細(xì)胞工程復(fù)習(xí)精簡(jiǎn)版

1、1名詞解釋1.1.細(xì)胞工程：細(xì)胞工程：是指主要以細(xì)胞為對(duì)象，應(yīng)用生命科學(xué)理論，借助工程學(xué)原理與技術(shù)，有目的地利用或改造生物遺傳性狀，以獲得特定的細(xì)胞、組織產(chǎn)品或新型物種的一門(mén)綜合性科學(xué)技術(shù)。2.2.愈傷組織：愈傷組織：脫分化后的植物細(xì)胞經(jīng)過(guò)細(xì)胞分裂，產(chǎn)生無(wú)組織結(jié)構(gòu)、無(wú)明顯極性的松散的細(xì)胞團(tuán)，稱(chēng)之為愈傷組織（Callus）。3.3.外植體：外植體：主要指用于離體培養(yǎng)的植物或組織切段。4.4.極性（植物細(xì)胞）：極性（植物細(xì)胞）：細(xì)胞分化早期

2、的一個(gè)最主要現(xiàn)象就是極性的建立，它使細(xì)胞的一端與另一端之間顯示出結(jié)構(gòu)和生理化上的差別，細(xì)胞內(nèi)極性的建立是細(xì)胞分化開(kāi)始的第一步。5.5.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)：是模擬體內(nèi)生理環(huán)境使分離的動(dòng)物細(xì)胞在體外生存、增殖的一門(mén)技術(shù)。6.6.干細(xì)胞：干細(xì)胞：干細(xì)胞是一類(lèi)具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。7.7.動(dòng)物克?。簞?dòng)物克?。簞?dòng)物克隆是一種通過(guò)核移植過(guò)程進(jìn)行無(wú)性繁殖的技術(shù)。不經(jīng)過(guò)有性生殖過(guò)程，而是通過(guò)核移植生產(chǎn)遺傳結(jié)構(gòu)與細(xì)胞核供體相同動(dòng)物個(gè)體的技

3、術(shù)，就叫做動(dòng)物克隆。8.8.前體：前體：指某一代謝中間體的前一階段的物質(zhì)。9.9.細(xì)胞融合：細(xì)胞融合：是指使用人工方法使兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)胞合并形成一個(gè)細(xì)胞的技術(shù)。10.10.單克隆抗體：?jiǎn)慰寺】贵w：經(jīng)過(guò)免疫哺乳類(lèi)動(dòng)物單一的B淋巴細(xì)胞，可以分泌單一性抗體，這種具有特異性的、同性質(zhì)的抗體為單克隆抗體。11.11.組織工程；組織工程；是利用生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)、工程學(xué)原理與技術(shù)，單獨(dú)或組合地利用細(xì)胞、生物材料、細(xì)胞因子實(shí)現(xiàn)組織修復(fù)或再生的一門(mén)技術(shù)

4、。12.12.動(dòng)物克??；動(dòng)物克??；重復(fù)同7，另克隆動(dòng)物一般指采用核移植、胚胎移植技術(shù)得到的動(dòng)物。13.13.細(xì)胞轉(zhuǎn)化：細(xì)胞轉(zhuǎn)化：是指細(xì)胞發(fā)生遺傳改變而產(chǎn)生永生化，即由限定性細(xì)胞系轉(zhuǎn)化為連續(xù)性細(xì)胞系，可以在體外進(jìn)行無(wú)限傳代和生長(zhǎng)繁殖。14.14.胚胎干細(xì)胞：胚胎干細(xì)胞：簡(jiǎn)稱(chēng)ES(EmbryoStem)細(xì)胞，是一種全能干細(xì)胞，它是從著床前胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng)分離的一種全能性細(xì)胞系，可以分化成任何一種組織類(lèi)型的細(xì)胞。1

