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1、醫(yī)學細胞生物學醫(yī)學細胞生物學6月1717日14:00~16:0014:00~16:00名解名解2020填空填空3030解答解答2020問答問答2020是非是非2020緒論緒論1.細胞生物學細胞生物學:把形態(tài)與功能形態(tài)與功能相結合,以整體與動態(tài)的觀點,把細胞的顯微水顯微水平、亞顯微水平和分子水平平、亞顯微水平和分子水平有機結合,研究細胞的基本生命活動規(guī)律。2.細胞生物學研究內(nèi)容①細胞的形態(tài)結構和化學組成②細胞核細胞器的功能③細胞的增殖與分
2、化④細胞的衰老與死亡。3.細胞生物學的發(fā)展簡史①細胞的發(fā)現(xiàn)②細胞學說的創(chuàng)立與形成③細胞超微結構研究的興起④現(xiàn)代細胞生物學與分子生物學的興起。第二章第二章1.肉眼的分辨率0.2mm光學顯微鏡的分辨率0.2um,電子顯微鏡的最大分辨率0.14nm2.觀察細胞及未經(jīng)染色的生物標本的形態(tài)結構①相差顯微鏡②微分干涉顯微鏡(采用的是平面偏正光)。3.電子顯微鏡技術由透射電鏡技術、掃描電鏡技術、電子顯微術透射電鏡技術、掃描電鏡技術、電子顯微術組成。4
3、.超薄切片技術的技術過程有固定、脫水、包埋、切片和染色固定、脫水、包埋、切片和染色。固定一般選擇戊二醛和鋨酸戊二醛和鋨酸雙重固定,包埋時常用的包埋劑是環(huán)氧樹脂包埋劑是環(huán)氧樹脂。5.負染色技術:利用電子密度比標本高的重金屬鹽將生物標本包圍起來,增強背景散射電子的能力以提高反差,在黑暗的背景下顯示標本的形態(tài)結構。6.冷凍蝕刻技術:又稱冷凍復型,此技術能保持細胞原來的結構,使之接近于生活狀態(tài),立體感鮮明,主要用于生物膜結構的研究。7.冷凍蝕刻
4、技術的方法:首先將經(jīng)預處理的生物標本在冷凍劑中快速冷凍,然后放到真空噴鍍儀中冷凍斷裂,再加熱使斷裂面上部分冰升華,立刻在斷裂面上噴鉑、噴碳形成一層復型膜,這一層復型膜印下了生物樣本斷裂面上的立體結構,然后將生物體樣本腐蝕掉,用銅網(wǎng)將復型膜撈起,就制成了冷凍蝕刻的電鏡樣品,可在電鏡下看到不同于超薄切片的具體立體感強的圖像。8.免疫熒光術:用熒光素標記抗體,并于熒光顯微鏡下觀察。9.免疫電鏡術:抗體與辣根過氧化物酶等結合,進行酶顯示后,再用
5、電鏡觀察。10.干細胞是一類具有自我更新與增殖分化能力的細胞,能產(chǎn)生表型與基因型和自己完全相同的子細胞。11.干細胞可分為三種類型:全能性干細胞,具有分化為完整個體的潛能多能性干細胞,具有分化出多種組織細胞的潛能單能干細胞,也稱定向或?qū)D芨杉毎?,這類干細胞具有分化形成某一種類型細胞的能力。12.胚胎干細胞(ESC)是一類從早期胚胎內(nèi)細胞團或原始生殖細胞分離和克隆出的,具有自我更新和發(fā)育全能性并產(chǎn)生分化后代能力的早期細胞。13.多向分化潛
6、能是ESC細胞的主要特征,體外培養(yǎng)條件的略微變化就可誘導分化機制的啟動。14.超速離心法的應用:分級離心小鼠肝線粒體提取肝組織研磨后濾液經(jīng)2500rpm15min㈠余下沉淀2500rpm15min㈡上清涂片17000rpm20min①棄上清②沉淀氯化鈣混勻17000rpm20min15.熒光原位雜交(FISH)為一項分子細胞遺傳學技術,是一種廢放射性原位雜交技術。其原理是用已知的標記單鏈核算為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的
7、單鏈核算進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于5.P位點即肽酰tRNA位點,又叫供位或肽?;稽c,主要位于大亞基。6.E位點是脫?;鵷RNA離開核糖體的出口部位。7.mRNA結合位點:蛋白質(zhì)的起始合成,首先需要mRNA同小亞基的結合,推測在核糖體上必然有與mRNA結合的位點。8.mRNA中與核糖體16SrRNA結合的序列稱為SD序列。9.蛋白質(zhì)生物合成的具體步驟:氨基酸的活化與轉(zhuǎn)運;肽鏈合成的啟動;肽鏈延伸(進位,轉(zhuǎn)肽,脫落,移
8、位);肽鏈合成的終止。10.多聚核糖體:在蛋白質(zhì)合成過程中,同一條mRNA分子能夠同多個核糖體結合,同時合成若干條蛋白質(zhì)多肽鏈。結合在同一條mRNA上的核糖體稱為多聚核糖體。第八章第八章1.內(nèi)膜系統(tǒng):指細胞內(nèi),在結構、功能上或發(fā)生上相互聯(lián)系成為連續(xù)統(tǒng)一體的模性結構,包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、過氧化氫體、微體和各種小泡。2.葡萄糖—6—磷酸酶被視為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的標志酶。3.粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能:①與蛋白質(zhì)的合成;②與蛋白質(zhì)的糖基化;③與蛋白質(zhì)
9、的運輸;④與膜脂的合成。4.信號肽:在蛋白質(zhì)合成時,先由游離核糖體翻譯出信號密碼編碼的一段多肽,一般由16~30個疏水氨基酸組成,其中至少含有9個疏水氨基酸。5.信號肽能夠引導游離核糖體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜結合為附著核糖體,完成蛋白質(zhì)的合成.6.SPR介導核糖體與粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的結合:信號識別顆粒(SRP)存在于細胞質(zhì)中,由6個不同的多肽亞單位和一個RNA分子構成。SPR既能識別露出核糖體外的信號肽,又能識別內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的SRP受體,并與他們特異性結
10、合,從而將核糖體引申到粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上。P127圖7.內(nèi)信號肽能從不同的方向轉(zhuǎn)移多肽鏈,轉(zhuǎn)移方向取決于內(nèi)信號肽兩端氨基酸所攜帶的電荷,帶正電荷多的一端留在細胞基質(zhì)側,而帶正電荷少的一端轉(zhuǎn)移入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)。8.ER—駐留蛋白是留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中發(fā)揮作用的自身結構蛋白和酶蛋白。ER—駐留蛋白為什么不能被送往細胞其他部位?因為含有ER ̄保留信號,即在蛋白羧基端有4個氨基酸負責保留蛋白在ER腔中。9.分子伴侶:能識別正在合成的或已部分折疊的多肽,并與這
11、些多肽的一定部位結合,予以正確的折疊但其在這一過程中只起陪伴作用不參與最終底物的形成10.駐留蛋白的羧基末端都有駐留信號序列:Lys—Asp—Glu—Aeu,他們能與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的受體結合,使其駐留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,對新生肽鏈進行修飾、折疊和轉(zhuǎn)運。11.在糖蛋白中,糖與蛋白質(zhì)的連接方式有兩種,一種是N—連接的寡聚糖蛋白,它是糖蛋白中最普通的一種,另一種是O—連接的寡聚糖蛋白,前者主要在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中合成,后者主要在高爾基復合體中合成。12.滑面
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