2010cb912300-基于基因密碼子擴(kuò)展的蛋白質(zhì)標(biāo)記新方法

1、項(xiàng)目名稱：基于基因密碼子擴(kuò)展的蛋白質(zhì)標(biāo)記新方基于基因密碼子擴(kuò)展的蛋白質(zhì)標(biāo)記新方法首席科學(xué)家：周德敏周德敏北京大學(xué)北京大學(xué)起止年限：20102010年1月20142014年8月依托部門：教育部教育部碼子“CUA”。在此基礎(chǔ)上從氨酰tRNA合成酶突變庫(kù)中，篩選出可專一結(jié)合這種tRNA和指定非天然氨基酸的氨酰tRNA合成酶突變體。然后再將生命體中mRNA上任意一個(gè)遺傳密碼取代為UAG并在培養(yǎng)基中加入化學(xué)合成的非天然氨基酸，從而在蛋白質(zhì)中的相應(yīng)

2、位置插入具有特殊物理或化學(xué)性質(zhì)的非天然氨基酸。其簡(jiǎn)要技術(shù)路線見(jiàn)圖1:圖1：基因編碼的非天然氨基酸：基因編碼的非天然氨基酸的總體技術(shù)路線及正負(fù)循環(huán)篩選途徑的總體技術(shù)路線及正負(fù)循環(huán)篩選途徑（2）真核）真核細(xì)胞蛋白胞蛋白質(zhì)翻譯起始機(jī)制的解析起始機(jī)制的解析eIF2α磷酸化作為蛋白質(zhì)翻譯起始的“總開(kāi)關(guān)”，受到多種細(xì)胞脅迫信號(hào)的控制，與GCN2PKRHRIPERK等因子發(fā)生直接作用，發(fā)揮尚待確證的復(fù)雜的生物功能。我們將通過(guò)在eIF2α的特定位點(diǎn)引入