5、5.15.動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)：動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)：是指在人工條件下（設(shè)定pH、溫度、溶氧等）高密度大量增殖的技術(shù)。培養(yǎng)流程：組織——消化——原代培養(yǎng)——傳代培養(yǎng)（細(xì)胞系與細(xì)胞株）——小規(guī)模培養(yǎng)（轉(zhuǎn)瓶等）——大規(guī)模培養(yǎng)（生物反應(yīng)器）——產(chǎn)品。16.16.看護(hù)培養(yǎng)：看護(hù)培養(yǎng)：用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來(lái)看護(hù)單個(gè)細(xì)胞，使其持續(xù)分裂和增殖。這塊愈傷組織被稱(chēng)為看護(hù)組織。具體方法：將單個(gè)細(xì)胞接種于濾紙上，再置于愈傷組織之上培養(yǎng)。優(yōu)點(diǎn)是：簡(jiǎn)便、成功率高

6、。缺點(diǎn)是不能在顯微鏡下直接觀察。17.17.微載體：微載體：是直徑60250μm的適用于貼壁依賴(lài)型細(xì)胞生長(zhǎng)的微粒。一般是由天然葡聚糖或者各種合成的聚合物組成。18.18.獲能：獲能：精子獲能是指精子獲得穿透卵子透明帶能力的過(guò)程。19.19.體細(xì)胞雜交：體細(xì)胞雜交：將兩個(gè)親本不同的體細(xì)胞的原生質(zhì)體經(jīng)人工誘導(dǎo)融合并培養(yǎng)再生成體的過(guò)程。20.多倍體多倍體：是指?jìng)€(gè)體細(xì)胞中含有超過(guò)正常數(shù)目染色體的個(gè)體。二.簡(jiǎn)答題簡(jiǎn)答題.1.1.動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)

7、定義及有哪些培養(yǎng)系統(tǒng)？動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)定義及有哪些培養(yǎng)系統(tǒng)？動(dòng)物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)（celllargescaleculture）：是指在人工條件下（設(shè)定pH、溫度、溶氧等）高密度大量增殖的技術(shù)。培養(yǎng)系統(tǒng)：轉(zhuǎn)瓶（管）培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)，中空纖維生物反應(yīng)器等。3（2）高pH的高濃度Ca2離子誘導(dǎo)融合：鈣離子中和原生質(zhì)體膜或細(xì)胞膜表明表面電荷，使彼此緊密接觸，決定質(zhì)膜的穩(wěn)定性和可塑性；高pH能改變質(zhì)膜的表面電荷，利于細(xì)胞融合。（3）PEG誘導(dǎo)：P

8、EG分子具有輕微的負(fù)極性，可以與具有正極性基團(tuán)的水分子、蛋白質(zhì)、碳水化合物形成氫鍵，在相鄰的原生質(zhì)體間起到分子橋的作用，使原生質(zhì)體接觸。當(dāng)PEG分子被洗脫時(shí)，膜電荷發(fā)生紊亂而重新分配。此時(shí)，一種原生質(zhì)體上帶正電的基團(tuán)可能與另外一個(gè)原生質(zhì)體中帶負(fù)電的基團(tuán)相連，導(dǎo)致原生質(zhì)體融合。（4）高Ca2和pH誘導(dǎo)PEG結(jié)合：誘導(dǎo)在高Ca2和pH溶液的作用下，將與質(zhì)膜結(jié)合的PEG分子洗脫，將進(jìn)一步加劇電荷平衡失調(diào)，從而提高融合的幾率。7.7.胚胎干細(xì)胞

9、分化潛能評(píng)價(jià)？胚胎干細(xì)胞分化潛能評(píng)價(jià)？（1）體外分化實(shí)驗(yàn)：將獲得的胚胎干細(xì)胞制成懸浮液培養(yǎng)在鋪有明膠的培養(yǎng)皿中，一段時(shí)間后部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)，分化成神經(jīng)、肌肉、軟骨等不同細(xì)胞。（2）體內(nèi)分化實(shí)驗(yàn)：將一定量的胚胎干細(xì)胞注射進(jìn)同源動(dòng)物皮下，有組織瘤生成。（3）嵌合體形成：將胚胎干細(xì)胞通過(guò)聚集法或者注射法與受體胚胎結(jié)合，并且將胚胎移植進(jìn)同期化代孕母受體，各自表達(dá)自己的基因型，最終得到嵌合體動(dòng)物。（4）核移植：以胚胎干細(xì)胞作為核供體移植到去核卵母

