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文檔簡介
1、含重金屬鉛、鋅的污染物通過各種途徑進(jìn)入土壤,不僅影響了農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量與品質(zhì),而且污染了大氣和水環(huán)境的質(zhì)量,并通過食物鏈危害動物和人類的生命健康。近年來,土壤重金屬鉛、鋅污染問題已成為了土壤重金屬污染治理的一個(gè)研究熱點(diǎn)。研究重金屬污染條件下土壤微生物的群落結(jié)構(gòu)多樣性能揭示微生物對重金屬污染環(huán)境的適應(yīng)、修復(fù)策略,為環(huán)境治理提供理論依據(jù)。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性梯度凝膠電泳技術(shù)(簡稱PCR-DGGE技術(shù))應(yīng)用于微生物研究,能較好地克服傳統(tǒng)微生物培養(yǎng)
2、方法的局限性,獲得更多微生物群落結(jié)構(gòu)多樣性的信息,結(jié)合克隆和序列分析,在環(huán)境診斷領(lǐng)域?qū)兄鴱V闊的應(yīng)用前景。
本文采集了黑龍江省一鉛鋅礦區(qū)附近受不同程度鉛、鋅污染的7個(gè)土壤樣品,總鉛濃度范圍為616.67-3353.33mg/L,總鋅濃度范圍為676.67-1055.0mg/L??傘U、鋅濃度隨著距離污染源的遠(yuǎn)近有著一致的變化趨勢。根據(jù)培養(yǎng)細(xì)菌計(jì)數(shù),鉛、鋅污染對土壤微生物數(shù)量有明顯的抑制。提取土壤細(xì)菌總DNA,用通用引物對其
3、中的16S rDNA進(jìn)行擴(kuò)增,然后進(jìn)行變性梯度凝膠電泳(Denaturing Gradient Gel Electrophoresis),根據(jù)電泳圖譜分析長期受鉛、鋅污染的土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)多樣性變化,不同鉛、鋅污染的樣點(diǎn)群落結(jié)構(gòu)發(fā)生變化并且有土著細(xì)菌的消亡和新細(xì)菌的產(chǎn)生,可見鉛、鋅污染對土壤微生物的組成產(chǎn)生了明顯的影響。不同程度的鉛、鋅污染不僅影響了細(xì)菌種群數(shù)目,還使群落結(jié)構(gòu)以及優(yōu)勢種群發(fā)生了改變。
根據(jù)DGGE指紋圖譜進(jìn)
4、行深入研究,得到礦區(qū)土壤中的優(yōu)勢細(xì)菌的分子信息。同時(shí)采用傳統(tǒng)的細(xì)菌分離篩選方法,從重金屬鉛鋅污染礦區(qū)土壤中分離篩選出10株抗性細(xì)菌,并對這10株細(xì)菌進(jìn)行細(xì)菌學(xué)的生理生化鑒定及分子生物學(xué)鑒定后,確認(rèn)2株細(xì)菌為指紋圖譜指示的優(yōu)勢菌株,即為短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)和銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa),本文分別命名為M1和M2。M1和M2菌株的鉛、鋅抗性能力均已達(dá)到4000mg/L。M1在Pb2
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