植物病害研究法——答案

1、植物病害研究法植物病害研究法1.1.列舉五個(gè)你熟悉的中英文文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)。列舉五個(gè)你熟悉的中英文文獻(xiàn)檢索數(shù)據(jù)庫(kù)。中文：維普、萬方、CNKI三大期刊知識(shí)庫(kù)，超星、書生之家書籍庫(kù)。英文：Pubmed、SD、EBSCO、Springer、NPG、EiVillage、CAS、Kluwer、ProQuest、Ovid。2.2.談?wù)勅绾巫龊梦墨I(xiàn)檢索工作。談?wù)勅绾巫龊梦墨I(xiàn)檢索工作。（1）根據(jù)題目確定關(guān)鍵詞，隨著對(duì)題目的深入了解，增加關(guān)鍵詞，保證文章的

2、查全率。（2）選擇合適的數(shù)據(jù)庫(kù)，常用的中文數(shù)據(jù)庫(kù)有……英文數(shù)據(jù)庫(kù)有……（3）使用相應(yīng)的檢索技術(shù)，如布爾邏輯算符、位置檢索、截詞、優(yōu)先算符等，來提高檢索的效率，另外，需要注意of、the、in、she、he、tobe、as、because、if、when等為禁用詞，在檢索時(shí)自動(dòng)忽略。（4）將檢索到的文獻(xiàn)進(jìn)行篩選和歸類：分精讀與速讀兩類；只保留重要的資料；精細(xì)分類，并錄入數(shù)據(jù)庫(kù)。（5）科學(xué)合理使用文件管理軟件，如Endnote和Refere

3、nceManage。（6）學(xué)會(huì)走進(jìn)文獻(xiàn)、走出文獻(xiàn)，從文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)Idea。3.3.談?wù)勎墨I(xiàn)檢索工作對(duì)科研工作者的重要性。談?wù)勎墨I(xiàn)檢索工作對(duì)科研工作者的重要性。第一，有助于利用和掌握文獻(xiàn)資料，縮短查找文獻(xiàn)資料所花費(fèi)的時(shí)間。在科學(xué)研究活動(dòng)中，搜集、掌握足夠的文獻(xiàn)資料是研究工作的重要組成部分，往往要耗費(fèi)較多的時(shí)間，而文獻(xiàn)數(shù)量的成倍增長(zhǎng)，各學(xué)科的相互滲透導(dǎo)致的文獻(xiàn)交叉與分散化，使查找所需文獻(xiàn)更加固難。在這種情況下，文獻(xiàn)檢索的功能和作用，恰恰能解決

4、眾多繁雜的文獻(xiàn)與研究者特定需要之間的矛盾，能幫助研究者從浩如煙海的文獻(xiàn)中迅速、準(zhǔn)確地查找出所需專用文獻(xiàn)，達(dá)到節(jié)省時(shí)間和精力的目的。第二，有助于獲取最新知識(shí)，及時(shí)了解研究課題內(nèi)容所涉及的專業(yè)和相關(guān)學(xué)科的發(fā)展動(dòng)態(tài)，指導(dǎo)課題研究的順利進(jìn)行。第三，有助于開闊視野，擴(kuò)大知識(shí)面，借鑒他人之法，指引治學(xué)門徑，解決研究過程中的疑難問題。（3）提取液的澄清。從感病組織中獲得粗汁液后，提純過程中第一步是澄清提取液，在整個(gè)提純過程中是最重要的步驟。澄清的目的

5、是為了使病毒粒體和細(xì)胞組分分開而獲得盡可能少含雜質(zhì)的病毒沉淀。澄清汁液的有機(jī)溶劑，有些是水溶性的，如乙醇和正丁醇；另一類是水溶性很低的，如乙醚、四氯化碳、乙醚和四氯化碳的等量混合液（2050%）和氯仿（10%50%）等。針對(duì)具體的病毒可選擇TritonX100作為澄清劑。（4）濃縮及精提純。病毒的濃縮：當(dāng)穩(wěn)定的病毒達(dá)到最大限度澄清后，病毒濃縮過程可以進(jìn)一步除去上清液中大量非專一的寄主材料；一種方法可用2055%蔗糖墊沉淀病毒，能保護(hù)病毒

6、粒體完整；另一種有效的方法是病毒沉淀到含有聚乙二醇（PEG）溶液中。病毒的精提純：粗提純的病毒樣品中仍有少量的寄主球蛋白粒子，和一些與病毒粒子大小相似的寄主細(xì)胞內(nèi)含物；要獲得高純度的病毒制品，則需要在粗提純樣品的基礎(chǔ)上，進(jìn)行植物病毒的精提純；病毒精提純最常用的是密度梯度離心法和差速離心法。（5）產(chǎn)量和質(zhì)量的測(cè)定。影響植物病毒提純的因素：內(nèi)在因素（病毒在植物體內(nèi)的濃度、病毒形態(tài)和大小、株系、穩(wěn)定性）、外在因素（緩沖液種類、濃度及PH、附加

7、成分、澄清劑、離心力和密度梯度離心方式的選擇等）。6.6.植物病毒提純的原理？植物病毒提純的原理？在研究植物病毒時(shí)，往往需要把病毒從寄主組織內(nèi)提取出來加以純化以用于研究病毒的理化性質(zhì)、分子生物學(xué)特性及制備抗血清等。由于病毒既不能像其他微生物那樣用培養(yǎng)基來培養(yǎng)，更不能像細(xì)菌那樣在培養(yǎng)基上測(cè)定他們的生理生化特性。因此，必須將病毒組分從寄主組織中分離純化出來。植物病毒的提純主要指理化提純，即利用各種理化方法，根據(jù)病毒和寄主細(xì)胞組分的理化特性差