10、細(xì)胞中，觀察重組胚胎是否能正常發(fā)育、產(chǎn)生個(gè)體。8.8.人工種子結(jié)構(gòu)上從里到外分為哪幾部分，分別是什么？人工種子結(jié)構(gòu)上從里到外分為哪幾部分，分別是什么？結(jié)構(gòu)上從外向里包括三部分：（1）人工種皮外層，保護(hù)胚狀體中的水分免于喪失和防止外部力量沖擊；（2）人工胚乳含有必需的營(yíng)養(yǎng)成分和某些植物激素；（3）胚狀體或芽。9.9.影響植物細(xì)胞次級(jí)代謝產(chǎn)物的因素？（下面內(nèi)容可以只答個(gè)大概）影響植物細(xì)胞次級(jí)代謝產(chǎn)物的因素？（下面內(nèi)容可以只答個(gè)大概）（1）生

11、物因素：）生物因素：細(xì)胞株：細(xì)胞株：穩(wěn)定、高產(chǎn)、生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞株是細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)代謝產(chǎn)物的前提；細(xì)胞凋亡：細(xì)胞凋亡：細(xì)胞凋亡是植物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中不可避免的現(xiàn)象，但是可以通過(guò)條件改變進(jìn)行調(diào)控來(lái)減少細(xì)胞凋亡；細(xì)胞團(tuán)：細(xì)胞團(tuán)：細(xì)胞團(tuán)的形成影響穩(wěn)定的懸浮體系的維持，同時(shí)造成了培養(yǎng)物的顯著異質(zhì)性，細(xì)胞團(tuán)表面與內(nèi)部的細(xì)胞存在營(yíng)養(yǎng)吸收和代謝產(chǎn)物分泌的差異。此外，細(xì)胞團(tuán)容易受剪切力影響而破碎，引起培養(yǎng)液粘度增加，致使氣體交換與傳遞受到影響。要保持

12、反應(yīng)器良好的混合效果。適當(dāng)大小的細(xì)胞團(tuán)有利于代謝產(chǎn)物積累；生物合成機(jī)制：生物合成機(jī)制：結(jié)合目標(biāo)產(chǎn)物進(jìn)行生物合成機(jī)制研究，揭示代謝途徑及誘導(dǎo)合成機(jī)制是細(xì)胞培養(yǎng)的重要生物學(xué)問(wèn)題，有利于指導(dǎo)建立優(yōu)化的培養(yǎng)工藝與技術(shù)。（2）化學(xué)因素：主要通過(guò)合適的培養(yǎng)基選擇來(lái)控制，包括營(yíng)養(yǎng)鹽、前體和調(diào)節(jié)因子等。）化學(xué)因素：主要通過(guò)合適的培養(yǎng)基選擇來(lái)控制，包括營(yíng)養(yǎng)鹽、前體和調(diào)節(jié)因子等。營(yíng)養(yǎng)鹽：一方面是保證植物細(xì)胞生物量的增長(zhǎng)；另外一方面是要保證細(xì)胞能合成和積累次

13、級(jí)代謝產(chǎn)物；前體：指某一代謝中間體的前一階段的物質(zhì)。缺乏某一種前體時(shí)細(xì)胞就不能合成某一種代謝物，如果在培養(yǎng)基中加入外源前體將會(huì)有助于合成該代謝產(chǎn)物或使其產(chǎn)量增加。誘導(dǎo)子：是指那些能夠與細(xì)胞發(fā)生相互作用，通過(guò)細(xì)胞內(nèi)一系列的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程，作用于與細(xì)胞次生代謝相關(guān)的基因表達(dá)，進(jìn)而改變細(xì)胞次生代謝相關(guān)酶的活力，最終使細(xì)胞次生代謝水平發(fā)生改變的物質(zhì)。反饋抑制：植物次級(jí)代謝產(chǎn)物在培養(yǎng)系統(tǒng)的積累有時(shí)會(huì)對(duì)目標(biāo)產(chǎn)物的合成具有反饋抑制?？梢圆捎昧骷影脒B續(xù)培