(chǎn)成本的有效措施。由霉菌和酵母菌等真菌引起的污染,其特點是易于被觀察到,但污染迅速且難于控制,往往造成較大的損失。目前還沒有有效的控制真菌污染的方法。生產(chǎn)中,以青霉菌的污染最多,作者在利用殺菌劑抑制蘋果和草莓試管苗青霉菌效果試驗中發(fā)現(xiàn),加入75%百菌清可濕性粉劑到培養(yǎng)基中可有效地控制青霉菌的污染。在處理真菌污染的組培苗和培養(yǎng)瓶時要特別小心,如果污染的數(shù)量較小或污染的材料不是特別重要時,最好不要開蓋,直接進行高壓滅菌
9、。因為一旦打開培養(yǎng)瓶的蓋子或封口膜,真菌分孢子就有可能飛出來污染周圍的環(huán)境,會造成更大面積的污染。由各種細菌及內(nèi)生菌引起的污染,其特點是有很長的潛伏期,有時在繼代幾次后才表現(xiàn)出來?,F(xiàn)在生產(chǎn)中傾向于使用各種抗生素來控制細菌的污染。但抗生素的種類很多,作用也不盡相同,使用不當,就會給生產(chǎn)造成損失。而且細菌的種類也不盡相同,因此,在用抗生素防治草莓組培苗工廠化生產(chǎn)中出現(xiàn)的細菌污染時,特別是處理大面積污染時,要預先做好預備試驗。不但要考慮抗生素
10、的生物屬性,如可溶性、穩(wěn)定性、廣譜性及副作用的大小,還要分析pH值和培養(yǎng)基對抗生素效率的影響以及引起細菌抗性的可能性,更要觀察草莓組培苗的反應??股乜梢灾苯蛹尤氲脚囵B(yǎng)基中,也可以用抗生素直接浸泡污染的組培苗。4移栽移栽后加強對組培苗的管理是草莓工廠化生產(chǎn)中提高成苗系數(shù)的主要措施之一,而成苗系數(shù)的提高會相應地降低生產(chǎn)成本。41移栽基質(zhì)珍珠巖是國內(nèi)外普遍采用的無土栽培材料,在水分缺乏時顆粒間松散,無結(jié)構,但在水分充足的條件下顆粒間較緊密,
11、能形成類土壤結(jié)構,特點是保水性好,但排水性差,易發(fā)生病害。與保水性差、排水性好的河沙以5:1的比例混合使用,使用前經(jīng)充分滅菌,生產(chǎn)結(jié)果表明效果較好。其他無土基質(zhì)如蛭石、鋸木、泥炭等在配置合適的情況下也可用于草莓組培苗的移栽。42水分的控制濕度是影響組培苗移栽成活率的主要限制因子之一,特別是未生根之前,組培苗從基質(zhì)中吸收水分的能力較差,要隨時注意保持基質(zhì)的水分,以利于組培苗的根系發(fā)育,提高成活率;也可以通過加蓋塑料薄膜的方法保水,但也要注
12、意到水分過多會影響組培苗的生長甚至可引起植株腐爛,特別是在高濕高溫條件下,易引發(fā)病害的發(fā)生。一旦病害發(fā)生,要嚴格控制澆水并噴施殺菌劑。在無病害發(fā)生時,定期使用殺菌劑噴霧也能顯著提高成活率,但不要太頻繁,1周1次即可。43光照的控制移栽早期光照對草莓組培苗的成活率有較大的影響。雖然莖葉的生長需要充分的光照條件以滿足植株的光合作用,但剛移栽的組培苗在光照強、蒸發(fā)量大的情況下,因為沒有根系,無法及時補充水分而散失過多的水分,導致成活率降低。對
13、強光照的控制一般通過加蓋遮陽網(wǎng)或草簾、減小光照強度來調(diào)節(jié),待組培苗生根后,去除遮陽網(wǎng)或草簾來增加光照,培養(yǎng)壯苗。44養(yǎng)分的供給在移栽的早期特別是組培苗未生根時,不要供給營養(yǎng)液。因為此時的組培苗對養(yǎng)分的吸收能力很弱,且體內(nèi)貯存有足夠的養(yǎng)分供給早期生長,噴施的營養(yǎng)液的絕大部分浪費了。等組培苗生根后再噴施營養(yǎng)液,營養(yǎng)液由025%尿素和0o4%的磷酸二氫鉀及MS的微量元素組成,MS的微量元素可先配置成200倍的濃縮液,噴施時再稀釋。同時注意在無
14、土基質(zhì)中的時間不宜過長,以l5天為宜,此時組培苗根系已建成,可以栽培到盛有腐殖土的營養(yǎng)缽中。對于草莓組培苗工廠化生產(chǎn)中的生產(chǎn)成本偏高的問題,許多研究者和生產(chǎn)者都在努力探討,希望降低草莓組培苗的價格,滿足市場的需要,推動草莓生產(chǎn)。但是目前還沒有簡便的解決方案,只能通過不斷地改進生產(chǎn)技術、優(yōu)化生產(chǎn)方案來降低生產(chǎn)成本,推進草莓組培苗工廠化生產(chǎn)的發(fā)展。本刊啟事最近兩個月以來,由于網(wǎng)絡不通和有病毒等原因,我刊網(wǎng)上投稿丟失現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生,為了保證作者
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