重金屬污染土壤淋洗前后生態(tài)毒理診斷方法研究.pdf

1、在我國(guó)，隨著工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，重金屬對(duì)土壤和農(nóng)作物的污染問(wèn)題越來(lái)越突出，部分地區(qū)土壤重金屬污染現(xiàn)象十分嚴(yán)重，一些修復(fù)工作也逐步展開。在實(shí)際工作中，Na2EDTA螯合劑淋洗是一種常用方法，但在修復(fù)效果的評(píng)價(jià)方面往往以目標(biāo)污染物含量為標(biāo)準(zhǔn)，不能準(zhǔn)確反映淋洗后土壤的毒性。本試驗(yàn)針對(duì)化學(xué)分析的不足采用生態(tài)毒理診斷方法，在生物個(gè)體、細(xì)胞和DNA三個(gè)水平上評(píng)價(jià)Na2EDTA淋洗后土壤的生態(tài)毒性，以期找到適合檢測(cè)修復(fù)后土壤生態(tài)毒性的方法。
　　

2、 試驗(yàn)中土壤取自從化小坑村某廢棄電鍍廠，主要目標(biāo)污染物是Cr、Ni、Cu、Zn等重金屬，于2008年12月至2010年3月在華南師范大學(xué)和華南環(huán)科所土壤修復(fù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，研究結(jié)果如下：
　　 1、土壤重金屬生態(tài)毒性的表達(dá)：一般認(rèn)為，重金屬有效態(tài)是造成生物損傷的主要重金屬成分，所以試驗(yàn)中采用提取有效態(tài)的方法表達(dá)土壤的生態(tài)毒性。為了避免有效態(tài)提取劑本身成分對(duì)生物影響，選取去離子水作為土壤重金屬有效態(tài)提取液。試驗(yàn)中土壤淋洗時(shí)間包括2

3、h、6h、12h、18h和24h五個(gè)梯度。
　　 2、試驗(yàn)方法以及檢測(cè)指標(biāo)的選擇：
　　 植物試驗(yàn)：選用蘿卜作為受試植物，以14d生物量抑制率和根伸長(zhǎng)抑制率作為監(jiān)測(cè)指標(biāo)，通過(guò)線性回歸分析得出根伸長(zhǎng)抑制率比生物量抑制率與土壤有效態(tài)稀釋比例相關(guān)性好，適合用作生態(tài)毒理評(píng)價(jià)。因鮮重與土壤有效態(tài)稀釋比例相關(guān)性較干重要高，生物量選擇時(shí)宜選用鮮重進(jìn)行回歸分析。
　　 發(fā)光菌毒性檢驗(yàn)：用BHP9511型水質(zhì)毒性快速檢測(cè)儀以青?；?/p>

4、菌（Vibrioqinghaiensis SP.nov）檢測(cè)淋洗后土壤毒性，對(duì)數(shù)回歸分析結(jié)果表明土壤有效態(tài)稀釋比例與發(fā)光抑制率有較好的相關(guān)性（R2>0.90），且方法運(yùn)用比較成熟，是一種很好的評(píng)價(jià)淋洗后土壤的方法。
　　 蠶豆根尖微核試驗(yàn)：以不同淋洗時(shí)間土壤有效態(tài)提取液分別染毒，觀察細(xì)胞微核，計(jì)算各個(gè)處理的細(xì)胞微核率，結(jié)果表明2h、6h處理組微核率和對(duì)照有顯著性差異，12h、18h和24h與對(duì)照無(wú)顯著差異。蠶豆微核試驗(yàn)是水質(zhì)檢測(cè)

5、中一種常用的診斷方法，具有成熟的實(shí)驗(yàn)流程和獲得認(rèn)可的毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，在修復(fù)后土壤毒性分級(jí)中具有一定的借鑒作用。
　　 單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)（SCGE）：又稱彗星試驗(yàn)，是一種以單細(xì)胞檢測(cè)DNA損傷的方法，用蠶豆根尖細(xì)胞作為試驗(yàn)材料，不同淋洗時(shí)間土壤有效態(tài)提取液染毒，在CASP軟件中分析彗星圖像，指標(biāo)包括彗尾長(zhǎng)度、DNA百分比、尾距和Olive尾距，結(jié)果通過(guò)SPSS統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)表明單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)敏感度高，方法簡(jiǎn)便，適合作為修復(fù)后土壤的毒

6、性評(píng)價(jià)方法。
　　 3、驗(yàn)結(jié)果分析：
　　 在植物試驗(yàn)和發(fā)光菌毒性檢測(cè)試驗(yàn)中分別通過(guò)回歸分析估算各處理的EC50稀釋比例，結(jié)果表明EC50由大到小分別是24h、18h、12h、6h和2h淋洗土壤，24h淋洗土壤生態(tài)毒性最小，2h最大。在蠶豆微核試驗(yàn)中，6h淋洗土壤微核率最高，其次是2h、12h、18h和24h淋洗土壤，其中12h、18h和24h淋洗土壤微核率與對(duì)照無(wú)顯著性差異，其他三組與對(duì)照差異顯著。單細(xì)胞凝膠電泳試驗(yàn)結(jié)