全自動(dòng)血球儀sysmex xe-2100的試劑技術(shù)點(diǎn)評(píng)——紅色熒光反應(yīng)

1、全自動(dòng)血球儀SysmexXE2100的試劑技術(shù)——紅色熒光反應(yīng)作者：HideakiMatsumoto（譯自SysmexJournalInternational）關(guān)鍵詞全自動(dòng)血液分析儀XE2100紅色熒光聚次甲基染料熒光染料緒論緒論在臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定領(lǐng)域，有多種染料用于病理學(xué)實(shí)驗(yàn)、血液形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)和尿液分析實(shí)驗(yàn)1)。大家熟知的染料包括用于病理學(xué)實(shí)驗(yàn)的蘇木精和派若寧Y，以及用吉姆薩染色的天青B和伊紅Y。我們Sysmex的產(chǎn)品也用到染料，如198

2、8年上市的，世界上最早的商業(yè)用途全自動(dòng)網(wǎng)織紅分析儀R1000TM，就用了熒光染料堿性槐黃2)；全自動(dòng)尿沉渣分析儀UF系列3)中應(yīng)用了菲啶和羰花青；最近上市的XE2100TM使用了聚次甲基染料，用來(lái)進(jìn)行WBC四分類(lèi)、網(wǎng)織紅細(xì)胞測(cè)定、有核紅細(xì)胞測(cè)定，該染料被紅色半導(dǎo)體激光（波長(zhǎng)為633nm）激發(fā)后發(fā)出660nm或更高波長(zhǎng)的紅色熒光4)。聚次甲基的特點(diǎn)概括如下。光和顏色光和顏色在討論染料之前，我們必須理解光的顏色和固體物質(zhì)顏色的不同之處。三種

3、基本的光是固體物質(zhì)顏色彼此區(qū)別的基礎(chǔ)。當(dāng)白色光，如太陽(yáng)光，用棱鏡分光后，會(huì)出現(xiàn)七種顏色，按波長(zhǎng)下降順序依次是紅、橙、黃、綠、藍(lán)、靛、紫。波長(zhǎng)越短，能量越大。在Griffith描述的圖上，光的顏色分為如圖2所示。在該顏色環(huán)上，數(shù)字19代表各自的光譜顏色，而數(shù)字10即紫色代表紅色和紫羅蘭色的混合色，以某種顏色為中界，混合與其相鄰的兩種顏色，將會(huì)產(chǎn)生該種中界的顏色，混合紅色和黃色產(chǎn)生橙色，相互面對(duì)的顏色是互補(bǔ)的，混合相互面對(duì)的顏色產(chǎn)生白色光。

4、三種基本的光是紅色（R）、綠色（G）、藍(lán)色（B）。當(dāng)用放大鏡觀察電視機(jī)的陰極射線管或電腦顯示器時(shí)，你會(huì)發(fā)現(xiàn)顯示器表面由三種光組成，它們是R、G和B。在彩色電視上它們產(chǎn)生出各種顏色。聚次甲基染的特征聚次甲基染的特征聚次甲基染料作為一種適用于現(xiàn)代工業(yè)的染料10)，廣泛地用作紅外吸收染料、染料激光11)、LB膜（單分子膜，用于生產(chǎn)CD盤(pán)）、彩色膠片感光劑，但很少用作織品染料。聚次甲基的結(jié)構(gòu)特征是結(jié)合一個(gè)雜環(huán)核（環(huán)上含有氮、硫、氧）和一個(gè)次甲基

5、鏈（CH2=）。該染料的另一個(gè)特征是理論上可以從雜環(huán)核的種類(lèi)，側(cè)鏈次甲基團(tuán)長(zhǎng)度來(lái)計(jì)算其吸收光的波長(zhǎng)。正是由于這個(gè)原因，當(dāng)產(chǎn)生了對(duì)于某一特定波長(zhǎng)的高敏感彩色膠片，我們可以通過(guò)計(jì)算得到一種新合成的感光劑。有多種形式的雜環(huán)核用于聚次甲基染料，典型的例子。該圖按雜環(huán)核的吸光度下降順序排列。隨著和雜環(huán)核相連的次甲基鏈（CH2=CH2）m的逐個(gè)增加，染料的吸收波長(zhǎng)大約增加100nm，由于不同名稱(chēng)和結(jié)構(gòu)的聚次甲基染料吸收波長(zhǎng)不同，請(qǐng)參考本文附錄中的摘

6、要信息。聚次甲基染料在細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用聚次甲基染料在細(xì)胞學(xué)的應(yīng)用聚次甲基染料很少應(yīng)用于血液形態(tài)學(xué)或病理學(xué)實(shí)驗(yàn)，而廣泛的用于細(xì)胞膜電位的研究13)。Waggoner121416)和Kamino1719)對(duì)用聚次甲基染料來(lái)顯示膜電位變化的慢回應(yīng)作了許多報(bào)道。另外也有許多用DiOC6（3）來(lái)研究線粒體和內(nèi)織網(wǎng)的報(bào)道2024)。噻唑黃也是一種聚次甲基染料2526)，用于通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)來(lái)進(jìn)行瘧原蟲(chóng)和網(wǎng)織紅的計(jì)數(shù)。該染料的結(jié)構(gòu)特征是不對(duì)稱(chēng)的雜環(huán)核。幾乎

7、所有應(yīng)用的光源是氬激光或發(fā)出藍(lán)光的熒光顯微鏡。而XE2100利用紅色半導(dǎo)體激光和聚次甲基染料，可以進(jìn)行WBC四分類(lèi)計(jì)數(shù)、有核紅細(xì)胞測(cè)定、網(wǎng)織紅細(xì)胞測(cè)定（血小板測(cè)定）。如上所述，可以通過(guò)改變聚次甲基染料的分子式來(lái)改變?nèi)玖系淖畲笪詹ㄩL(zhǎng)，但聚次甲基鏈越長(zhǎng)，所獲得的光的漂移越大。因?yàn)殡S著聚次甲基鏈的長(zhǎng)度的增加，導(dǎo)致分子量的增加，降低了溶解度，降低了化學(xué)穩(wěn)定性，這樣就必須采取措施來(lái)提高染料的溶解度和穩(wěn)定性。WBC4DIFFWBC4DIFF計(jì)數(shù)試

8、劑（計(jì)數(shù)試劑（STROMATOLYSER4DLSTROMATOLYSER4DL，STROMATOLYSER4DSSTROMATOLYSER4DS）STROMATOLYSER4DL中的表面活性劑溶解紅細(xì)胞和血小板，同時(shí)白細(xì)胞膜上打孔，然后，存在于STROMATOLYSER4DS中的聚次甲基染料進(jìn)入白細(xì)胞，將核酸和細(xì)胞質(zhì)中的細(xì)胞器如內(nèi)織網(wǎng)染色。因?yàn)槲闯闪＜?xì)胞出現(xiàn)在中性粒細(xì)胞上方的較高熒光區(qū)域，異形淋巴細(xì)胞出現(xiàn)在淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞上方的較高熒