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1、西南大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)構(gòu)域TtAPuX21的研究姓名:謝晚彬申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師:謝和芳20060501西南大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要NDAE的定性分析表明:“ItAPuX21能與水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖結(jié)合,因此分別以不同濃度的水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖為底物,進(jìn)一步做NDAE的定量分析檢驗(yàn)TtAPuX2I與它們結(jié)合能力的強(qiáng)弱。分別以0006%、0012%、0025%、O050%和0100/oTJ(溶性淀粉
2、為底物,仍以BSA作為對(duì)照蛋白,做NDAE定量分析。結(jié)果顯示:BSA在每一張凝膠中的遷移距離相等;而淀粉濃度越高,TtAPuX21在凝膠中的遷移距離越小,表明其遷移受到的阻礙越大。以淀粉濃度C(O000%)為自變量(x),TtAPuX21在對(duì)照膠中的遷移距離D與其在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d之差D—d(mm)為依變量0),對(duì)C和D—d進(jìn)彳亍直線回歸分析。計(jì)算表明:兩變量C和D—d存在顯著的直線回歸關(guān)系,直線回歸方程為p=21760192x。從
3、回歸系數(shù)可知:淀粉濃度C每增加O001%,遷移距離之差Dd增大0192mm,因TtAPuX21在對(duì)照膠中的遷移距離D不變,故其在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d減少o192ram。簡(jiǎn)而言之,淀粉濃度C每增加o001%,TtAPuX21在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d減少0192mm。分別以0006%、0012%、0025%、O050%和O100%糊精為底物,做NDAE定量分析,結(jié)果表明:糊精濃度C每增加O001%,TtAPuX21在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d減少o
4、11Imm。分別以O(shè)050%、o100%、0200%、O300%和0400%普魯蘭糖為底物,做NDAE定量分析,結(jié)果表明:普魯蘭糖濃度C每增加0001%,“ItAPuX21在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d減少0025mna。綜上所述,水溶性淀粉、糊精和普魯蘭糖濃度C每增加0001%,“ItAPuX21在試驗(yàn)?zāi)z中的遷移距離d分別減少0192mm、0111mm和0025mm;表明TtAPuX21在試驗(yàn)?zāi)z中受水溶性淀粉的阻礙程度最大,受糊精韻阻礙程度次
5、之,受普魯蘭糖的阻礙程度最小;反應(yīng)出nAPuX21與水溶性淀粉的結(jié)合能力最強(qiáng),與糊精的結(jié)合能力次之,與普魯蘭糖的結(jié)合能力最弱。分別以不溶性淀粉和不溶性木聚糖為底物,通過(guò)SDSPAGE來(lái)檢驗(yàn)TtAPuX21是否能與它們結(jié)合。取TtAPuX21蛋白,與不溶性淀粉混合,冰上孵育1h,漂洗數(shù)次,再經(jīng)SDS變性處理后得樣品,進(jìn)行SDSPAGE檢驗(yàn)。結(jié)果顯示:SDS處理獲得的樣品其泳道沒有蛋白質(zhì)條帶,表明TtAPuX21不能與不溶性淀粉結(jié)合。同樣方
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