牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方

1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基，有時又稱為普通培養(yǎng)基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。其中牛肉膏為微生物提供碳源和能源，磷酸鹽、蛋白胨主要提供氮源，而NaCl提供無機(jī)鹽。在配制固體培養(yǎng)基時還要加入一定量瓊脂作凝固劑。瓊脂在常用濃度下96℃時溶化，一般實際應(yīng)用時在沸水浴中或下面墊以石棉網(wǎng)煮沸溶化，以免瓊脂燒焦。瓊脂在40℃時凝固，通常不被微生物分解利用。固體培養(yǎng)基

2、中瓊脂的含量根據(jù)瓊脂的質(zhì)量和氣溫的不同而有所不同。由于這種培養(yǎng)基多用于培養(yǎng)細(xì)菌（葷食）培養(yǎng)細(xì)菌（葷食），因此，要用稀酸或稀堿將其pH調(diào)至中性或中性或微堿性微堿性，以利于細(xì)菌的生長繁殖。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的配方如下：牛肉膏3g、蛋白胨10g、NaCl5g、瓊脂15—20g、水1000ml、pH74—76（7.0—8.0）三、器材牛肉膏，蛋白胨，NaCl，瓊脂；1molLNaOH，1molLHCl；試管，三角燒瓶，燒杯，量筒，玻棒，培養(yǎng)基分

3、裝器，扭力天平，牛角匙，高壓蒸汽滅菌鍋，pH試紙（pH55—90），棉花，牛皮紙，記號筆，麻繩，紗布等。四、操作步驟1稱量按培養(yǎng)基配方比例依次準(zhǔn)確地稱取牛肉膏、蛋白胨、NaCl放入燒杯中。牛肉膏常用玻棒挑取，放在小燒杯或表面皿中稱量，用熱水溶化后倒入燒杯。也可放在稱量紙上，稱量后直接放入水中，這時如稍微加熱，牛肉膏便會與稱量紙分離，然后立即取出紙片。蛋白胨很易吸潮，在稱取時動作要迅速。另外，稱藥品時嚴(yán)防藥品混雜，一把牛角匙用于一種藥品，

4、或稱取一種藥品后，洗凈、擦干，再稱取另一藥品，瓶蓋也不要蓋錯。2溶化在上述燒杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒攪勻，然后，在石棉網(wǎng)上加熱使其溶解。待藥品完全溶解后，補(bǔ)充水分到所需的總體積。如果配制固體培養(yǎng)基，將稱好的瓊脂放入已溶化的藥品中，再加熱溶化，在瓊脂溶化的過程中，需不斷攪拌，以防瓊脂糊底使燒杯破裂。最后補(bǔ)足所失的水分。3調(diào)pH在未調(diào)pH前，先用精密pH試紙測量培養(yǎng)基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培養(yǎng)基中逐滴加入1molL

5、NaOH，邊加邊攪拌，并隨時用pH試紙測其pH值，直至pH達(dá)76。反之，則用1molLHCl進(jìn)行調(diào)節(jié)。注意pH值不要調(diào)過頭，以避免回調(diào)，否則，將會影響培養(yǎng)基內(nèi)各離子的濃度。對于有些要求pH值較精確的微生物，其pH的調(diào)節(jié)可用酸度計進(jìn)行（使用方法，可參考有關(guān)說明書）。4過濾趁熱用濾紙或多層紗布過濾，以利結(jié)果的觀察。一般無特殊要求的情況下，這一步可以省去（本實驗無需過濾）。5分裝按實驗要求，可將配制的培養(yǎng)基分裝入試管內(nèi)或三角燒瓶內(nèi)。分裝裝置見

6、圖Ⅴ1。分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。(1)液體分裝分裝高度以試管高度的14左右為宜。調(diào)節(jié)時應(yīng)逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部過酸或過堿破壞培養(yǎng)基成分。3.培養(yǎng)基在使用時也可以做成不含瓊脂的液體培養(yǎng)基，用于菌類的震蕩培養(yǎng)。4.培養(yǎng)基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量為0.1gL培養(yǎng)基，主要是為了抑制細(xì)菌的生長，減少干擾性高氏1號培養(yǎng)及配方：培養(yǎng)放線菌用，改良的高氏可溶性淀粉2g，KNO30.1g

7、，K2HPO40.05g，MgSO4?7H2O0.05g，NaCl0.05g，F(xiàn)eSO4?7H2O0.001g（母液），瓊脂2g，自來水100mL，pH7.2～7.4，滅菌1.05kgcm2，20min配制時，先用少量冷水，將淀粉調(diào)成糊狀，倒入少于所需水量的沸水中，在火上加熱，邊攪拌邊依次逐一溶化其他成分，溶化后，補(bǔ)足水分到100ml，調(diào)pH，121℃滅菌20min。高溫滅菌后，倒平皿前加入10%酚2滴至100ml培養(yǎng)基中混勻，將培養(yǎng)基