培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項

1、培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項1.培養(yǎng)基配方的選定同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應嚴格按其規(guī)定進行配制外一般均應盡量收集有關資料加以比較核對再依據自己的使用目的加以選用，記錄其來源。2培養(yǎng)基的制備記錄每次制備培養(yǎng)基均應有記錄，包括培養(yǎng)推各稱，配方及其來源和各種成份的牌號。最終pH值、消毒的溫度和時間制各的日期和制備者等，記錄應復制一份，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥椭朴涗涬S制好

2、的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。3.培養(yǎng)基成分的稱取培養(yǎng)基的各種成分必須精確稱取并要注意防止錯亂最好一次完成，不要中斷。可將配方置于傍側，每稱完一種成分即在配方上做出記號，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側，每種稱取完畢后，即移放于右側。完全稱取完畢后還應進行一次檢查。4.培養(yǎng)基各成份的混合和溶化培養(yǎng)基所用化學藥品均應是化學純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中，使細菌不易生長。最好使用不銹鋼鍋加熱溶化也可放

3、入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在鍋中溶化時、可先用溫水加熱并隨時擾動，以防焦化、如發(fā)現有焦化現象、該培養(yǎng)基即不能使用，應重新制備。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分完全溶化迄至煮沸。如為瓊脂培養(yǎng)基，應先用一部分水將瓊脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中，因蒸發(fā)而丟失的水分，最后必須加以補足。5.培養(yǎng)塞pH的初步調整培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應進行pH的初步調正

4、，因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，例如，牛肉浸液約可降低pH0.2.而腸浸液pH卻會有顯著的升高。因此，對這個步驟，操作者應隨時注意探索經驗、以期能掌握培養(yǎng)基的最終pH，保證培養(yǎng)基的質量。pH調正后，還應將培養(yǎng)基煮沸數分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。瓊脂斜面培養(yǎng)基應在滅菌后立即取出、待冷至5560℃時，擺置成適當斜面、待其自然凝固。9.培養(yǎng)基的質量測試每批培養(yǎng)基制備好以后應仔細檢查一遍：如發(fā)現破裂、水分浸入、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)

5、基沾染等、均應挑出棄去。并測定其最終pH。將全部培養(yǎng)基放入361℃恒溫箱培養(yǎng)過夜，如發(fā)現有菌生長，即棄去。用有關的標準菌株接種12管或瓶培養(yǎng)基，培養(yǎng)2448小時，如無菌生長或生長不好。應追查原因并重復接種一次，如結果仍同前，則該批培養(yǎng)基即應棄去，不能使用。10.培養(yǎng)基的保存培養(yǎng)基應存放于冷暗處，最好能放于普通冰箱內。放置時間不宜超過一周，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制各記錄副頁或明顯標簽。培養(yǎng)基的常規(guī)配制

6、程序培養(yǎng)基的常規(guī)配制程序一、目的要求了解培養(yǎng)基的配制原理。了解培養(yǎng)基常規(guī)配制程序。了解培養(yǎng)基配制過程各環(huán)節(jié)的要求和注意事項。二、基本原理正確掌握培養(yǎng)基基的配制方法是從事微生物學實驗工作的重要基礎，由于微生物種類及代謝類型的多樣性，因而用于培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的種類也很多，它們的配方及配制方法雖各有差異。但一般培養(yǎng)基的配制程序卻大致相同，例如器皿的準備，培養(yǎng)基的配制與分裝，棉塞的制作，培養(yǎng)基的滅菌，斜面與平板的制作以及培養(yǎng)基的無菌檢查等基本環(huán)